顶空气相色谱法测定醋酸阿比特龙中8种溶残留溶剂

于宗琴，李子静，唐敏芳，赵海鹏

(1山东医学高等专科学校，山东 临沂 276000；2潍坊市检验检测中心，山东 潍坊 261000)

醋酸阿比特龙是一种口服CYPl7-A1抑制剂，可与泼尼松联合使用治疗转移性去势抵抗性前列腺癌(CRPC)[1]。其合成路线有多种，大多以去氢表雄酮为起始原料，经缩合、取代、偶联、酯化等五步反应制得，使用的有机溶剂有乙醇、乙醚、乙酸乙酯、四氢呋喃、正己烷、甲醇、二氯甲烷、叔丁基甲基醚等八种[2-5]。这些溶剂大多属于二类或三类残留溶剂，对人体有一定的危害。为了控制这些残留溶剂的量，本文采用气相色谱法对其进行检测，现报道如下。

1 材料

1.1仪器 Agilent 6890型气相色谱仪(安捷伦科技有限公司)，氢火焰离子化(FID)检测器及色谱工作站，Agilent G1888自动顶空进样器；XS205型十万分之一电子分析天平(瑞士Mettler-Toledo公司)。

1.2试药 醋酸阿比特龙(批号分别为190501、190502、190503，由本校药物化学教研室提供，含量均大于99.0%)；甲醇(批号：65310081612，纯度≥99.9% GC)、乙醇(批号：K50447027832，纯度≥99.5% AR)、乙醚(批号：20181121，纯度≥99.7% AR)、二氯甲烷(批号：1901051，纯度≥99.5% AR)、叔丁基甲基醚(批号：1749345435，纯度≥99.8% GC)、正己烷(批号：SZBD3390V，纯度≥99.5% GC)、乙酸乙酯(批号：171016391F，纯度≥99.5% AR)、四氢呋喃(批号：I0970101839，纯度≥99.5% GC)。

2 方法与结果

2.1色谱条件 色谱柱型号DB-624，固定相为6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷，程序升温：起始温度为40℃，维持10 min，以25℃/min的速率升温至200℃，维持8 min；进样口温度200℃；检测器为FID，温度250℃；载气为高纯氮气，柱流速为2.5 ml/min；分流比为20:1；顶空瓶平衡温度为70℃，平衡时间为30 min。

2.2溶液的制备

2.2.1对照品溶液 精密称取甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、叔丁基甲基醚、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃适量，用空白溶剂(80% N,N-二甲基甲酰胺水溶液，以下相同)稀释制成每1 ml中约含甲醇1.5 mg、乙醇2.5 mg、乙醚2.5 mg、二氯甲烷0.3 mg、叔丁基甲基醚2.5 mg、正己烷0.145 mg、乙酸乙酯2.5 mg、四氢呋喃0.36 mg的混合溶液作为对照品储备液。精密量取对照品储备液1 ml，置10 ml量瓶中，用空白溶剂稀释至刻度，摇匀即得对照品溶液。

2.2.2供试品溶液 取醋酸阿比特龙约适量，精密称定，加入空白溶剂制成浓度为50 mg/ml的溶液，作为供试品溶液。

2.3系统适用性试验 分别精密量取2 ml对照品溶液、供试品溶液、空白溶剂置于顶空瓶中，按“2.1”项下的色谱条件进样检测，记录色谱图。结果显示，各待测残留溶剂之间的分离度均大于1.5，实现了基线分离，理论板数按照甲醇计算为21591，完全符合要求。

A

B图1 对照品 (A)与供试品(B)溶液色谱图A图：从左向右依次是甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、叔丁基甲基醚、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃

2.4线性关系考察 分别准确量取对照品储备液20、15、10、5、3、2 ml至100 ml容量瓶中，用空白溶剂稀释至刻度，制成一系列浓度的对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件，进样检测，记录色谱图，测定峰面积，以对照品浓度(C，μg/ml)为横坐标、峰面积(A)为纵坐标绘制标准曲线，计算得回归方程。结果见表1。

表1 8种残留溶剂的线性关系和定量限(μg/ml)

2.5精密度试验 精密量取“2.2.1”项下对照品溶液2 ml，重复顶空进样10次，按“2.1”项下色谱条件测定峰面积。结果甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、叔丁基甲基醚、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃峰面积的RSD分别为0.98%、1.03%、0.87%、1.04%、1.11%、0.95%、0.99%、1.18%，表明仪器精密度良好。

2.6稳定性试验 精密量取“2.2.1”项下对照品溶液适量，分别于室温下放置0、1、2、4、6 h，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、叔丁基甲基醚、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃峰面积的RSD分别为1.25%、1.44%、1.05%、1.72%、1.28%、1.36%、1.22%、1.24%(n=6)，表明供试品溶液在室温下放置6 h内稳定性良好。

2.7检测限和定量限 吸取“2.2.1”项下对照品溶液，用空白溶剂逐级稀释，按“2.1”项下的色谱条件，按基线噪音峰的3倍计算检测限，10倍计算定量限，结果见表1。

2.8回收率试验 采用加样回收方法测定。分别精密称取9份阿比特龙样品(批号：190501)，每份约0.1 g，置10 ml顶空瓶中，各加入相当于“2.2.1”项下对照品溶液质量浓度80%、100%、120%的溶液各2 ml(每个质量浓度3份)，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率，结果见表2。

(续表)

2.9样品测定 精密称取3批醋酸阿比特龙样品0.1 g(批号：190501、190502、190503)，置10 ml顶空瓶中，精密加入空白溶剂2.0 ml，混匀，密封，按上述条件顶空进样，记录色谱图和峰面积，以外标法计算3批样品的残留溶剂量。结果见表3。

3 讨论

醋酸阿比特龙在有机溶剂如二氯甲烷、四氢呋喃中溶解性很好，几乎不溶于水，本方法选用80% N,N-二甲基甲酰胺的水溶液作为空白溶剂，可以很好地溶解样品，同时不干扰样品中残留溶剂的检测。本方法采用顶空进样法，对微量的残留溶剂也能很好的检测，样品分析时间约20 min，分离度、精密度、准确度均能满足要求，可作为控制醋酸阿比特龙原料药残留溶剂的方法。