西洋参不同部位丙二酰基人参皂苷含量差异研究
2019-09-21逄世峰王博王佳郑厚胜白玉洁郑培和张浩许世泉王英平
逄世峰,王博,王佳,郑厚胜,白玉洁,郑培和,张浩,许世泉,王英平
(中国农业科学院特产研究所,长春 130112)
西洋参(Panax quinquefolium L.)系五加科多年生草本植物[1],具有改善神经系统、改善血液循环、调节免疫功能、抗氧化等药理活性作用[2-3]。人参皂苷为西洋参主要化学成分,各部位含量和组成不尽相同[4-5],通常采用液相色谱法测定人参皂苷含量来评价西洋参品质的优劣[6-7],但往往忽略具有独特药理活性的丙二酰基人参皂苷。由于丙二酰基人参皂苷的不稳定性和标准品的缺乏,目前对其准确定量仍然有难度[8]。本研究通过氨水水解,脱去丙二酰基人参皂苷的丙二酰基,将丙二酰基人参皂苷转化为相应的人参皂苷,测定水解后样品中人参皂苷含量,并与样品中原有人参皂苷含量相减,再根据丙二酰基人参皂苷与相应中性皂苷分子量进行换算,即得到丙二酰基人参皂苷含量,为西洋参中丙二酰基人参皂苷含量测定提供了一种新方法。
1 仪器、试药及材料
超高效液相色谱仪Acquity(Waters 公司);Milli-Q Advantage A10 型超纯水器(美国密理博公司);人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Ro、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd(中国药品生物制品检定所);乙腈(色谱纯,美国赛默飞世尔公司);磷酸为优级纯,其他试剂均为分析纯。
本试验所用西洋参均采自吉林省抚松县中国农业科学院特产研究所实验基地。将取得的样品芦头、主根、须根分离,放入40 ℃烘箱烘干至恒重,粉碎,过60目筛,备用。
2 方法与结果
2.1 常规方法
按照已建立方法测定[9]。
2.2 氨水水解方法
按照已建立方法测定[10]。
2.3 丙二酰基人参皂苷含量换算
以样品中丙二酰基人参皂苷仅链接一个丙二酰基计算,公式如下:
C1=丙二酰基人参皂苷含量;C2:相应中性人参皂苷含量;M1:丙二酰基人参皂苷分子量;M2:相应中性人参皂苷分子量。
表1 人参皂苷分子量Tab.1 Molecular weight of ginsenosides
2.4 统计学分析
2.5 样品测定
按照“2.1”、“2.2”项下测定方法操作,“2.3”项下转换方法计算丙二酰基人参皂苷含量,结果见表2、表3、表4,色谱图见图1。
表2 西洋参根、须、芦供试品水解前8 种人参皂苷含量Tab.2 The content of eight ginsenosides in taproot,lateral root and rhizome of American ginseng before hydrolysis
图1 未水解样品(A)、水解样品(B)、标准品(C)超高效液相色谱图Fig.1 UPLC chromatograms of unhydrolyzed sample、hydrolyzed sample and reference substances
表3 西洋参根、须、芦供试品水解后8 种人参皂苷含量Tab.3 The content of eight ginsenosides in taproot,lateral root and rhizome of American ginseng after hydrolysis (mg/g)
表4 西洋参根、须、芦中主要丙二酰基人参皂苷含量Tab.4 The content of main malonyl-ginsenosides in taproot,lateral root and rhizome of american ginseng (mg/g)
由表2、表3、表4可知,西洋参中主要含有二醇型丙二酰基人参皂苷,分别为 M-Rb1、M-Rc、M-Rb3、MRd;西洋参主根中丙二酰基人参皂苷占总皂苷比例高于芦头和须根,含量分别为51.09%、42.18%、36.87%;芦中Ro、M-Rb3、M-Rd 含量均显著高于主根和须根;根中Rg1、Re、Rb3、M-Rd均显著低于须根和芦头;须中Rc、M-Rc 显著高于主根和芦头。
3 讨论
本试验对西洋参中主要人参皂苷进行了对比研究,建立了西洋参中丙二酰基人参皂苷测定新方法,该方法具有操作简单、速度快、稳定性好等优点,可作为检测丙二酰基人参皂苷含量的首选方法。
通过比较西洋参地下部位主要人参皂苷含量差异发现,西洋参须根中Rc、M-Rc 含量显著高于其他部位,与逄世峰等[9]的研究结果一致。因此,人参皂苷Rc、M-Rc 含量可用于西洋参须根与主根和芦头的鉴别。
综上所述,西洋参在皂苷含量和组成上均有较大差异,可根据实际需求合理利用西洋参资源,为西洋参合理开发利用提供理论依据。