拮抗香蕉枯萎病菌的海洋细菌TC-1发酵条件优化

易润华 张雅娟 岳蕾娜 黄华锋 齐希猛

摘要：通过对６种培养基进行筛选得到海洋拮抗细菌ＴＣ－１在ＢＰＤＢ培养基发酵的无菌发酵液对香蕉枯萎病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ． ｓｐ． ｃｕｂｅｎｓｅ）的抑菌活性最好。在ＢＰＤＢ培养基基础上，通过正交试验优化培养基成分及用量，得到最佳配方为马铃薯２００ ｇ，牛肉膏２０ ｇ，葡萄糖２０ ｇ，玉米粉７ ｇ、蛋白胨７ ｇ，蒸馏水１ ０００ ｍＬ，ｐＨ自然；通过正交试验对发酵条件的装瓶量、培养温度、初始ｐＨ、发酵时间和转速５个因素进行了优化，得到最优发酵条件为：装瓶量２０％，培养温度２７℃，初始ｐＨ自然，发酵时间７２ ｈ，摇床转速２００ ｒ／ｍｉｎ；在最佳培养基和最佳发酵条件下，ＴＣ－１的无菌发酵液抑菌圈直径为２４．３ ｍｍ，与优化前抑菌圈直径２０．７ ｍｍ相比，抑菌活性提高了１７．４％。

关键词：海洋细菌；抑菌活性；香蕉枯萎病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ． ｓｐ． cｕｂｅｎｓｅ）；发酵条件优化

中图分类号：Ｓ４３６．６８＋１文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０12）03－0506-04

Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｍａｒｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｓｔｒａｉｎ ＴＣ－１ ａｇａｉｎｓｔ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ． ｓｐ． ｃｕｂｅｎｓｅ Ｒａｃｅ ４ Ｃａｕｓｉｎｇ Ｂａｎａｎａ Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｗｉｌｔ

ＹＩ Ｒｕｎ－ｈｕａ，ＺＨＡＮＧ Ｙａ－ｊｕａｎ，ＹＵＥ Ｌｅｉ－ｎａ，ＨＵＡＮＧ Ｈｕａ－ｆｅｎｇ，ＱＩ Ｘｉ－ｍｅｎｇ

（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Bｉｏ－ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｏｃｅａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ ５２４０８８， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｃｅｌｌ－ｆｒｅｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｌｉｑｕｉｄ （ＣＦＬ） ｆｒｏｍ ｓｉｘ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉa ａｆｔｅｒ ｓｔｒａｉｎ ＴＣ－１ ｗａｓ ｉｎｃｕｂａｔｅｄ ｆｏｒ ４８ ｈ ｗｅｒｅ ｅｓｔｉｍａｔｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ Ｏｘｆｏｒｄ ｃｕｐ ｍｅｔｈｏｄ. Tｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｈａｌｏｓ ｏｆ ＣＦＬ ｆｒｏｍ ＢＰＤＢ ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ the ｂｉｇｇｅｓｔ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｓｉｘ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉa． Ｔｏ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈｅ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ｏｆ ＣＦＬ， ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ａｎｄ ｄｏｓａｇｅｓ ｏｆ ｆｉｖｅ ｏｒｇａｎｉｃ ｍｉｘｔｕｒｅｓ ｔｏ be added ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎａｌ ＢＰＤＢ ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ by ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ. Tｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ｐｏｔａｔｏ ２００ ｇ， bｅｅｆ eｘｔｒａｃｔ ２０ ｇ， Ｄ－ｇｌｕｃｏｓｅ ２０ ｇ，ｃｏｒｎ ｆｌｏｕｒ ７ ｇ ａｎｄ ｐｅｐｔｏｎｅ ７ ｇ ｉｎ １ ０００ ｍL ｄｅｉｏｎｉｚｅｄ ｗａｔｅｒ． Ｔｈｅ Ｌ２５（５６） ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ， ｍｅｄｉｕｍ ｑｕａｎｔｉｔｙ ２０％，ｃｕｌｔｉｖａｔing ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ２７ ℃， ｉｎｉｔｉａｌｉｚａｔｉｏｎ ｐＨ ｏｆ ｔｈｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ５ ｍｍ， ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ９６ ｈ， ｒｏｔａｔion ｓｐｅｅｄ １２０ ｒ／ｍｉｎ． Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｈａｌｏｓ ｏｆ ＣＦＬ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍum ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ was ２４．３ ｍｍ； ｔｈｅ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ was ｉｎｃｒｅａｓｅｄ by １７．４％， ｃｏｍｐａｒｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｚｏｎｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆ ２０．７ ｍｍ ｂｅｆｏｒｅ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｍａｒｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ； antifungal activity； ｂａｎａｎａ ｖａｓｃｕｌａｒ ｗｉｌｔ； ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ

香蕉枯萎病是一种对香蕉具有毁灭性的病害，是国内外检疫对象，该病是由尖孢镰刀菌［Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ． ｓｐ． ｃｕｂｅｎｓｅ（Ｅ． Ｆ． Ｓｍｉｔｈ） Ｓｎｙｄｅｒ ｅｔ Ｈａｎｓｅｎ（ａｎａｍｏｒｐｈ）］引起的，该病菌有４个生理小种，在我国有１号和４号小种，其中以４号小种的危害性最大［１－５］。本研究对从广东湛江特呈岛近海岸海泥中分离得到的一株对香蕉枯萎病菌４号小种有稳定拮抗作用的海洋细菌ＴＣ－１的发酵培养基和发酵条件进行了优化，以期为该菌株作为香蕉枯萎病的生防菌进行工业化生产奠定基础。

１材料与方法

１．１菌株来源

拮抗海洋细菌菌株ＴＣ－１为２００５年从广东省湛江市特呈岛近海海泥中分离筛选得到的对香蕉枯萎病菌及其他１４种病原微生物有很好拮抗作用的海洋细菌，初步鉴定为芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．）［６］。香蕉枯萎病菌４号生理小种是从发病植物组织中分离得到。

１．２无菌发酵液的抑菌活性测定

１）无菌发酵液制备：将海洋细菌ＴＣ－１菌种在ＢＰＤＡ培养基（马铃薯２００ ｇ，牛肉膏２０ ｇ，葡萄糖２０ ｇ，琼脂１５～１８ ｇ，蒸馏水１ ０００ ｍＬ，ｐＨ自然）平板上划线，培养４８ ｈ后，挑取ＴＣ－１用无菌水稀释得到１０６～１０７ ＣＦＵ／ｍＬ的菌液。取菌液按１％接种量接种到各发酵培养液内发酵，菌液经８ ０００ ｒ／ｍｉｎ两次离心３０ ｍｉｎ除去菌体，上清液经孔径为０．２２ μｍ的滤膜过滤除菌后得到无菌发酵液，４ ℃冰箱保存备用。

２）抑菌活性测定：在ＰＤＡ培养基上将香蕉枯萎病菌４号小种培养５～７ ｄ，用无菌水将孢子洗出，配制成孢子悬浮液（１０６～１０７ CFU／ｍＬ）。将孢子悬浮液加入４０～５０ ℃待凝固的培养基内，充分摇匀使培养基内孢子浓度约为１０３～１０４ CFU／ｍＬ，倒平板（１５ ｍＬ／皿左右）后用无菌镊子将牛津杯轻轻放置于平板上，在杯内加入１００ μＬ待测无菌发酵液，无菌风吹干，置于２８ ℃培养，测量抑菌圈直径。

１．3培养基的筛选

待筛选的培养基：ＢＰＤＢ（马铃薯２００ ｇ，牛肉膏２０ ｇ，葡萄糖２０ ｇ，蒸馏水１ ０００ ｍＬ，ｐＨ自然）、ＢＰＹ（牛肉膏５ ｇ，酵母膏５ ｇ，葡萄糖５ ｇ，蛋白胨１０ ｇ，ＮａＣｌ ５ ｇ，水１ ０００ ｍＬ，ｐＨ ７．２）、ＩＦＦＩ２４Ｍ（牛肉膏５ ｇ，酵母膏５ ｇ，蛋白胨１０ ｇ，葡萄糖１０ ｇ，乳糖５ ｇ，ＮａＣｌ ５ ｇ，水１ ０００ ｍＬ，ｐＨ ６．８）、营养肉汤（牛肉膏３０ ｇ，蛋白胨５ ｇ，水１ ０００ ｍＬ，ｐＨ ７．０～７．２）、ＬＢ （酵母膏５ ｇ，蛋白胨１０ ｇ，ＮａＣｌ １０ ｇ，水１ ０００ ｍＬ，ｐＨ ７．０）和ＮＡ液体培养基（牛肉膏３ ｇ，蛋白胨５ ｇ，水１ ０００ ｍＬ，ｐＨ ６．６～７．０）。

将在ＰＤＡ培养基上培养４８ ｈ的拮抗菌株ＴＣ－１配成悬浮液（１０６～１０７ ＣＦＵ／ｍＬ），取２００ μＬ分别接种于盛有２０ ｍＬ培养液的５０ ｍＬ三角瓶中， ２９ ℃，２００ ｒ／ｍｉｎ 振荡培养２４、３６、４８、６０和７２ ｈ后，制备无菌发酵液，以抑菌圈直径大小确定最佳培养基。

１．4培养基成分的优化

在最佳培养基的基础上，按Ｌ２５（５６）正交表进行培养基成分优化试验，通过抑菌圈直径确定最优培养基成分。设置3因素５水平试验（表1）。

１．5发酵条件优化

将ＴＣ－１接种到１．4优化得到的最优培养基，按Ｌ２５（５６）正交表进行发酵条件优化试验，以装瓶量（Ａ）、培养温度（Ｂ）、初始ｐＨ（Ｃ），发酵时间（Ｄ）和转速（Ｅ）为试验因素，每因素设５个水平（表２）。通过测定抑菌圈直径确定最优发酵条件。

２结果与分析

２．１培养基的筛选结果

用６种供筛选的培养基培养ＴＣ－１得到的无菌发酵液对香蕉枯萎病菌的抑菌圈直径如表３。从表３中可看出，除ＢＰＤＢ培养基外，其他５种培养基在２４ ｈ时均无抑菌活性；３６和４８ ｈ时ＢＰＤＢ培养基的抑菌圈直径分别为２１．５ ｍｍ和２０．７ ｍｍ；６０ ｈ时ＢＰＤＢ、ＢＰＹ和ＩＦＦＩ２４Ｍ的抑菌圈直径无显著差异，分别为１６．７、１８．５和１８．５ ｍｍ；７２ ｈ时抑菌圈直径最大的是ＩＦＦＩ２４Ｍ，为１９．７ ｍｍ；而ＢＰＤＢ与ＢＰＹ的抑菌圈直径无显著差异，分别为１５．７ ｍｍ和１５．２ ｍｍ；ＴＣ－１在各培养基中培养３６、４８、６０和７２ ｈ后得到的无菌发酵液平均抑菌活性最大的是ＢＰＤＢ培养基，其平均抑菌圈直径为１８．８ ｍｍ。ＴＣ－１在ＢＰＤＢ培养基培养３６ ｈ后无菌发酵液的抑菌圈直径明显大于其他培养基。故以ＢＰＤＢ培养基作为基础培养基进行培养基成分优化。

２．２培养基的优化试验结果

从培养基优化正交试验结果（表４）可以看出，各培养基成分对无菌发酵液抑菌活性均有显著影响，影响主次排序为C、Ｂ、Ａ，即培养时间对抑菌活性影响最大。从表４得到最佳培养条件组合为Ａ４Ｂ３Ｃ２。

验证试验结果表明，培养２４ ｈ发酵液的抑菌圈直径为１９．０ ｍｍ，３６ ｈ为２３．０ ｍｍ，４８ ｈ为１９．０ ｍｍ，６０ ｈ为１７．０ ｍｍ，７２ ｈ为１６．０ ｍｍ。在３６ ｈ时的抑菌圈直径最大（图１），与培养基优化所得结果相符。后续的试验将７ ｇ玉米粉和７ ｇ蛋白胨加入BＰＤＢ培养基中进行发酵。

２．３发酵条件优化试验结果

发酵条件优化正交试验结果如表５，各因素Ｒ值排序为：Ｂ、Ａ、E、D、Ｃ，即最主要的影响因素是培养温度。最佳发酵条件为Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ５、Ｅ５，即在装瓶量２０％，培养温度２７ ℃，初始ｐＨ ５，发酵时间７２ ｈ，摇床转速２４０ ｒ／ｍｉｎ培养条件下得到的无菌发酵液的抑菌活性最强。最佳发酵条件下得到的无菌发酵液抑菌圈直径为２４．３ ｍｍ，比优化前抑菌活性（抑菌圈直径２０．７ ｍｍ）提高了１７．４％。

３小结与讨论

本试验以无菌发酵液的抑菌活性作为指标，筛选和优化得到最利于ＴＣ－１菌株产抗菌活性物质的培养基配方，并进行了发酵条件的优化，得到最佳培养条件为：装瓶量２０％，培养温度２７ ℃，初始ｐＨ ５，发酵时间７２ ｈ，摇床转速２４０ ｒ／ｍｉｎ，在最佳培养基和最优化发酵条件培养下，无菌发酵液的抑菌活性较高，比优化前抑菌活性提高了１７．４％。

香蕉枯萎病是土传性真菌病害，目前通过化学防治和选育抗病品种进行防治效果并不理想，通过筛选生防菌对该病进行防治是一条值得探索的途径［７－１２］。许多学者对香蕉枯萎病的生物防治进行了研究［２，１３－１５］，但是还有许多工作需要深入。本研究对香蕉枯萎菌有抑制作用的海洋细菌ＴＣ－１发酵条件进行了优化，有望为进一步开发利用发酵液进行病害防治提供参考。

参考文献：

［１］ ＬＵＩＳ Ｐ Ｖ． Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｗｉｌｔ（Ｐａｎａｍａ ｄｉｓｅａｓｅ） ｏｆ ｂａｎａｎａｓ： ａｎ ｕｐｄａｔｉｎｇ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔ ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ ｏｎ ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｉｔｓ ｃａｕｓａｌ ａｇｅｎｔ［Ｊ］． ＦＩＴＯＳＡＮＩＤＡＤ，２００４，８（４）：２７－３８．

［２］ ＰＬＯＥＴＺ Ｒ Ｃ，ＰＥＧＧ Ｋ Ｇ． Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｗｉｌｔ ｏｆ ｂａｎａｎａ ａｎｄ Ｗａｌｌａｃｅｓ ｌｉｎｅ： Ｗａｓ ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｒｉｇｉｎａｌｌｙ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｔｏ ｈｉｓ Ｉｎｄｏ－Ｍａｌａｙａｎ ｒｅｇｉｏｎ？［Ｊ］． Ａｕｓｔｒａｌａｓ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏｌ，１９９７，２６：２３９－２４９．

［３］ ＰＬＯＥＴＺ Ｒ Ｃ． Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｗｉｌｔ ｏｆ ｂａｎａｎａ ｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｓｅｖｅｒａｌ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ｒｅｆｅｒｒｅｄ ｔｏ ａｓ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ． ｓｐ． ｃｕｂｅｎｓｅ［Ｊ］． Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２００６，９６：６５３－６５６．

［４］ 林时迟，张绍升，周乐锋，等． 福建省香蕉枯萎病鉴定［Ｊ］．福建农业大学学报，２０００，２９（４）：４６５－４６９．

［５］ 王振中．香蕉枯萎病及其防治研究进展［Ｊ］．植物检疫，２００６，２０（３）：１９８－２００．

［６］ 黄瑶，杨耿周，张雅娟，等． 拮抗香蕉枯萎病菌海洋细菌的筛选和鉴定［Ｊ］．广东海洋大学学报，２００９，２９（６）：７２－７７．

［７］ 杨秀娟，何玉仙，陈福如，等．抗香蕉枯萎病菌拮抗菌的鉴定及其定殖［Ｊ］．中国生物防治，２００７，２３（１）：７３－７７．

［８］ 肖爱萍，李庚花，游春平，等． ５株拮抗细菌对香蕉枯萎病菌的抑制作用［Ｊ］．江西农业大学学报，２００５，２７（４）：５７２－５７５．

［９］ 付业勤，张科立，潘羡心，等．内生拮抗细菌ＢＥＢ２的分子鉴定及其对香蕉枯萎病菌的抑制作用［Ｊ］．热带作物学报，２００９，３０（１）：８０－８５．

［１０］ ＳＡＲＡＶＡＮＡＮ Ｓ， ＭＵＴＨＵＳＡＭＹ Ｍ， ＭＡＲＩＭＵＴＨＵ Ｔ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ ｏｎ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｗｉｌｔ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｉｎ ｂａｎａｎａ ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００４，４（２）：１９２－１９８．

［１１］ ＳＩＶＡＭＡＮＩ Ｅ， ＧＮＡＮＡＭＡＮＩＣＫＡＭ Ｓ Ｓ． Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ．ｓｐ． ｃｕｂｅｎｓｅ ｉｎ ｂａｎａｎａ ｂｙ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ［Ｊ］． Ｐｌａｎｔ ａｎｄ Ｓｏｉｌ， １９８８，１０７： ３－９．

［１２］ ＧＥＴＨＡ Ｋ， ＶＩＫＩＮＥＳＷＡＲＹ Ｓ， ＷＯＮＧ Ｗ Ｈ， ｅｔ ａｌ． Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ． ｓｔｒａｉｎ ｇ１０ ｆｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｗｉｌｔ ａｎｄ ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ｐｏｔ－ｇｒｏｗｎ ｂａｎａｎａ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ［Ｊ］． Ｊ Ｉｎｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００５，３２： ２４-３２．

［１３］ ｄａ ＳＩＬＶＡ （Ｊｒ） Ｊ Ｆ， ＣＯＲＤＥＩＲＯ Ｚ Ｊ Ｍ， ＯＬＩＶＥＩＲＡ Ａ Ｍ Ｇ． Ｓｏｉｌ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｉｎ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｏｆ Ｐａｎａｍａ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］． ＩＮＦＯＭＵＳＡ，２０００，９（２）：１３－１６．

［１４］ ＨＥＲＢＥＲＴ Ｊ Ａ，ＭＡＲＸ Ｄ． Ｓｈｏｒｔ－ｔｅｒｍ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｐａｎａｍａ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｓｏｕｔｈ Ａｆｒｉｃａ［Ｊ］． Ｐｈｙｔｏｐｈｙｌａｃｔｉｃａ，１９９０，２２：３３９－３４０．

［１５］ ＯＲＴＩＺ Ｒ， ＦＥＲＲＩＳ Ｒ Ｓ Ｂ， ＶＵＹＬＳＴＥＫＥ Ｄ Ｒ． Ｂａｎａｎａ ａｎｄ ｐｌａｎｔａｉｎ ｂｒｅｅｄｉｎｇ［Ａ］． ＧＯＷＥＮ Ｓ，ｅｄ． Ｂａｎａｎａｓ ａｎｄ Ｐｌａｎｔａｉｎｓ［Ｍ］． Ｌｏｎｄｏｎ： Ｃｈａｐｍａｎ ＆ Ｈａｌｌ，１９９５．１１０－１４６．

（责任编辑王贵春）

收稿日期：２０１１－０８－０１

基金项目：广东省农业科技攻关项目（２００９Ｂ０２０３１００１６）；广东海洋大学海洋微生物团队项目

作者简介：易润华（１９７３－），男，江西宜春人，副教授，博士，主要从事植物病害生物防治工作，（电话）１５８１２３９１３６２（电子信箱）ｓｃｉｂｙｒｈ＠１６３．ｃｏｍ。