母体抗生素应用对新生儿肠道菌群建立的影响

陈丽花　关红琼

母体抗生素应用对新生儿肠道菌群建立的影响

陈丽花关红琼

目的研究孕期母体抗生素暴露对新生儿肠道菌群建立及平衡的影响。方法选取30例孕期母体有抗生素暴露的新生儿作为暴露组，另选取30例孕期母体没有任何抗生素暴露史的新生儿作为非暴露组，采用粪便培养观察两组新生儿出生第1天、第5天的菌落情况。结果暴露组母体抗生素使用最多为头孢菌素，占66.67%，其次为阿奇霉素，占20.0%。暴露组G+球菌计数高于非暴露组，G-杆菌低于非暴露组，组间差异显著（P＜0.05）；暴露组粪便培养中生长大肠埃希菌占16.67%低于非暴露组70.00%（P＜0.05），统计学差异显著。结论母体抗生素应用对新生儿正常肠道菌群的建立具有破坏作用，可导致新生儿肠道微生态紊乱，肠道菌群失衡。

抗生素；母体；新生儿；肠道菌群

肠道菌群平衡是新生儿过敏性疾病的防护因素，而抗生素暴露可以破坏肠道菌群的建立及平衡，增加新生儿过敏性疾病的发生率［1］。患有过敏性肠炎、哮喘、湿疹等过敏性疾病的新生儿在将来的生活中会长期使用免疫抑制药物或皮质甾体类药物，这些药物会增加感染率，严重威胁其健康，也给家庭和社会带来沉重的精神和经济负担。抗生素滥用已成为我国一个严峻的问题，但胎儿期抗生素暴露对于新生儿健康的影响知之甚少［2-3］。本课题拟采用病例对照研究方法，对30例母体孕期抗生素暴露新生儿和30例母体孕期抗生素未暴露新生儿的肠道菌群的建立情况进行对比，取得较满意结果，现报道如下。

资料与方法

一、一般资料

研究起止时间为2015年1月至2015年12月，选取30例孕期母体有抗生素暴露的新生儿作为暴露组，另选取同期30例孕期母体没有任何抗生素暴露史的新生儿作为非暴露组。暴露组新生儿男16例，女14例；非暴露组新生儿男15例，女15例；两组患儿均为母乳喂养。上述基线资料比较组间无明显差异（P＞0.05），具有可比性。用药原因为胎膜早破、生殖道支原体感染、生殖道衣原体感染、不明原因发热、急性肾盂肾炎等，所有新生儿母体均对研究过程知情，遵循平等自愿原则签署相关同意书后完成整个研究。

二、方法

1.资料收集

同意参与研究的孕妇，建立研究档案，并面对面完成询问式问卷调查（问卷1）。问卷内容包括孕妇的人口学特征、过敏史、孕期抗生素的使用情况、孕产史、吸烟情况、养宠物情况、新生儿的兄弟姐妹情况等。在征得孩子父亲的同意后，完成简短的问卷（问卷2），问卷内容为父亲的人口学特征、过敏史和吸烟史等。分娩时记录新生儿出生时的身高、体重、胎龄，分娩过程母体抗生素的使用情况。

2.标本采集与检验

严格按无菌操作原则进行，利用采样拭子收集两组新生儿出生第1天和第5天的大便，用大便取样管盛放，标记好取样管，旋紧盖子放在厌氧罐里避免污染，放在冰盒上立即送检。检测方法采用粪便培养：取粪便划线接种于麦康（Mac Conkey）及琼脂平板上孵育，对菌落检测细菌种类和计数，并计算其产生例数。

三、统计学处理

应用microsoft excel数据库保存实验原始数据，SPSS 16.0统计学软件进行数据处理，计量资料以x±s表示，采用t检验，计数资料以%表示，采用χ2检验，当P＜0.05时，统计学差异具有显著意义。

结果

一、暴露组抗生素使用情况分析

30例新生儿母体问卷调查孕期均使用抗生素，其中20例为头孢菌素、1例氨苄青霉素、3例青霉素、6例阿奇霉素。

二、两组新生儿细菌计数分析

暴露组G+球菌、G-球菌均明显上升，G+杆菌、G-杆菌降低；组间G+球菌、G-杆菌计数比较差异显著（P＜0.05）；G-球菌、G+杆菌计数比较无显著差异（P＞0.05），见表1。

表1　两组新生儿肠道菌群变化比较（±s，株）

表1　两组新生儿肠道菌群变化比较（±s，株）

nG+球菌G-球菌G+杆菌G-杆菌暴露组3040.1±32.56.6±14.116.8±22.635.9±26.4非暴露组3011.4±14.22.0±4.618.6±23.168.1±23.8 t值-4.431.700.314.96 P值-0.00000.09470.76140.0000

三、两组粪便培养结果分析

暴露组生长大肠埃希菌5（16.67%）例，生长葡萄球菌及其他G-杆菌25（83.33%）例；非暴露组生长大肠埃希菌21 （70.00%）例，粪肠球菌及其他G-杆菌9（30.00%）例（图1、2）。两组生长大肠埃希菌比例比较，统计学差异显著（χ2= 56.86，P＜0.05）。

讨论

抗生素在临床的使用范围广泛，但机体内耐药菌株会随用药量而增加，临床上存在抗生素使用日益广谱化、高档化趋势，但广谱抗生素的过量或滥用抗生素会导致医源性菌群功能失调，尤其是肠道菌群失调［4］。目前抗生素的滥用或过量使用在产科亦属于常见，因此临床儿科医师高度关注抗生素在产科的应用。本文研究中30例暴露组产妇抗生素使用率最高为头孢菌素（66.67%），说明抗生素在产科的应用情况不乐观，符合上述研究结果。正常情况下，肠道菌群保持在相对平衡状态，肠道原籍菌（主要是厌氧菌）和肠黏膜紧密粘连产生抵抗力，并与固有黏膜屏障、肠道内杀菌物质、免疫系统等构成固有生物屏障，防止外籍细菌在肠道内定植和粘附，保持微生态环境稳定具有重要意义［5-6］。肠道内固有细菌群间在生长过程中，具有互相制约又互相依赖的平衡关系。

胎儿期肠道处于无菌状态，出生后细菌立即开始在肠道内定植，生后新生儿粪便中就可检测到少量细菌。最先定植的是兼性厌氧菌，主要是大肠埃希菌和链球菌，并在最初1周内处于优势［7-8］。生后3～5 d专性厌氧菌开始定植，主要包括类杆菌、双歧杆菌和梭状芽孢杆菌。1周后新生儿肠道细菌计数就取决于外界环境。微生物生态系建立是一个耗时几年才能完成的缓慢渐进的动态演变过程，但是新生儿时期是肠道菌群快速建立的重要阶段。研究发现［9-11］新生儿肠道菌群的建立和演替决定其免疫系统平衡时间，肠道菌群组成和数量在具有过敏倾向的新生儿发生、发展成过敏性疾病过程中起到重要的作用。本次研究中，暴露组和非暴露组的G+球菌和G-杆菌的计数水平变化组间比较差异显著（P＜0.05），说明母体抗生素应用对新生儿产生作用，首先对定植于肠道中的大肠埃希菌等G-杆菌生长受到抑制或被杀死。粪便培养结果中暴露组生长大肠埃希菌16.67%低于非暴露组的70.00%，统计学差异显著（P＜0.05）。进一步说明母体抗生素的应用对新生儿的影响。新生儿肠道内微生态环境尚未稳定，对抗生素敏感的细菌在第一时间内被杀灭，容易导致G+有害杆菌的生长［12］。且双歧杆菌和乳酸杆菌等益生菌可减少炎症介质释放，减轻食物过敏时肠道的炎症反应，增加肠道屏障功能，还可抑制Th2介导免疫应答作用，促进Thl细胞发育，增加粪便和血中IgA含量，预防肠道及机体过敏反应的发生［13-14］。短期内，抗生素在抑制了病灶及血液中的致病菌的生长的同时也抑制了一些益生菌的生长，长期的影响破坏肠道内定居的菌群的自然生态平衡，使肠道菌群的数量和菌种比例发生变化，引起肠道及机体免疫功能紊乱。

综上所述，母体抗生素的应用会破坏新生儿肠道菌群，导致其功能失调，抑制药物敏感菌的生长，促进优势菌生长打破微生态平衡，对新生儿的肠道功能造成影响，进而影响其生长发育，故建议临床加强对孕期母体抗生素应用的监管，保证新生儿健康生长发育。

图1　抗生素暴露的婴儿大便培养（A：第1天，B：第5天）

图2　无抗生素暴露的婴儿大便培养（A：第1天，B：第5天）

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（本文编辑：谢芳）

10.3969/j.issn.1672-2159.2016.03.021

570311海南省农垦总医院妇产科

海南省医药卫生科研项目（1421000320A2007）

关红琼：E-mail：guanghq1962@163.com

2015-06-09）