栝楼组织培养研究进展

2017-02-01陈燕文季冬青吕姝静张强

保健文汇 2017年3期

关键词：栝楼腋芽茎段

●陈燕文季冬青吕姝静张强

栝楼组织培养研究进展

●陈燕文季冬青吕姝静张强

栝楼是我国传统中药材，为了进一步促进栝楼的研究和利用，本文对栝楼组织培养技术进行综述，以期为栝楼的综合利用提供参考。

栝楼；组织培养；研究进展

栝楼（Trichosanthes kirilowii Maxim）属葫芦科栝楼属，为多年生攀援植物，主要分布在安徽、河南、山东等地[1]，具有解热止渴、利尿、镇咳祛痰等作用。种子含脂肪油，营养丰富，入药能化痰散结，滑肠通便[2]；果实含三萜皂苷、有机酸、糖类；根富含蛋白质天，花粉蛋白是主要有效成分，对早中期妊娠引产有效率高，并对葡萄胎、死胎及宫外孕有独特疗效[3]。现代研究表明栝楼具有调节免疫功能的活性，能够抑制病毒的增殖和肿瘤的生长[4]。栝楼经济价值很高，药用栝楼多为野生采集，而野生资源破坏严重，已经无法满足市场的需要，因此，栝楼的人工栽培势在必行[5]。为促进栝楼栽培生产发展及综合开发利用的深入，本文对其组织培养研究进展情况概述如下：

1 栝楼的组织培养

栝楼是雌雄异株植物，生产上有种子和分根两种繁殖方式。用种子繁殖，幼苗雌雄难辨，从而影响籽用栝楼生产。据统计，用种子繁殖的雌株仅为10%～30%[6]。分根繁殖虽可解决种苗问题，但繁殖周期长、效益差，也不能满足生产需要。因此，需要建立快速繁殖技术体系。

组织培养快速繁殖具有材料来源广泛、不受生产季节限制、繁殖快速等优点。集约化培养，一年可繁殖8～10代，不受季节和环境的限制，试管苗适于工厂化生产，规模较大，成本低[7]。栝楼的组织培养始于20世纪90年代，前人以带腋芽茎段为外植体，MS 为基本培养基添加外源激素实现植株的再生。

1.1 栝楼茎段快速繁殖

郭晓亮等[8]以栝楼茎为材料作为外植体诱导愈伤组织时，发现所用栝楼外植体的性别不同，对培养基的要求也不同。廖华俊等[9]应用茎尖组织培养结果显示，不同激素浓度对芽丛形成、分化及根形成有影响，茎尖组培的最佳诱导、增殖和生根培养基分别是MS＋6-BA 1.5mg/L＋IBA 0.3mg/L＋NAA0.05mg/L、MS＋ 6-BA 1.0mg/L＋IBA 0.3mg/L＋NAA0.05 mg/L和l/2MS＋IBA0.5mg/L。用栝楼组培苗抽出的匍匐茎进行非试管快繁育苗，种苗质优，其中以9～10月份繁出的种苗在当年假植中形成的地下块茎最大，坐果率、产量最高。钱骅等[10]得出，适宜栝楼微茎尖丛生芽诱导的培养基为：MS+1mg/L6-BA+0.3mg/LNAA；栝楼组培苗诱导生根以MS+0.1mg/LIBA最好，其次是 MS+0.1 mg/L NAA。暗培养对栝楼根长度和侧根生长有促进作用。

1.2 栝楼腋芽快速繁殖

尹艺林等[11]通过将腋芽接种于MS+3%蔗糖+0.8%琼脂(pH5.8)，添加不同浓度激素组合的培养基上，25℃持续光照培养，诱导芽生长成无根苗。将长出的无根苗切下，接种在MS+3%蔗糖+0.8%琼脂(pH5.8)，添加不同浓度NAA的培养基上，诱导生根。结果表明：将腋芽接种到不同激素的MS配养基上生长20d后，发现在添加0.1 mg／LNAA、0.3 mg／L6-BA、0.5 mg／L6-BA、0.8 mg／L6-BA的培养基上均可以诱导出芽。佟宏霞等[12]通过对文献方法的改进，建立了由栝楼腋芽→丛生芽→无根试管苗→再生根→再生完整植株→试管苗移栽成活的一整套栝楼试管苗快速繁殖体系。该繁育体系建立不仅可以保护栝楼物种免遭自然界细菌和病毒的侵染，还可以在短时间内大量繁殖栝楼试管苗，可为栝楼种植业生产提供优质种苗。

1.3 栝楼叶片快速繁殖

杨晓伶等[13]用茎尖、带芽茎段、茎段和叶片诱导丛生芽及愈伤组织，发现2 年生块茎幼苗茎尖和带芽茎段在MS＋BA 2 mg/L＋NAA 0.5～0.05 mg/L培养基上可诱导丛生芽，并在生根培养基MS＋NAA 0.1 mg/L＋IBA 0.2 mg/L中生根，经驯化移栽可实现快速繁殖。无芽茎段和叶片用含BA4 mg/L和NAA0.5 mg/L的MS 培养基可诱导愈伤组织，由茎段来的愈伤组织经6周后分化为无根苗。

2 讨论

以栝楼植株子叶、卷须、茎段、根段、根尖等作为外植体，以MS作为基本培养基，通过添加不同激素诱导不定芽、不定根的发生，均可培养出完整植株，实现快速繁殖的目的[14]。但组织培养技术只是初步的研究，技术还不成熟，不能进行大规模的推广应用。栝楼具有食品、药品多种价值，由于人们生活水平的不断提高，对栝楼的需求量也不断增加。本文通过对栝楼组织培养技术的总结，以期为将来的研究提供依据。

（作者单位：山东中医药大学药学院）

[1]张洁,周立人,李德庆.栝楼遗传育种及种质鉴定的研究进展[J].安徽农业科学,2006,34(23):6223-6224.

[2]黄美兰,贝伟剑.大子栝楼和栝楼的药理作用比较[J].广东药学,2000,10(1):47-49.

[3]宋振巧,王洪刚,王建华.栝楼的研究进展[J].山东农业科学2005,17(5):72-74.

[4]吴红军,吴国娟,沈红等.栝楼根提取物抗肿瘤作用初探[J].动物医学进展,2006,27(6):99-102.

[5]兰伟,蔡健,朱茂英,等.栝楼的组织培养与快速繁殖[J].植物资源与环境学报,2006,15(4):73-74.

[6]张龙霏,李佳,郝志等.栝楼组织培养研究进展[J].山东中医药大学报,2010,34(1):63-82.

[7]余慧琳,胡月华,李君.栝楼离体快繁的初步研究[J].湖北农业科学,2009,48(2):166-192.

[8]郭晓亮,王沫,舒少华.雌雄栝楼的组织培养研究[J].武汉植物学研究,2009,27(6):684-687.

[9]廖华俊,董玲,江芹,等.栝楼组织培养及非试管苗快速繁技术研究[J].中国瓜菜,2006,22(3):4-7.

[10]钱骅,赵伯涛,黄晓德,等.栝楼组织培养研究[J].中国农学通报,2014,30(28):159-163

[11]尹艺林,吴永超.栝楼的组织培养研究[J].皖西学院学报,2005,21(2):92-122.