蒙药阿给镇痛作用的研究

1.内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010110；2.内蒙古煤炭生态环境研究院，内蒙古 呼和浩特 010110

蒙药材阿给，即菊科蒿属多年生小半灌木冷蒿(ArtemisiafrigidaWilld.)，又名小白蒿、菟毛蒿，在中国集中分布在内蒙古[1]。阿给全草入蒙药，味苦，性凉、涩、燥、有止血、祛风、消肿的功效，主治各种出血、关节肿胀、肾热、月经不调、疮痈[2]。冷蒿也可全草入中药，主要治疗治黄疸型肝炎、胆囊炎、小便不利、皮肤瘙痒、湿疹、蛔虫病和蛲虫病。然而，文献中没有记载阿给的镇痛作用，其机制尚不清楚，为更科学地开发冷蒿的药用价值，本实验对阿给水提取浓缩后，得到阿给提取物，然后采用乙酸致小鼠扭体反应和电热板法急性疼痛模型对提取物进行镇痛作用的研究。

1 材料

1.1 试验药物、试剂 蒙药材阿给采自内蒙古乌兰察布市四子王旗(地理位置为41°52′39″N，111°07′25″E，海拔1370m)。地上部分采回后于室外晒干，室温下贮藏备用。

阿司匹林片(石药集团欧意药业有限公司，批号:017150275)。乙酸为分析纯。

1.2 动物 健康昆明种小白鼠，体重(18±2)g，由内蒙古大学实验动物研究中心提供，清洁级，许可证号：SCXK(蒙)2002-0001。

1.3 仪器 电子天平(精密科学仪器有限公司)，智能热板仪(成都泰盟软件公司)。

2 试验方法

2.1 阿给提取物的制备 将冷蒿的地上部分粉碎成粗粉。称取粗粉10.0g，置于250mL量瓶中，加入100mL蒸馏水，煎煮1.5h，共2次，趁热抽滤并用蒸馏水清洗滤渣及容器2～3次，合并滤液，减压浓缩至约5mL，用蒸馏水转移至10ml量瓶中并定容至刻度，得1∶1药液，浓度为1g生药/mL(即100g/kg)的阿给水提物供试品。

2.2 小鼠乙酸扭体实验 实验小鼠50只，随机分为5组，分别为模型对照组、阿司匹林组(0.04g/kg)、阿给水提取物高、中、低剂量组(生药60.0、30.0、15.0g/kg)。灌胃给药1次/d，连续给药7 d，末次给药后30 min，腹腔注射0.6%冰乙酸溶液(现配现用)0.2 mL/只致痛，观察并记录各组小鼠出现扭体反应的潜伏期及15 min 内各小鼠扭体(扭体表现为腹部收缩内凹，同时伴有躯干扭曲、臀部抬高和后肢伸展等特征)的次数，计算镇痛率。

镇痛率(%)=(模型组平均扭体次数-给药组平均扭体次数)/模型组平均扭体次数×100%

2.3 小鼠电热板法实验 用智能热板仪[(温度55±0.5)℃]筛选两次痛阀平均值大于5s而低于30s的雌性小鼠50只，分组、给药同2.2，每天灌胃给药1次，连续7次。于末次给药后第15、30、60、90min记录其被放入热板至出现舔后足的反应时间(s)作为痛阈值，观察各组间药物对动物痛阈值的影响。

3 结果

3.1 阿给水提取物对乙酸致小鼠扭体反应的影响 腹腔注射乙酸后，小鼠呈现较明显的扭体反应，阿司匹林组痛组与模型对照组比较，扭体潜伏期延长、扭体次数降低，差异显著(P<0.01)；阿给水提取物组对扭体潜伏期也体现出良好的延长作用，扭体次数明显下降，且具有一定的量效关系，与模型对照组比较小鼠15 min内扭体次数差异显著(P<0.05、P<0.01)；扭体抑制率高、中剂量组较高。见表1。

组别剂量/g/kg扭体潜伏期/s扭体次数抑制率/%空白对照组—0.00.0—模型对照组—9.3±0.539.7±0.5—阿司匹林组0.049.5±0.2**7.3±0.5**81.4阿给水提取物60.07.0±0.3**14.5±0.7**63.430.05.2±0.4**20.6±0.3**48.115.03.2±0.7*28.7±0.6*27.7

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

3.2 阿给水提取物对小鼠电热板刺激的镇痛作用 给药前，各组小鼠的痛阈值差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组比较，阳性药物阿司匹林组给药后能明显延长小鼠的痛阈值，差异显著(P<0.01)。阿给水提取物低、中、高剂量组在给药后均能不同程度地延长小鼠对热板刺激的疼痛反应潜伏期阈值。给药15、30 min后，各组小鼠痛阈值均明显延长，且高、中剂量阿给水提取物作用更明显(P<0.01)；给药60、90 min后，高、中剂量阿给水提取物能显著延长小鼠的痛阈值(P<0.05)。见表2。

组别剂量/g/kg痛阈值(sec)给药前给药后15min给药后30min给药后60min给药后90min空白对照组—17.3±0.517.8±0.516.6±0.218.1±0.317.8±0.1阿司匹林组0.0417.8±0.221.1±0.3**22.8±0.6**21.0±0.4**19.6±0.2**阿给水提取物60.017.0±0.322.0±0.5**23.4±0.2**22.1±0.1**18.7±0.2**30.016.8±0.420.4±0.3**20.2±0.7**21.1±0.4**18.9±0.5*15.017.1±0.718.6±0.7*18.8±0.1*17.5±0.317.3±0.4

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

4 讨论

疼痛是机体受到环境刺激后发生的一种病理、生理过程，其既是一种防御性反应也是多种疾病的表现症状之一。阿司匹林是经典的非甾体抗炎药，也是目前世界上应用最广泛的镇痛药，通常认为它是一种外周镇痛药[3-4]，也可作用于下视丘而产生中枢镇痛作用[5]，故在考察阿给水提取物的镇痛作用时以其作为阳性对照药。

本研究在镇痛实验中选用物理刺激的热板法和化学刺激的扭体法。乙酸扭体实验是经典的镇痛实验模型，是筛选弱镇痛药的一种敏感、简便、重复性好的方法，是评价和筛选镇痛药的常用模型[6]。小鼠在乙酸刺激下，腹痛过程扭体明显，容易观察，从实验计算所得抑制率显示镇痛作用明显，阿给水提取物低、中、高3 种剂量均表明阿给水提取物良好的镇痛效果。热板法致痛是由于热刺激足部的感觉神经末梢而使机体产生痛觉，类似于急性锐痛[7]。本实验结果表明, 阿给水提取物减少扭体反应次数，能延长醋酸所致小鼠扭体反应的潜伏期，阿给水提取物低、中、高剂量组在给药后均能不同程度地延长小鼠对热板刺激的痛阈值，说明其具有良好的镇痛作用，而其更深入的镇痛机理有待进一步研究。