化瘀祛浊复方对糖尿病大鼠大血管病变炎性因子的影响

王飞+李敬林

[摘要] 目的 观察化瘀祛浊复方对糖尿病大鼠大血管病变炎性因子的影响。 方法 应用链尿佐菌素复制糖尿病大鼠大血管病的病理模型，大鼠的血糖值>11.2 mmol/L为造模成功列入观察对象，然后共分为6组，实验期间，每组予以不同的饲养。实验期间大鼠尾尖采血，实验8周后腹主动脉采血，待放射免疫法检测血清中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-a，TNF-a），且观察其变化。结果 模型组大鼠与正常组比较TNF-a明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）；AS组、治疗组比较TNF-a升高其次（P<0.05），阳性药组与预防组差异无统计学意义。应用化瘀祛浊中药复方影响炎症水平。结论 应用化瘀祛浊复方可以抑制肿瘤坏死因子的表达，使糖尿病大血管病的炎性因子处于炎症状态，从而能够延缓糖尿病合并症的进展。

[关键词] 化瘀祛浊；糖尿病大血管病；大鼠；肿瘤坏死因子

[中图分类号] R587.2 [文献标识码] A [文章编号] 1672-4062（2016）12（b）-0005-02

[Abstract] Objective To observe the effect of the compound prescription of removing blood stasis and removing turbid on the inflammatory factors of the large blood vessel pathological changes in diabetic rats. Methods The pathological model by streptozotocin to copy large vessel disease in diabetic rats， rats blood glucose greater than 11.2 mmol/L for the successful modeling included in the observation objects， and were divided into 6 groups， each group during the experiment， give the different feeding. During the experiment， blood samples were collected at the end of the experiment， blood samples were collected from abdominal aorta 8 weeks later， and necrosis factor-A tumor（TNF-a） was detected by radioimmunoassay， and the changes were observed. Results Compared with the normal group， the TNF-a in model group was significantly increased， and the difference was significant（P<0.01）； AS group， treatment group compared to TNF-a increased second（P< 0.05）， positive drug group and prevention group were not significantly different. Effect of TCM compound prescription of removing blood stasis and removing turbid to influence the level of inflammation. Conclusion The application of removing blood stasis and removing turbid compound can inhibit the expression of tumor necrosis factor， so that the inflammatory factor of diabetic vascular disease in the inflammatory state， so as to delay the progress of diabetic complications.

[Key words] Removing stasis and removing turbidity； Diabetic vascular disease； Rat； Tumor necrosis factor

糖尿病（diabetes mellitus，DM）是一種常见的内分泌代谢疾病，是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合征。由于胰岛素分泌绝对或相对不足，以及靶组织细胞和胰岛素敏感性降低，引起糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱，而以高血糖为主要共同标志的疾病。相当于中医学的“消渴病”。 糖尿病大血管病变是DM常见的并发症之一，指中等以上动脉的粥样硬化，主要有高血压、冠心病、脑血管病变和下肢血管病变，是糖尿病致残和致死的主要原因，约占糖尿病患者死亡原因的60%～70%[1]。DM的炎症发病学说认为：糖尿病是一种自然免疫和低度炎症性疾病[2]。炎症因子引起的血管炎症反应在糖尿病尤其是大血管病变的发生发展中有重要作用[3]。炎性因子是一组化学结构和生物学各异的物质，TNF-a由单核细胞、巨噬细胞、激活的淋巴细胞、血管内皮细胞等多种细胞，它具有参与介导炎症、免疫调节等作用[4-5]。TNF-a参与炎性反应和免疫应答，影响糖脂肪代谢，通过对胰岛素β细胞造成损伤后经多种途径影响着DM的发生。该实验研究以化瘀祛浊中药复方预防糖尿病大鼠大血管病，并观察血清中TNF-a在病程进展中的变化。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康雄性Wistar大鼠清洁级75只，体重大约160～200 g。购于辽宁省本溪市动物基地。

1.2 饲养环境与饲料

饲养于辽宁中医药大学动物实验中心，通过高糖、高脂、胆固醇等膳食方法饲养1个月，实验期间自由饮水。

1.3 实验用药品

化瘀祛浊中药复方由黄芪、党参、川芎、白芍、山萸肉、生地、水蛭、泽泻、半夏、山栀中药颗粒剂开水配制，购于沈阳市中医院药房。福辛普利10 mg/片，药物溶于生理盐水中，购于沈阳市中医院。根据人体剂量与大鼠的等效计量6.3倍计算。链尿佐菌素，Sigma：S0130，SIZE：1 g，购于辽宁中医药大学动物实验室。

1.4 DM大鼠大血管病模型的复制

健康雄性Wistar鼠清洁级75只，适应性喂养两周，实验开始。随意选取10只作为正常组，予普通饲料；选取15只作为预防组，予高脂高糖饲料，同时予中药灌胃；选取10只作为AS组，予高脂饲料；其余40只喂高脂高糖饲料，1个月后造模。STZ腹腔一次性注射45 mg/kg。72 h后尾尖采血，血糖值>11.2 mmol/L列为观察对象。其中血糖未达标8只，死亡8只，造模成功率为78.86%。

1.5 分组及给药方法

根据血糖值随机分为6组，分别为正常组、预防组、AS组、模型组、阳性药组、治疗组。预防组予高脂高糖饲料饲养的同时给予中药；治疗组在成模成功后给予中药灌胃；阳性药组给予福辛普利日1次灌胃，其余3组予等计量的生理盐水1次/d。以上6组均未使用其他降糖药。

1.6 标本采集

大鼠尾尖采血，美国强生血糖仪测血糖。大鼠经腹主动脉采集血清标本，应用放射免疫法测定血清TNF-a的含量。

1.7 统计方法

采用SPSS 15.0统计学软件对生化和放免等实验数据进行方差分析和Pearson相关分析，组间两两比较采取q检验，以均值±标准差（x±s）表示，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

模型组大鼠与正常组相比较TNF-a均有明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）；而阳性药、预防组差异无统计学意义。模型组、AS组体内存在慢性炎性因子；模型组与AS组相比较，高血糖可以增加炎症因子的表达；阳性药、预防组有明显的抗炎性因子的作用，降低TNF-a含量使之接近正常组，见表1。

3 讨论

实验证实，化瘀祛浊中药复方的干预下，DM大鼠处于炎症状态时，TNF-a炎性因子的改变促进糖尿病合并症的发生与发展。由此可以说明，应用化瘀祛浊中药复方可以抑制炎性因子的表达，延缓DM的合并症的发生提供了有力的试验理论与数据[6]。

综上所述，化瘀祛浊中药复方在降低血糖、控制糖尿病症状及其大血管病方面具有很大的優势与潜力。尤其是在DM的病程进展中，血清TNF-a的变化明显呈逐渐上升与对照组相比，但中药复方干预后均明显有下降趋势，所以结果显示肿瘤坏死因子的升高水平与DM之间是呈正相关的关系，化瘀祛浊中药复方对于降糖作用的同时还可以提高免疫、抑制炎性因子TNF-a的表达。而TNF-a是引起胰岛素抵抗的主要致病因子[6]参与AS的形成。通过抑制炎性因子的表达减轻胰岛素抵抗，同时也抑制了血管的炎性增生。近年来，炎性反应在DM及其并发症中所起的作用越来越受到关注，同时血糖升高也是在增加炎性因子的表达，因此阻断TNF-a等炎性因子的表达，也是对DM及其合并症的一种防治。所以抑制血清中的炎性因子，是防治糖尿病大血管病的重要途径。最后，中医药防治糖尿病大血管病变具有一定的优势，但化瘀祛浊重要复方对糖尿病大鼠大血管合并症具体的作用机制还需进一步研究探讨。

[参考文献]

[1] 中华医学会糖尿病分会糖尿病慢性并发症调查组.全国住院糖尿病患者慢性并发症及其相关危险因10年回顾性调查分析[J].中国糖尿病杂志，2003，11（4）：232-238.

[2] 李秀钧，邬云红.糖尿病是一种炎症性疾病[J].中华内分泌代谢杂志，2003，19（4）：251.

[3] Famier M.Pravastatin and fenofibrate in combination（Pravafenix）for the treatment of high-riskpatients with mixed hypedipidemia[J].Expert Rev Cardiovase Ther，2012，10（5）：565-575.

[4] Aggarwal BB，Natarajan K.Tumor necrosis factors： developm ents during the Last decade[J].Eur CytoKine Net，1996，7（2）：93-124.

[5] Ruan H，Lodis HF. Insulin resistance in adipose tissue：direct and indirect effects of tumor necrosis factor-alpha[J].Cytokine Growth Factor Rev，2003，14（5）：447-455.

[6] 周迎生.肿瘤坏死因子-a在胰岛素抵抗中的作用[J].国外医学内科学分册，2000 27（3）：115-118.

（收稿日期：2016-09-16）