气质联用法测定鲜蛋中氟虫腈及其代谢物

2019-12-09吉伟佳易路遥虞雪军杨婷婷江西省药品检验检测研究院江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心

食品安全导刊 2019年27期

□ 吉伟佳易路遥虞雪军章红熊雯杨婷婷晏亮江西省药品检验检测研究院江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心

氟虫腈是广谱杀虫剂，英文通用名为FIPRONIL，商品名为锐劲特，是一种苯基吡唑类杀虫剂[1]，用于防治跳蚤、虱子、蟑螂、螨虫等昆虫，被世界卫生组织列为对人类有中度毒性的化学品，大剂量食用可导致肝功能、甲状腺、肾脏损伤，欧盟法律规定氟虫腈不得用于人类食品产业链中的畜禽。2017年7月，荷兰被爆出“毒鸡蛋”事件，事件影响到欧洲多国，中国台湾也受到波及。虽然我国大陆市场没有欧洲毒鸡蛋流入，但氟虫腈的使用和检测也已经引起了关注。

禽类养殖过程中一般不使用氟虫腈，但在饲料的原料玉米、麦麸等储存过程中，存在使用氟虫腈杀虫的可能性。氟虫腈稳定性较差，在动物、植物、环境中代谢生成毒性与氟虫腈相当，甚至更高的砜化物或亚砜化合物，对环境极其不友好。研究表明作为代谢物之一的氟虫腈砜的毒性比氟虫腈高6倍以上，氟甲腈的毒性则是氟虫腈原药的9倍[2]，因此从安全角度考虑，同时分析氟虫腈及其代谢物的药物残留更有意义。

目前，我国对于氟虫腈的检测主要在水果、蔬菜等领域，例如，现行有效的国家标准和行业标准SN/T 1982—2007[3]主要针对水果、蔬菜、茶叶等样品，鸡肉样品也只检测了氟虫腈原药，缺少对氟虫腈代谢物的检测；GB 23200.115-2018[4]中规定了鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量的液相色谱-质谱联用测定方法，却未见气质联用技术检测鲜蛋中氟虫腈及其代谢物的方法；GB 2763.1-2018[5]已经对鲜蛋中氟虫腈最大药物残留量做出规定。作为补充方法，建立鸡蛋等动物源性食品中氟虫腈及其代谢产物残留的气相色谱串联质谱仪检测方法，可以完善检测体系，能更好的了解氟虫腈及其代谢产物在鸡蛋中的污染状况，评估氟虫腈及其代谢产物经鸡蛋摄入风险的先决条件。

近年来，气质联用技术不断发展提高，尤其在多组分兽药、农药分析方面的分离和取证方面优势明显。本文采用气相色谱与质谱联用技术对鸡蛋中可能残留的氟虫腈及其代谢物进行色谱分离和定性定量分析，通过考察不同前处理方式、回收率、精密度等指标，选择了高效快速的QUECHERS提取净化法，建立了鲜蛋中氟虫腈及其代谢产物残留量测定的气相色谱串联质谱法（GC-MS法），该方法前处理便捷高效，在10～500 ng/mL范围内线性良好，精密度较好，检测限能满足国家标准，经验证适用于鲜蛋中氟虫腈及其代谢产物残留的检测。

1 材料与方法

1.1 仪器及试剂

WondaPak QuEChERS提取包(含氯化钠等)、WondaPak QuEChERS SPE净化管（含PSA、C18等）；7890A/5975气相色谱质谱联用仪（美国 Aglient）；XS205DU型电子天平（梅特勒托利多）；VXR BS25振荡器（德国IKA）；乙腈（色谱级，美国sigma），氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈亚砜以及氟虫腈砜标准品（国家标准物质中心）；蛋类样品（市售鸡蛋，3 000 g）。

1.2 色谱条件

色谱柱：采用DB-5MS，规格为30 m×0.25 mm×0.25 μm，安捷伦（Agilent）；柱温：70 ℃保持2 min，以20 ℃/min升温至230 ℃，保持5 min，继续升温至270 ℃，保持2 min。柱流速为1.0 mL/min；进样口温度：250 ℃；进样方式：不分流进样，进样体积：1 μL。

1.3 质谱条件

电离方式：电子轰击源（EI），70 ev；离子源温度：230 ℃；离子源电压：1.20 kV；GC/MC传输线温度：280 ℃；溶剂延迟：4 min；测定方式：选择离子监测（SIM），监测离子详见表1。

表1 各目标化合物选择监测离子表

1.4 样品制备

称取5.00 g经均浆后的样品，加入5 mL的1%甲酸乙腈，振荡30 s后，加入一份WondaPak QuEChERS提取包（含氯化钠等)，涡旋30 s，于8 000 r/min的条件下离心10 min，吸取1 mL上清液，待净化。将1 mL上清液转移至WondaPak QuEChERS SPE净化管（含PSA、C18等）中，涡旋30 s，于10 800 r/min下离心2 min，取上清液，过0.22 μm有机滤膜，供气相色谱－质谱测定。

2 结果与讨论

2.1 前处理方法的选择

由于鸡蛋中脂肪、蛋白质含量较高，基质复杂，对目标物质干扰大，所以前处理中净化方法的选择对实验结果影响很大。本实验对比了两种提取净化方法对回收率的影响，分别为WondaPak QuEChERS提取法和HLB固相萃取柱净化法。其中HLB固相萃取柱净化法提取样品进入气相色谱串联质谱仪测定，测得4种目标物质的回收率仅有50%，低于WondaPak QuEChERS提取法提取的样品（回收率80%以上），且WondaPak QuEChERS提取法操作更简便快捷，提高实验效率，比较结果之后本实验选择了WondaPak QuEChERS提取法作为前处理方法。

2.2 线性实验和检测限

标准储备液的配制：用乙腈将氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈亚砜和氟虫腈砜4种标准品配制成浓度约为100 μg/mL的标准储备液。分别准确吸取上述氟虫腈、氟虫腈亚砜、氟虫腈砜和氟甲腈4种标准储备液各2.5 mL，置于100 mL棕色量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，即得混合标准溶液。样品于-20 ℃保存，保存期1个月（浓度约2 500 ng/mL）。

基质混合标准系列工作溶液的制备：称取6份阴性样品5.00 g于50 mL离心管中，分别精密加入混合标准使用液，配制成系列浓度为10、25、50 、100、200、300 ng/mL以及500 ng/mL基质混合标准系列工作溶液。在1.2和1.3的色谱质谱条件下以峰面积对浓度作线性回归分析，制成的标准曲线方程如表2所示。采用SIM测定方式得到氟虫腈及其代谢物的总离子流图（TIC）如图1所示。

本方法中以3倍信噪比计算氟虫腈及其代谢物氟甲腈、氟虫腈亚砜、氟虫腈砜的检测限，如表2所示。该方法线性良好，方法简便、准确可靠，灵敏度高，可以满足分析工作要求。