染色体微阵列技术在产前诊断先天性心脏病中的应用价值

杜媛媛

【摘  要】目的： 分析染色体微阵列技术对于胎儿先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）产前诊断的价值，为提高CHD的产前检出率降低怀孕风险提供参考。方法：选择在我院经超声检查确诊为胎儿CHD的单胎孕妇89例，诊断时间为2016年8月至2019年8月，先对符合研究条件的89例胎儿进行染色体核型分析，再用染色体微阵列（chromosome microarray analysis，CMA）检测核型分析无异常的胎儿，将检测数据与国际公共数据库中的指标对比，对拷贝数变异（copy number variants，CNVs）性质进行判断。结果：经染色体核型分析，有6例胎儿的染色体显示异常，检出率为6.74%（6/89），用CMA检测其余83例核型分析正常的胎儿。从心脏单发异常的胎儿中检测到1例致病性CNVs，为Xp22.33微重复（369.51kb），检出率为2.00%（1/50）;从心脏复杂异常的胎儿中检测出2例致病性CNVs，分别为Xp22.33微缺失（355.87kb）和22q11.21微缺失（3.17Mb），检出率为6.06%（2/33）。结论： 染色体核型分析无法实现对全基因组的快速检测，对于亚显微的异常染色体以及未知染色体的检测效果不理想。CMA技术具有较高的分辨率，可以明显提高致病性CNVs的检出率，对于CHD胎儿的产前诊断有重要价值。

【关键词】染色体微阵列;产前诊断;先天性心脏病

先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）是新生儿中发病率较高的一种先天缺陷疾病，其发生和染色体异常（微缺失、微重复等）或者基因突变密切相关，因此对CHD的研究需要与全基因测序以及遗传学等内容联系起来，以应用于临床的诊断和治疗中。染色体微阵列（chromosome microarray analysis，CMA）与传统染核型分析相比，具有分辨率高，检测快等优势，临床诊断一般先进行核型分析，如果未发现异常，再进行CMA检测，以进一步提高诊断的准确率。为进一步了解CMA对产前诊断CHD的价值，进行如下研究。

1 资料和方法

1.1基本资料

选择经我院超声检查确诊胎儿CHD的单胎孕妇89例，诊断时间为2016年8月至2019年8月。年龄分布：20～30岁64.04%（57/89），31～38岁35.96%（32/89），中位年龄（28.3±1.6）岁，20周≤孕周≤31周，平均（25.8±1.3）周，包括胎儿心脏单发异常54例，复杂异常35例。排除影响研究结果合理性的其他因素，开展研究前医生将研究相关事项均详细告知孕妇及家属，经其同意后开展研究。

1.2方法

核型分析：抽取胎儿脐血并进行血细胞离心处理，将细胞培养10天至14天，在生长良好的状态下加入秋水仙碱，收集细胞，用G显带方法观察染色体，确定其核型。再用CMA检测核型分析无异常的细胞：选择USA生产的Affymetrix品牌CytoScan 750k芯片试剂盒，拷贝数探针数量约75万，SNPs探针数量约20万，可以全面覆盖已知基因。将检测的结果用Affymetrix配套的芯片平台软件进行分析，得到的数据与国际公共数据库中的指标对比，对CNVs性质进行判断。所有操作保证在无菌状态下进行，本研究中CNVs阈值为300kb，同时对新生儿进行3～6个月随访。

2 结果

2.1核型分析：89例检测结果中有6例胎儿的染色体显示异常，检出率为6.74%（6/89）。见表1。

2.2 CMA检测：83例核型检测正常的对象中，从心脏单发异常的胎儿中检测到1例致病性CNVs，为Xp22.33微重复（369.51kb），检出率为2.00%（1/50）;从心脏复杂异常的胎儿中检测出2例致病性CNVs，分别为Xp22.33微缺失（355.87kb）和22q11.21微缺失（3.17Mb），检出率为6.06%（2/33）。

2.3 随访结果：单发异常的54例胎儿中共有39例生产，15例引产（3例核型异常、1例致病性CNVs、11例孕妇要求）;复杂异常的35例胎儿均实施引产;进行3～6个月随访未发现新生儿有其他异常。

3 讨论

G显带技术可以对400至550条染色体带进行核型分析，对于10Mb以上的染色体异常可以准确的检测，但是对于异常不明显的染色体往往无法精确检测。而CMA的检测速度、基因覆盖面以及分辨率都明显高于传统核型分析技术，因此可以作为进一步判断染色体是否异常的重要依据，可提高核型正常的CHD胎儿检出率，为进行准确的产前风险评估提供数据参考。

综上所述，染色体核型分析无法实现对全基因组的快速检测，对于亚显微的异常染色体以及未知染色体的检测效果不理想。CMA技术对于核型正常染色体的微缺失或者微重复等异常的检测更为精确，可及时发现产前CHD，对于降低孕期风险保障分娩安全有重要价值。

参考文献

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[2] 王雷雷， 杨舒婷， 王志伟， et al. 染色体微阵列分析技术在高齡孕妇产前诊断中的应用研究[C]// 第十一届全国遗传病诊断与产前诊断学术交流会暨第二届海峡两岸医药卫生交流协会遗传与生殖专业委员会年会. 0.

[3] 王淑娴， 马京梅. 染色体微阵列分析技术的适宜产前诊断应用策略[J]. 中华围产医学杂志， 2019， 22（1）：26-29.