脑梗死急性期患者血小板活化因子治疗前后的变化

赵　涵　邵　蓓

1.浙江省温州市中西医结合医院神经内科，浙江温州325000；2.温州医科大学附属第一医院神经内科，浙江温州325000

脑梗死急性期患者血小板活化因子治疗前后的变化

赵涵1邵蓓2

1.浙江省温州市中西医结合医院神经内科，浙江温州325000；2.温州医科大学附属第一医院神经内科，浙江温州325000

目的探讨脑梗死急性期患者血小板活化因子（PAF）的变化及意义。方法选择2014年5月～2015年5月在温州市中西医结合医院就诊的脑梗死患者，且发病时间在6～24 h，选取40例为观察组，另选健康者20例作为对照组，观察组治疗前及治疗后第2、3、7、14天用酶联免疫吸附双抗夹心法试验测定血小板活化因子（PAF）的浓度，20例健康者早晨空腹静脉血作为正常对照组。采用NIHSS评分对所有观察组患者治疗前的神经功能及治疗后的神经功能进行评分。结果脑梗死患者治疗前PAF为（211.31±11.22）pg/mL显著高于对照组的（155.49±8.7）pg/mL，差异有统计学意义（t=14.40，P＜0.05），PAF在治疗后第3天为（240.12±13.78）pg/mL，达到高峰，7 d后为（215.33± 16.43）pg/mL，逐渐下降，14 d后PAF水平（170.27±11.40）pg/mL与治疗前的（211.31±11.22）pg/mL比较显著下降，差异具有统计学意义（t=16.24，P＜0.05）。脑梗死急性期患者NIHSS与PAF浓度在治疗前和治疗后14 d呈正相关。结论脑梗死急性期血小板活化程度明显升高，经抗血小板治疗后明显下降，血小板的行为改变是动脉粥样硬化性血栓性脑梗死形成的主要原因之一。研究脑梗死急性期患者的血小板活化指标的变化规律，对急性脑梗死诊断和治疗均有重要意义。动态检测有助于早期判断病情的严重程度，并评估预后。

脑梗死；血小板活化因子（PAF）；血小板；神经功能缺损评分；血小板活化

［Abstract］Objective To discuss the changes and significance of platelet activating factor（PAF）in patients with acute cerebral infarction.Methods A total of 40 patients with cerebral infarction within 6 to 24 h of onset treated in Wenzhou Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine from May 2014 to May 2015 were selected as the observation group，and another 20 healthy volunteers were selected as the control group.The concentration of PAF in the observation group was detected before treatment and on day 2，3，7，and 14 days after treatment by ELISA double-antibody sandwich method.The fasting venous blood was detected in the control group.The neurological functions of patients were scored by NIHSS before treatment and after treatment.Results The level of PAF in the observation group was（211.31±11.22）pg/mL before treatment，which was significantly higher than that in the control group［（155.49±8.7）pg/mL］，（t=14.40，P＜0.05）.The level of PAF in the observation group was（240.12±13.78）pg/mL on day 3 after treatment，which was a peak，（215.33±16.43）pg/mL on day 7 after treatment，showing a decreasing trend，and was（170.27± 11.40）pg/mL on day 14 after treatment，which was significantly lower than the（211.31±11.22）pg/mL before treatment（t=16.24，P＜0.05）.The NIHSS was positively correlated with PAF before treatment and 14 d ays after treatment in patients with acute cerebral infarction.Conclusion The degree of platelet activation is significantly increased in acute stage of cerebral infarction，which significantly reduces after antiplatelet therapy.Behavior change of blood platelets is an important factor of cerebral thrombosis.Therefore，study on changes rules of PAF has great significance on diagnosis and treatment of acute cerebral infarction.Dynamic detection can help early judgment of disease status and assessment of prognosis.

［Key words］Cerebral infarction；Platelet activating factor（PAF）；Platelet；NIHSS；Platelet activation

脑梗死的发病率随年龄的增加而逐渐上升，流行病学研究表明，我国每年新发脑卒中患者为150～200万人，目前我国现存脑血管病患者700余万人［1］，其中约70%为缺血性脑卒中。急性脑梗死因高发病率一直备受医学界的关注［1］。近年来，对血小板活化因子（PAF）在脑梗死的发病机制中越来越重视，其的发生、发展与血小板活化功能亢进有关［2］。虽然脑梗死的患者外周血中血小板活化状态、功能变化的研究取得了一些进展，但对脑梗死PAF的动态演变的观察及研究极少［3］。本研究对急性脑梗死患者血小板活化状态进行研究，为临床提供客观量化血小板功能的检测指标，从而为临床的治疗提供理论依据。

1　资料与方法

1.1一般资料

2014年5月～2015年5月选择发病6～24 h内于温州市中西医结合医院就诊的脑梗死患者40例，另选取同期20例健康者为对照组，为无动脉硬化危险因素及动脉硬化性疾病的健康成年人，均来自门诊体检者。将40例急性脑梗死患者作为观察组，其中男28例，女12例，平均年龄（71.1±8.7）岁；对照组中男14例，女6例，平均年龄（70.6±8.9）岁，两组在性别、年龄方面比较无统计学差异（P＞0.05），具有可比性。患者均对本研究知情，并签订知情同意书。本研究已经通过医学伦理学委员会批准。

1.2入选和排除标准

1.2.1入选标准①符合1996年第四届全国脑血管病会议制定的诊断标准［4］，并通过CT或MRI确诊为脑梗死，排除颅内出血患者；②急性脑梗死发病6～24 h内入院治疗。

1.2.2排除标准①心源性栓塞；②近段时间内服用过抗血小板药物；③可行溶栓治疗；④肝、肾疾病及恶性肿瘤患者；⑤急性心肌梗死；⑥妊娠或哺乳期妇女；⑦发病2周内患感染性疾病或有明显感染迹象者或外周血WBC＞10×106/L；⑧近期大手术、创伤；⑨活动性溃疡或近期内脏出血者；⑩合并胰腺炎或哮喘。

1.3方法

1.3.1PAF检测方法抽取肘静脉血1.8 mL，注入1/10体积2%EDTA-Na2抗凝塑料试管中，30 min内离心（4℃、3000 r/min、离心10 min），分离上层血浆后，置于-20℃冰箱保存备用。采用酶联免疫吸附法原理定量测定人血浆中血小板活化因子，具体操作严格按说明书进行。

1.3.2实验方法观察组第1～7天给予拜阿司匹林肠溶片300 mg（德国拜耳医药保健有限公司，规格100 mg× 30片，批号BJ28529）1次/d，第8～14天给予拜阿司匹林肠溶片100 mg，1次/d，降脂稳定斑块，必要时调整血压、血糖，改善循环药物并酌情使用神经营养和脱水剂等。全部患者（40例）于入院后立即采肘静脉血测PAF浓度。再于治疗后第2、3、7、14天早晨空腹采肘静脉血测PAF浓度。20例健康者早晨空腹静脉血作为正常对照。根据美国国立卫生院神经功能缺损评分（NIHSS）［5］标准对所有患者于治疗前及治疗后第14天的神经功能进行评分。

1.4统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计量资料用（x±s）表示。观察组治疗前后的PAF比较用配对t检验，观察组内多时点的PAF变化用重复测量资料的方差分析，观察组与对照组的PAF比较用成组t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组治疗前外周血PAF变化

治疗前观察组外周血的PAF为（211.31±11.22）pg/mL，显著高于对照组的（155.49±8.7）pg/mL，差异有统计学意义（t=14.40，P＜0.05）。

2.2观察组治疗期间PAF变化

治疗期间对PAF值进行监测，结果显示PAF在治疗第3天达高峰，7 d后逐渐下降，14 d后PAF水平基本趋于正常。观察组各个时间点比较，差异有高度统计学意义（F=206.939，P＜0.01）。见表1。

表1　观察组治疗期间PAF的变化（x±s，pg/mL）

2.3观察组治疗前后NIHSS评分、PAF浓度变化及两者相关性分析

脑梗死患者NIHSS评分治疗前为（9.70±2.34）分，治疗后为（6.15±1.95）分，差异有统计学意义（t=9.64，P＜0.05），说明脑梗死患者经治疗后神经功能改善明显，PAF治疗前为（211.31±11.22）pg/mL，治疗14 d后PAF水平为（170.27±11.40）pg/mL，差异有统计学意义（t=16.24，P＜0.05）。NIHSS评分治疗前后与PAF治疗前后进行相关分析，两者呈正相关（治疗前r=0.812，P＜0.05，治疗后r=0.765，P＜0.05），见表2、图1、2。

表2　观察组治疗前后NIHSS评分、PAF浓度变化及两者相关性分析

图1　治疗前NIHSS评分与PAF相关分析

图2　治疗后NIHSS评分与PAF相关分析

3　讨论

脑梗死是指因脑部血液循环障碍，缺血、缺氧所致的局限性脑组织的缺血性坏死或软化。脑梗死特点为高发病率、高致死率、高致残率，故应该受到全社会的高度重视。所以，一旦诊断为脑梗死，应该争取超早期治疗，在发病4.5 h内若在溶栓适应证内，且排除禁忌证之后应该尽早开展静脉溶栓，在发病6～8 h内可行急性期血管内干预，但是在这时间窗内的患者很少，所以一般没有禁忌证的话，脑梗死主要的治疗是给予抗血小板聚集，降脂稳定斑块，控制原发病如血压血糖等。

脑梗死发病机制多为动脉粥样硬化性血栓形成，血栓形成的根源是血管壁内皮细胞受损，可通过以下三个途径致血栓形成。第一，血管胶原暴露与血小板接触面增加，导致血小板的活化、粘附和聚集，附壁血栓形成，致粥样硬化斑块形成；第二，内皮细胞损害，导致内皮通透性发生变化，脂质浸润，脂质积聚，也致粥样硬化斑块形成；第三，血小板被激活，释放血小板衍生生长因子，导致内膜平滑肌细胞增殖，分泌结缔组织大分子导致粥样硬化斑块形成。其中，血小板的活化程度是血栓形成的关键［6］。血小板的活性和功能的改变对脑梗死起着至关重要的作用，它不仅是脑梗死的开始原因之一，而且还是导致脑梗死后病情加重的重要因素之一。多种因素可导致血小板活化，循环血小板不会与血管内皮细胞下的结缔组织基质接触。一旦血管内膜的完整性受到破坏，血小板暴露于胶原纤维并与之产生相互作用，继而释放出活性因子，这可能是血管壁损伤加重的原因。血小板与胶原相互作用不仅提供了血小板粘附的表面，而且还能强烈刺激血小板活化，这启动了信号通路，导致血小板变形，在脑梗死疾病过程中，循环中的血小板聚集和其释放的产物可使得血小板进一步粘附、聚集从而形成血栓，甚至导致管腔的完全闭塞。血小板在各种刺激因素作用下，可表达各种特异性分子标志物［7-10］，血小板表面有许多糖蛋白受体，并且有相应的配体。针对血小板表面不同标志物的抗体，随着酶联免疫法的不断发展，可对血小板的功能进行检测。

血小板活化因子（platelet-activating factor，PAF），是一种具有生物活性的脂质递质，由白细胞、血小板、内皮细胞、肺、肝和肾等多种细胞和器官产生。PAF在细胞活化过程中大量产生，是至今为止发现的最有效的血小板激活剂，并可能参与急性脑梗死的病理生理过程［11-12］。PAF是血小板活化的标志，在脑梗死中起着重要作用。脑梗死患者中的PAF是过量产生的，PAF过度生成及异常释放引起脑损害，并且形成恶性循环，加重脑损害。PAF可通过以下机制引起脑损害：①PAF可扰乱细胞膜的功能导致对神经元的直接作用。②趋化和刺激白细胞，启动和加重脑损害。③直接或间接地激活凝血-纤溶机制。④聚集和激活血小板，导致血管栓塞或血管通透性增加。以上机制可互相影响，相互作用，从而形成恶性循环，加重脑损害。众多的实验和临床研究得出结论，PAF参与动脉粥样硬化性血栓性脑梗死的形成及发展的过程，与脑梗死的转归密切相关，对血小板活化仅需几秒［13］。PAF通过激活炎性细胞［14］，促进炎症反应，PAF通过聚集和激活血小板，导致血管栓塞或通透性增加，参与脑梗死后缺血性脑组织损伤的病理环节。在脑梗死后第3天PAF达到高峰，说明PAF与脑梗死后继发性脑组织损伤关系密切。

血小板活化因子［15］（platelet-activating factor，PAF）参与脑缺血病理过程各个环节，从血栓形成到脑缺血损害加重，PAF均起至关重要的作用。正常情况下，血浆及脑组织中PAF含量相对较低。但发生脑梗死时，PAF是过度产生的，缺血再灌注早期PAF浓度升高，PAF的过度生成及异常释放可通过促进血栓形成，降低脑血流量，增加脑耗氧量，加重脑水肿，并且形成恶性循环，加重脑损害。许多的动物实验和临床研究已经证实，PAF参与脑梗死的发生、发展病理过程，与脑梗死的转归密切相关，对血小板活化仅需几秒。

本研究采用酶联免疫吸附法原理定量测定40例脑梗死急性期患者的血小板活化因子浓度（PAF），并与健康者相比较，观察组治疗前PAF较健康对照组的PAF显著升高，说明脑梗死组血小板存在活化，PAF在治疗第3天达高峰，7 d后逐渐下降，14 d后PAF水平与治疗前相比显著下降，脑梗死患者第3天为脑水肿高峰期，7 d趋稳定，说明PAF与脑梗死后继发性脑组织损伤关系密切。本研究还得出脑梗死急性期治疗前后的NIHSS评分与PAF水平呈正相关［16］，也就意味着PAF高的患者，神经功能损伤重，恢复差，PAF浓度低的患者，神经功能损害较轻，预后相对好。说明PAF可用于对治疗的有效性进行评价，判断及评估预后［17］。方思伟等［18］在鼠大脑中动脉闭塞所致局部脑缺血侧脑组织缺血后48 h，PAF含量明显增加，进一步证实PAF与局部脑缺血继发性神经元损伤密切相关。李舟［19］在2012年将72例急性脑梗死患者分为轻型组30例、中型组27例和重型组15例，监测不同时间段的PAF的水平，结果三组脑梗死患者12 h内PAF水平均升高（P＜0.05），第3天达到高峰，与对照组比较有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01），与本研究相符。PAF在脑梗死中第3天达到高峰，说明PAF与脑梗死后继发性脑组织损伤关系密切。江飞飞［15］在2015年对30例脑梗死患者研究，结果显示脑梗死组PAF急性期较正常组明显升高，治疗后明显下降，与本研究相符。

本研究得出PAF在治疗第3天达高峰，7 d后逐渐下降，14 d后PAF水平与治疗前相比显著下降，脑梗死患者NIHSS评分治疗前后比较，差异具有统计学意义（P＜0.05），说明脑梗死患者经治疗后神经功能改善明显，NIHSS评分治疗前后与PAF治疗前后进行相关分析，两者呈正相关。脑梗死患者第3天为脑水肿高峰期，7 d趋于稳定，说明PAF与脑梗死后继发性脑组织损伤关系密切。与国内外的其他研究结果一致［20-21］。PAF在脑梗死急性期治疗第14天与治疗前相比显著下降，其原因可能为，脑梗死患者急性期使用抗血小板及他汀类药物使血小板的活化程度降低，并且随着病情的逐渐稳定，所以神经功能缺损评分也下降明显。

因此，研究观察脑梗死患者PAF水平动态变化，对于患者采取超早期治疗，降低病死率，致残率，有着重要临床意义，PAF检测可作为观察脑梗死病情演变的一项指标，动态检测有助于早期判断病情的严重程度，并可评估预后［22］。对疾病早期发现并及时采取相应措施、防止病情进展有重要的临床意义。

综上所述，脑梗死急性期患者的血小板活化程度明显升高，血小板功能明显增强，经抗血小板聚集、降脂稳定斑块等治疗后血小板活化程度明显下降，说明血小板活化可能参与脑梗死的发生及发展过程，与国内外研究相一致［20，23］。因此，在临床工作中，不仅仅需要观察患者的基础疾病如血压、血糖、血脂等情况，也需关注血小板参数的情况。脑梗死急性期治疗前后的NIHSS评分与PAF水平呈正相关，提示PAF高的患者，神经功能损伤重，恢复差，PAF浓度低的患者，神经功能损害较轻，预后相对好。说明PAF可用于对治疗的有效性进行评价、判断及评估预后。

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Changes of platelet activating factor in patients with acute cerebral infarction before and after treatment

ZHAO Han1SHAO Bei2
1.Department of Neurology，Wenzhou Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine in Zhejiang Province，Wenzhou325000，China；2.Department of Neurology，the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University，Wenzhou325000，China

R743.33

A

1673-9701（2016）24-0016-04

2016-05-05）

浙江省省级公益性技术应用研究计划项目（2011 C33017）；浙江省温州市公益性科技计划项目（Y20140520）