细辛水煎液抗炎镇痛作用研究

聂安政，茹庆国，付智慧*

（1.郑州大学第一附属医院，河南 郑州 450052；2.河南省食品药品检验所，河南 郑州 450008）

细辛为马兜铃科植物北细辛［Asarum heterotropoidesFr.Schmidt var.mandshuricum（Maxim.）Kitag.］、汉城细辛（Asarum sieboldiiMiq.var.seoulense Nakai）或华细辛（Asarum sieboldiiMiq.）的干燥根和根茎［1］。细辛始载于《神农本草经》，性温，味辛，归肺、肾、心三经，具有解表散寒、祛风止痛、通窍、温肺化饮的功效，主要用来治疗风寒头痛、牙痛、痹痛及咳喘痰稀等症，至今已有近2 000 多年的临床应用历史［2－5］。现代研究发现，临床上多用细辛治疗牙痛、坐骨神经痛、顽固性三叉神经痛与类风湿关节炎等疾病［6－7］，但关于细辛水煎液抗炎镇痛的基础研究却鲜有报道，本研究采用小鼠耳廓肿胀实验、醋酸扭体实验、热板法实验探讨细辛水煎液的抗炎镇痛作用，以期为细辛的临床应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SPF 级昆明种小鼠120 只，雌雄各半，体质量（18±2）g，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，动物生产许可证号：SCXK（京）2020－0004。

1.2 药物、试剂及仪器

细辛购买于郑州大学第一附属医院，由郑州大学第一附属医院中医药学部王娟教授鉴定为马兜铃科植物华细辛（Asarum sieboldiiMiq.）的根及根茎。取细辛1 000 g，加水5 000 mL煮沸1 h，去渣取汁，将残渣加水5 000 mL 再煎煮1 h，过滤，合并2 次药液，旋转蒸发浓缩，灌胃前以蒸馏水分别调整浓度至0.8、0.4 g/mL（生药量）。地塞米松（陕西白鹿制药股份有限公司，国药准字H44020701）；二甲苯（新乡市正鑫化工有限公司，CAS登记号：95－47－6）；冰醋酸（山东权泰化工科技有限公司，CAS登记号：64－19－7）；打孔器（美国kentscientific，货号：INS500075－5）；电子天平（上海力辰仪器科技有限公司）。

1.3 实验方法

1.3.1 小鼠耳肿胀实验

取小鼠40 只，雌雄各半，按体质量随机分为对照组、地塞米松组和细辛水煎液高、低剂量组，每组10只。地塞米松组给予地塞米松溶液1.5 mg/kg，细辛水煎液高、低剂量组分别给予12.0、6.0 g/kg的细辛水提物，给药体积20 mL/kg，对照组给予等体积的蒸馏水。每日1次，连续3 d，末次给药1 h于右耳两面均匀涂抹二甲苯0.05 mL，左耳涂抹生理盐水对照，30 min后将小鼠脱颈椎处死，剪下两耳，用打孔器直接在两耳相同部位打孔，分别称重，记录数据。

肿胀度（g）=右耳质量－左耳质量

1.3.2 小鼠扭体实验

动物分组灌胃同“1.3.1”。每日1 次，连续给药3 d，于末次给药后1 h，腹腔注射0.2 mL的1%醋酸，记录15 min内出现扭体反应的次数。

1.3.3 热板法测定痛阈值

动物分组灌胃同“1.3.1”。每日1 次，连续给药3 d，末次给药后30、60 min测量并记录痛阈值。

1.4 统计方法

采用SPSS 17.0 统计软件进行统计分析，计量资料服从正态分布时以±s表示，采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD 法（方差齐时）或Dunnett'T3 检验（方差不齐时）。P< 0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 小鼠耳廓肿胀度的变化情况比较

与对照组比较，地塞米松组小鼠耳廓肿胀度显著性降低（P<0.01）；细辛水煎液高、低剂量组肿胀度显著性降低（P<0.01）。结果见表1。

表1 细辛水煎液对小鼠耳廓肿胀度的影响（±s）

表1 细辛水煎液对小鼠耳廓肿胀度的影响（±s）

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

组别对照组地塞米松组高剂量组低剂量组n 10 10 10 10剂量—1.5 mg/kg 12 g/kg 6 g/kg肿胀度（g）0.025 4±0.002 5 0.021 7±0.002 6*0.013 5±0.002 1**0.013 6±0.002 5**

2.2 小鼠扭体次数的变化情况比较

小鼠在造模后15 min，地塞米松组扭体次数较对照组显著降低（P< 0.01）；细辛水煎液高剂量组扭体次数较对照组明显降低（P <0.05），细辛水煎液低剂量组未见显著差异（P>0.05）。结果见表2。

表2 细辛水煎液对小鼠扭体次数的影响（±s）

表2 细辛水煎液对小鼠扭体次数的影响（±s）

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

组别对照组地塞米松组高剂量组低剂量组n 10 10 10 10剂量—1.5 mg/kg 12 g/kg 6 g/kg扭体次数（次）20.5±2.6 13.4±2.1**16.7±2.2*19.0±2.0

2.3 小鼠痛阈值的变化情况比较

给药后30 min，地塞米松组小鼠痛阈值较对照组显著升高（P<0.05）；细辛水煎液高、低剂量组小鼠痛阈值较对照组均未见显著差异（P> 0.05）；给药后60 min，各给药组痛阈值较对照组均显著升高（P<0.01）。结果见表3。

表3 细辛水煎液对小鼠痛阈值的影响（±s）

表3 细辛水煎液对小鼠痛阈值的影响（±s）

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

组别对照组地塞米松组高剂量组低剂量组n 10 10 10 10剂量—1.5 mg/kg 12 g/kg 6 g/kg痛阈值（s）给药后30 min 16.15±1.97 19.11±1.65*16.46±3.78 16.56±1.66给药后60 min 13.39±1.35 20.78±1.55**21.01±3.69**18.52±2.10**

3 讨论

细辛始载于《神农本草经》，在临床应用较为广泛，早在《伤寒杂病论》就记载含有细辛的方剂19 首［8］；隋唐时期的《备急千金要方》共收载含细辛内服汤剂6 首［9］；清代梳理发现有373 首含细辛方剂［10］；《中华人民共和国药典》（2020 版）收录含细辛中药制剂42 种［11］。2020年新冠疫情爆发以来，清肺排毒汤（细辛含量达6 g）成为首个防疫通用方广泛应用［12－16］。然而，关于细辛抗炎镇痛的相关研究报道却较不多见，明确细辛的抗炎镇痛作用可以为细辛的临床应用提供理论依据，也可以为细辛抗炎镇痛的作用机制奠定基础。

本实验结果显示，细辛水煎液高剂量组（12.0 g/kg）可明显减少醋酸所致小鼠疼痛扭体次数，延长小鼠扭体潜伏期（P<0.05）；细辛水煎液高、低剂量组（12.0、6.0 g/kg）可抑制致炎物引起的小鼠耳廓肿胀，明显降低小鼠耳肿胀度（P<0.01）。给药后30 min，细辛水煎液高、低剂量组（12.0、6.0 g/kg）对小鼠痛阈值的影响不明显；给药后60 min，可显著提升小鼠的痛阈值（P<0.01）。以上结果提示细辛具有一定的抗炎镇痛作用。然本实验仅对细辛的抗炎镇痛作用只是进行了初步的研究，之后拟对细辛水提物的有效部位和化学成分进行进一步分离、纯化和鉴定，确定其抗炎镇痛的活性成分，并深入探讨细辛抗炎镇痛效用机制。