阴道菌群与CIN、宫颈癌伴HPV感染相关性的研究

韩华 陈闻月

宫颈癌是妇科常见的一种恶性肿瘤，发病率占女性生殖道恶性肿瘤的首位，且近年来发病呈年轻化趋势，已成为严重的公共卫生问题。宫颈上皮内瘤样病变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）是宫颈病变过程中的癌前病变，发病率也呈逐年上升。目前研究证实高危型人乳头瘤病毒（HPV）持续感染是CIN及宫颈癌发生的必要因素[1]。但并不是所有HPV感染的CIN患者均会发生癌变。而阴道菌群作为维护阴道微环境稳定的重要因素，其在HPV持续感染过程中是否扮演一定的角色一直被人们所关注。然而，目前并不清楚到底哪些阴道细菌与CIN及宫颈癌有关。有研究认为滴虫、念珠菌等病原菌自身及其分解产物可通过破坏阴道上皮、降低宫颈分泌液的黏稠度及免疫球蛋白水平而促进宫颈癌变的发生，同时也证实HPV感染与阴道菌群失调密切相关[2-3]。但也有研究表明上述病原菌与CIN及宫颈癌的发生并无相关性[4]。鉴于此，本研究拟进一步探索阴道菌群与CIN、宫颈癌伴HPV感染的相关性。

1 对象和方法

1.1 对象 选择2016年1月至2017年2月在本院就

诊体检发现的不同宫颈病变的患者153例作为研究对象，其中CIN 123例，宫颈癌30例。纳入标准：（1）CIN及宫颈癌均经病理学确诊，年龄20～65岁；（2）既往有性生活史；（3）无其他肿瘤及免疫性疾病等病史；（4）无糖尿病、冠心病等慢性病病史。排除标准：（1）月经期、妊娠期及哺乳期妇女；（2）既往3d内曾有性生活史、妇科检査、阴道冲洗或阴道内用药者；（3）在本院或外院已经全身或局部治疗的患者，所有指标检测结果不齐全的患者。根据HPV DNA检测结果将其分为HPV阳性组和HPV阴性组两组。其中HPV阳性组120例（包括CINⅠ级30例、CINⅡ级30例、CINⅢ级30例，宫颈癌30例），平均年龄（46.3±7.2）岁；孕 1～2次者 97例，孕次＞3次者23例。HPV阴性组33例（包括CINⅠ级14例、CINⅡ级10例、CINⅢ级9例），平均年龄（45.6±6.8）岁；孕1～2次者25例，孕次＞3次者8例。两组患者年龄、孕次比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

1.2 方法 在初诊时取阴道分泌物、宫颈分泌物及脱落细胞、宫颈组织标本，采用导流杂交基因芯片技术检测HPV DNA，悬滴湿片法检测滴虫，革兰染色检测念珠菌、淋球菌、乳酸杆菌。采用培养法进行支原体属及衣原体属鉴定，培养基为珠海迪尔生物工程有限公司生产。

1.3 统计学处理 采用SPSS 18.0统计软件。计量资料以表示，组间比较采用两独立样本t检验；计数资料组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者阴道菌群构成情况比较 HPV阳性组乳酸杆菌阴性率、念珠菌及衣原体感染率均高于HPV阴性组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。HPV阴性组未检测出滴虫及淋球菌，而HPV阳性组两者感染率分别为7.5%和1.7%。两组滴虫、淋球菌及支原体感染率比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表1。

表1 两组患者阴道菌群构成情况比较[例（%）]

2.2 HPV阳性组HPV感染情况 HPV单一感染率随宫颈病变的严重程度呈上升趋势，而多重感染率呈下降趋势（均P＜0.05）。同时，HPV感染亚型中以HPV16型占比最高，且随宫颈病变的严重程度感染率呈上升趋势（P＜0.05），见表 2。

表2 HPV阳性组HPV感染情况[例（%）]

2.3 HPV阳性组阴道菌群构成情况 乳酸杆菌阴性率、衣原体感染率随着宫颈病变的严重程度均呈上升趋势（均P＜0.05）。不同宫颈病变组滴虫、淋球菌、念珠菌及支原体感染率比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表 3。

表3 HPV阳性组阴道菌群构成情况[例（%）]

3 讨论

宫颈癌是女性生殖系统常见的一种恶性肿瘤，其病理生理进程是由癌前病变逐渐演化成癌症的过程。其中，CIN是其主要的癌前病变表现。据既往大量研究证实，HPV感染是CIN及宫颈癌的主要危险因素[1,5]。然而，由于女性阴道微环境具有自我清洁感染的能力，并不是只要感染HPV就会进展成癌症，仅约5%～10%的患者会存在持续的HPV感染，最终成为罹患宫颈癌的高危人群[6]。阴道菌群是维护女性阴道微环境稳定的重要因素，其间不同种类及数量的微生物与阴道局部环境及机体相互制约、互相协调，共同抵制外来微生物的侵犯、黏附及繁殖。而一旦上述平衡被破坏，则会增加宿主感染HPV的风险。因此，进一步研究阴道菌群与CIN、宫颈癌伴HPV感染的相关性可能会为临床防治宫颈癌提供更多的理论依据。

本研究显示HPV阳性组乳酸杆菌阴性率显著高于HPV阴性组，且乳酸杆菌阴性率随着宫颈病变的严重程度呈上升趋势。众所周知，正常情况下女性阴道局部优势菌群为乳酸杆菌。其一方面定植于阴道黏膜上皮而对其他微生物形成空间占位效应，同时可分泌大量细胞外多聚糖、细胞壁肽聚糖，形成生物被膜，从而达到保护机体免遭病原体入侵的作用；另一方面，其不仅可直接刺激机体免疫系统分泌多种免疫因子以增强机体免疫应答效率，而且可通过乳酸、H2O2、细菌素、生物表面活性物质及细菌素样物质等多种代谢产物直接抑制外来致病菌的生长，从而达到维持阴道局部稳态的作用[7-8]。研究也证实乳酸杆菌能显著抑制宫颈癌小鼠瘤体的生长[9]。本研究显示HPV阳性组念珠菌及衣原体感染率也显著高于HPV阴性组，且感染率随着宫颈病变的严重程度呈上升趋势；但两组滴虫及淋球菌感染率比较差异无统计学意义。然而，既往有研究认为滴虫的感染能大大增加HPV感染和宫颈癌发生率[10]，与本研究结果完全不同。分析导致这一差异的原因可能是滴虫与宫颈病变发生无关，也可能与人种差异有关。新近一项回顾性研究发现成年女性阴道毛滴虫的感染率仍高达7.37%，其可延长HPV感染的持续时间，与职业、卫生知识和洁阴习惯等密切相关[11]。这提示，尽管目前对于HPV感染与滴虫感染的相关性存在争议，但仍需重视。

综上所述，HPV感染可导致阴道局部乳酸杆菌减少，其正常生理作用丧失，从而使得阴道局部微生物平衡破坏，菌群结构发生紊乱，后者又进一步增加机体易感染HPV的风险，形成恶性循环，最终促进宫颈癌的发生。

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