5α还原酶抑制剂对前列腺增生组织内雌激素受体、雄激素受体表达的影响

卢湧湧　黄　航　李　鹏　武志刚　吴秀玲

1.温州医科大学附属第一医院泌尿外科，浙江温州325000；2.温州医科大学附属第一医院病理科，浙江温州325000

5α还原酶抑制剂对前列腺增生组织内雌激素受体、雄激素受体表达的影响

卢湧湧1黄航1李鹏2武志刚1吴秀玲2

1.温州医科大学附属第一医院泌尿外科，浙江温州325000；2.温州医科大学附属第一医院病理科，浙江温州325000

目的研究5α还原酶抑制剂（5α-RI）对良性前列腺增生（BPH）患者前列腺组织内雄激素受体（AR）、雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）表达的影响。方法选择100例BPH患者随机分为4组，每组25例，对照组口服维生素C 0.1 g，1次/d，非那雄胺组口服非那雄胺5 mg，1次/d，度他雄胺组口服度他雄胺治疗0.5 mg，1次/d，依立雄胺组口服依立雄胺5 mg，2次/d，治疗8周后行经尿道前列腺电切术，采用免疫组化方法观察术后前列腺组织内AR、ERα、ERβ的表达情况。结果采用IHS法对免疫组化结果进行半定量分析，其中AR表达方面，对照组（10.36±1.63）、非那雄胺组（9.08±1.71）、度他雄胺组（9.12±2.42）、依立雄胺组（7.92±2.36）之间差异有统计学意义（P＜0.05），且依立雄胺组下降更为显著。ERα表达各组间变化不明显。与对照组ERβ表达（5.24±1.20）比较，度他雄胺组（6.52±1.57）、依立雄胺组（6.76±1.55）表达显著增强，非那雄胺组（5.60±1.04）表达有所增强，但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论5α-RI可抑制BPH患者前列腺组织内的AR表达，增强ERβ表达，对ERα表达影响不大，不同5α-RI对AR、ERα、ERβ表达的影响程度有差异。

5α还原酶抑制剂；雌激素受体；雄激素受体；前列腺增生

［Abstract］Objective To explore the effects of 5α reductor inhibitors（5α-RI）on the expression of androgen receptor，estrogen receptor α（ERα）and estrogen receptor β（ERβ）in the prostatic tissues in the patients with benign prostatic hyperplasia（BPH）.Methods A total of 100 patients with BPH were randomly assigned to four groups，with 25 patients in each group.The control group was orally given vitamin C of 0.1 g，once a day.Finasteride group was orally given finasteride of 5 mg，once a day.Dutasteride group was orally given dutasteride of 0.5 mg，once a day.Epristeride group was orally given epristeride of 5 mg，twice a day.Prostate electrocision was performed via urethra 8 weeks after the treatment，and the expression of AR，ERα，and ERβ in the prostatic tissues was observed after the surgery via immunohistochemistry.Results IHS method was applied to conduct semi-quantitative analysis on the results of immunohistochemistry.There were significant differences of AR expression between the control group（10.36±1.63），finasteride group（9.08±1.71），dutasteride group（9.12±2.42）and epristeride group（7.92±2.36），and the reduction in epristeride group was more significant（P＜0.05）.There were not significant changes of ERα expression between each group.The expression of ERβ in dutasteride group（6.52±1.57）and epristeride group（6.76±1.55）was significantly enhanced compared with that in the control group（5.24±1.20），and the expression in finasteride group（5.60±1.04）was enhanced，but there were no statistically significant differences（P＞0.05）.Conclusion 5α-RI is able to inhibit AR expression and enhance ERβ expression in the prostatic tissues in the patients with BPH.It does not have great effects on the expression of ERα.Different 5α-RIs have different effects on the expression of AR，ERα and ERβ.

［Key words］5α Reductor inhibitors（5α-RI）；Estrogen receptor；Androgen receptor；Prostatic hyperplasia良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）是老年男性常见病，其发病机制尚不十分清楚，比较明确的两个必要条件是有功能的睾丸和年龄的增长。雄激素及其受体学说认为雄激素特别是二氢睾酮通过雄激素受体对前列腺的增生起关键作用，因此抑制睾酮向二氢睾酮转变的5α还原酶抑制剂（5α-reductase inhibitor，5α-RI）被临床应用治疗BPH。但该学说并不能完全解释BPH的发病机制，已有研究表明雌激素及其受体在BPH中亦扮演重要角色［1-6］。因此本文设计此项研究，旨在观察不同5α-RI对BPH组织内雄激素受体（androgen receptor，AR）、雌激素受体α（estrogen receptor α，ERα）、雌激素受体β（ERβ）表达的影响。

1　资料与方法

1.1一般资料

收集我院2012年1月～2013年6月间BPH患者100例，纳入标准：①55岁以上；②主诉排尿困难、尿细无力、尿流中断、夜尿频数等症状；③肛门指诊示前列腺增大，中央沟变浅或消失；④B超示前列腺增大，体积20 mL以上；⑤最大尿流率＜15 mL/s。排除标准：①确诊前列腺癌；②合并急性前列腺炎；③前列腺手术史；④长期使用影响前列腺功能的药物；⑤合并严重内科疾病；⑥合并其他可能影响试验结果的疾病或症状。将符合上述标准的患者随机分为四组。

所有患者治疗前通过自我评价或调查人员协助下评价完成国际前列腺症状评分（IPSS）及生活质量评分（QOL），B超测量前列腺体积（0.52×三径线之乘积），尿流率检查测定最大尿流率（Qmax）。四组患者在口服药物治疗前的各项指标，包括年龄、IPSS、QOL、Qmax、前列腺体积等一般资料差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1。

1.2给药方法

对照组口服维生素C（浙江瑞新药业，国药准字H33021139，0.1 g×100）0.1 g，1次/d；非那雄胺组：口服非那雄胺（默沙东制药，进口药品注册证号H2011 0485，5 mg×10片）5 mg/次，1次/d；度他雄胺组：口服度他雄胺（葛兰素史克，进口药品注册证号H20110205，0.5 mg×10片）0.5 mg/次，1次/d；依立雄胺组：口服依立雄胺（江苏联环药业，国药准字H20010669，5 mg× 10片）5 mg/次，2次/d。口服药物治疗8周结束后行经尿道前列腺电切术，收集前列腺组织标本制成蜡块。

1.3研究方法

所有标本收集完毕后切片，采用SP法行免疫组化染色。具体流程：甲醛固定标本后石蜡包埋，切片（4 μm/片），脱蜡水化，胃蛋白酶溶液（0.5%）消化，EDTA抗原液修复，加入一抗孵育过夜（4℃），加入二抗（50 μL，带有生物素标记）孵育20～30 min，加入卵白素（50 μL）孵育10 min，确定显色适时终止反应。显色后的切片由三位专业病理科医生独立检查，采取IHS法［7］对结果进行半定量分析：①染色强度，以多数细胞呈现的染色强弱计分（记为a）：无明显着色0分，淡黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分；②阳性细胞率，即某类细胞5个视野（每400×高倍视野计数100个此类细胞）的阳性细胞的平均数（记为b）：1%～10%计1分，＞10%～50%计2分，＞50%～75%计3分，＞75%计4分；③a×b乘积为IHS评分：0分为阴性（-），1～4分为弱阳性（+），5～8分为中阳性（++），9～12分为强阳性（+++）。每个标本观察3张切片，取平均值。

1.4统计学方法

采用SPSS22.0统计学软件分析数据，计量资料以（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，之后多重比较采用LSD法，P＜0.05为差异有统计学意义。

表1　四组治疗前各项基础情况比较（x±s）

2　结果

AR在前列腺间质及上皮细胞均有表达；与对照组比较，口服不同5α-RI的各组前列腺组织中AR表达均显著抑制，其中依立雄胺组更为显著。ERα表达率不高，主要表达于前列腺组织的间质，仅个别标本见上皮表达；与对照组相比，口服不同5α-RI的各组前列腺组织中ERα的表达受到抑制，但差异无统计学意义（P＞0.05）。ERβ主要表达于上皮，在间质中也有少量表达；与对照组比较，度他雄胺组、依立雄胺组ERβ表达显著增强（P＜0.05），非那雄胺组ERβ表达有所增强，但差异无统计学意义（P＞0.05）（表2）。

3　讨论

BPH是引起中老年男性排尿障碍的最常见原因，其发病机制尚不十分清楚，研究显示性激素水平失衡可能与其发病密切相关［8，9］，Suzuki等［10］发现男性40岁以后开始出现雌/雄激素比值增加象，两者的协同效应在BPH的发病中起关键作用，雌激素主要通过其受体发挥作用，目前发现ER有两种亚型：ERα和ERβ，研究表明两种ER具有不同的生物学作用［5，11，12］。5α-RI是目前唯一以缩小前列腺体积为治疗手段的前列腺治疗药物，其通过抑制睾酮向双氢睾酮转变，降低前列腺组织内双氢睾酮的浓度，进而达到缩小前列腺体积的目的。已有的研究多为5α-RI对前列腺组织中AR表达的影响，未曾研究其对ER表达的影响，本研究中我们观察了5α-RI对前列腺组织中ER表达的影响。

表2　四组AR、ERα、ERβ免疫组化表达评分比较（x±s，分）

在本研究中，对照组AR表达绝大部分呈强阳性，在应用不同的5α-RI后，AR表达受到抑制，与文献一致［13，14］，而应用依立雄胺后，AR受抑制更为明显，与非那雄胺组、度他雄胺组有显著差异，可能与依立雄胺的药理特点相关，依立雄胺是不可逆的非竞争性抑制剂，不直接与睾酮形成竞争，而是与底物-酶-NADP+形成优势复合物，抑制5α-还原酶释出，进而阻止睾酮向双氢睾酮转化，其对5α-还原酶的抑制强度理论上高于非那雄胺和度他雄胺，故其对AR表达抑制较高。

在本研究中，ERα主要表达于间质，仅个别标本见上皮表达，与文献一致［13，15，16］。在5α-RI治疗后，ERα的表达受到了一定的抑制，但不存在显著性差异，可能与应用5α-RI治疗的时间不足有关。ERβ主要表达于上皮，在间质中有少量表达，与文献一致［5，15，17，18］。口服度他雄胺或依立雄胺后ERβ表达显著增强，而口服非那雄胺后ERβ表达虽然有所增强，但差异无统计学意义（P＞0.05）。

口服5α-RI对前列腺组织内的两种ER表达产生了方向不一致的影响，对ERα的表达以抑制为主，对ERβ的表达以增强为主，且不同的5α-RI所产生的影响程度有所不同，可能与两种ER的生物学特点及不同5α-RI的药理特点相关。三种5α-RI的药理特性有细微的差别，依立雄胺直接阻断了5α-还原酶从复合物中释出，度他雄胺是Ⅰ型和Ⅱ型5α-还原酶的双重竞争性抑制剂，能最大程度抑制5α-还原酶，而非那雄胺仅是Ⅱ型5α-还原酶的竞争性抑制剂，因而这三种不同的5α-RI对5α-还原酶的抑制程度存在一定的差异，最终对ERα、ERβ的表达所产生的影响程度有所不同。

目前对于雌激素及其两个受体在BPH中的作用尚无一致的观点。Sciarra等［19］发现BPH标本中ER阳性表达率随着年龄的增加而增加。Tsurusaki等［15］发现ERα仅表达于外周带间质，ERβ表达于外周带及移行区的基质与上皮细胞，认为ERβ在BPH的形成中有重要“促进”作用。在雄性ERβ基因敲除小鼠前列腺中，上皮细胞增殖增加，凋亡减少；且ERβ选择激动剂能逆转雄性芳香化酶基因敲除小鼠的前列腺增生，而ERα选择激动剂不能，这两项研究提示ERβ是前列腺增生的保护因子［20，21］。另有研究［5，20-23］发现ERα介导雌激素对前列腺基质细胞的增殖作用，而ERβ具有抗增殖促凋亡的作用，与前列腺内的细胞凋亡密切相关。这些研究均表明ERα和ERβ具有明显不同的生物学效应，提示雌激素及其不同受体与BPH之间关系复杂，存在双重作用可能。BPH患者口服5α-RI治疗后，其体内特别是前列腺组织内的雄激素雌激素之间、雌激素与其两受体之间存在尚有待我们进一步深入了解的相互关系，这将是我们以后进一步研究的重要领域。

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Effects of 5α reductor inhibitors on the expression of estrogen receptor and androgen receptor in the tissues of prostatic hyperplasia

LU Yongyong1HUANG Hang1LI Peng2WU Zhigang1WU Xiuling2
1.Department of Urology Surgery，Wenzhou Medical University Affiliated First Hospital，Wenzhou 325000，China；2. Department of Pathology，Wenzhou Medical University Affiliated First Hospital，Wenzhou325000，China

R697.3

A

1673-9701（2016）24-0004-04

2016-05-24）

浙江省温州市科技计划项目（Y20120217）