对金铃子散中延胡索和川楝子不同炮制品之间配伍后镇痛抗炎作用研究*

郑蓓蓓，窦志英

本研究将金铃子散中延胡索进行醋炙，川楝子进行炒制处理，观察并比较不同炮制品之间配伍后对小鼠镇痛、抗炎作用的影响[1]。

1 实验材料

1.1 实验动物 昆明种小鼠300只，体质量（20±2）g，雌雄各半，由天津市山川红实验动物科技有限公司提供，实验动物使用许可证号：SCXK（津）2009-0001。根据实验和性别分笼喂养，自由采食饮水。

1.2 主要仪器 HH-S型水浴锅（巩义市予华仪器有限责任公司）；电子天平（天津市天马公司）。

1.3 试剂与药材 阿司匹林，广东百澳药业有限公司（批号20070501）；生理盐水，山东华鲁制药有限公司（批号0100530）；米醋；延胡索：产地浙江，购于中新药业集团药材分公司，经本校中药鉴定教研室马琳教授鉴定为罂粟科植物延胡索的干燥块茎。川楝子：产自四川，购于天津市中药饮片厂（批号：1001084），经本校中药鉴定教研室马琳教授鉴定为楝科植物川楝的成熟果实。

2 实验方法

2.1 药物炮制 醋炙延胡索：取净延胡索适量，加20%米醋拌匀，稍闷，待米醋被吸尽后，置炒制容器内文火炒干，取出。炒制川楝子：取净川楝子适量，置容器内炒制，用中火加热，炒制表面黄色，取出。

2.2 药液制备 延胡索不同样品的制备：称取延胡索各样品，分别加10倍量水煎煮2次，每次1 h，水煎液过滤后浓缩至各浓度备用。

川楝子不同样品的制备：称取川楝子各样品，分别加10倍量水煎煮2次，每次1 h，水煎液过滤后浓缩至各浓度备用。

金铃子散的制备：称取延胡索及川楝子按1∶1混合均匀，加10倍量水煎煮2次，每次1 h，水煎液过滤后浓缩至各浓度备用。余下延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍后金铃子散制备方法同上。

2.3 用SPSS 13.0软件包分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，正态分布的计量资料采用单因素方差分析，偏态分布的计量资料采用秩和检验。

2.4 热传导引起拟痛反应 取昆明种小鼠260只，体质量18～22g，雌性，按随机数字表法分为26组，每组10只，即生理盐水组、阿司匹林组、给药组低剂量组、给药组中剂量组、给药组高剂量组，编号，称质量，灌胃给药，每天1次，连续给药4 d，空白对照组给生理盐水（0.20 mL/10g），阳性对照组给阿司匹林，给药量1.0 mg/10g，低、中、高剂量组分别进行10、20、40g/kg灌胃给药。将恒温水浴锅调节至55℃，热板预热10 min，热板法测定各组小鼠的正常痛反应（舔后足，踢后腿或跳跃）时间，共测2次，每次间隔5 min，将两次痛阈的平均值作为该鼠给药前的痛阈值。不足15秒舔足或超过60秒未舔足者弃之不用。各组最后一次给药后0.5 h开始测定小鼠痛阈值，每隔0.5 h测定1次，共4次，与给药前和对照组比较。若小鼠在热板上60秒仍无痛觉，立即取出，按60秒计算。结果见表1-3。

表1 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对热传导引起拟痛反应影响（低剂量组，±s，n=10）

表1 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对热传导引起拟痛反应影响（低剂量组，±s，n=10）

注：与生理盐水组比较，**P<0.01；与延胡索组比较，△P<0.05；与川楝子组比较，▲▲P<0.01；与延胡索+川楝子组比较，▽P<0.05，▽▽P<0.01；与醋延胡索+川楝子组比较，▼P<0.05。

给药后痛阈值（秒）给药后0.5 h 给药后1 h 给药后1.5 h 给药后2 h生理盐水组 - 25.02± 3.35 22.61± 5.59 24.73± 4.77 26.71± 6.36 31.15± 7.13阿司匹林组 0.1 22.14± 3.29 48.78± 7.75** 48.85± 8.60** 45.02±11.69** 55.31± 4.64**延胡索组 10.0 33.61±10.13 41.26± 7.43** 44.56± 9.77** 45.28±11.21** 49.36±13.21**醋延胡索组 10.0 35.23± 6.94 46.71± 7.93** 47.23± 9.80** 48.74± 5.45** 57.71± 4.23**川楝子组 10.0 39.11± 9.82 45.08± 7.56** 50.40±10.26** 46.84± 9.62** 46.75±10.99**炒川楝子组 10.0 24.29± 4.84 30.59±10.04**▲▲ 32.36± 5.24**▲▲ 34.19± 7.78**▲▲ 39.43± 9.01**延+川 10.0 27.67± 3.47 33.55± 9.89** 42.26± 9.97**▲▲ 46.62±10.55** 44.78±12.01**醋延+川 10.0 31.92± 5.44 44.96± 9.10**▽ 48.06±10.95** 43.68±10.66** 53.46± 7.17**醋延+炒川 10.0 27.45± 4.77 47.91±10.04**▽▽ 38.70± 6.39**▲▲ 41.05±13.23** 45.94±11.49**延+炒川 10.0 29.62± 4.24 50.89±10.44**△▽▽ 44.26±10.11**▽ 47.37±11.22** 51.43± 9.34**组别 剂量（g/kg）给药前痛阈值（秒）

表2 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对热传导引起拟痛反应影响（中剂量组，±s，n=10）

表2 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对热传导引起拟痛反应影响（中剂量组，±s，n=10）

注：与生理盐水组比较，*P<0.05，**P<0.01；与延胡索组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与川楝子组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

给药后痛阈值（秒）给药后0.5 h 给药后1 h 给药后1.5 h 给药后2 h生理盐水组 - 25.02±3.35 22.61± 5.59 24.73± 4.77 26.71± 6.36 31.15± 7.13阿司匹林组 0.1 22.14±3.29 48.78± 7.75** 48.85± 8.60** 45.02±11.69** 55.31± 4.64**延胡索组 20.0 25.89±5.38 34.02±12.12* 33.63±12.15* 39.07±12.72* 41.66±13.44*醋延胡索组 20.0 23.37±4.68 38.18±10.14** 35.75± 9.77** 43.66±12.30** 43.54± 9.83**川楝子组 20.0 26.47±5.11 33.01±12.14* 32.95±11.17* 35.79±11.27* 40.68±11.06*炒川楝子组 20.0 24.57±5.22 36.61±13.47** 38.93±13.37** 38.41±12.80* 41.78±10.00*延+川 20.0 27.09±6.86 48.22±12.66**△▲ 48.60±12.03**△▲▲ 48.38±14.07**▲ 44.74±15.01*醋延+川 20.0 25.63±5.23 44.80± 9.96**△▲ 45.27± 8.11**△▲ 47.05± 7.20**▲ 47.58± 8.78**醋延+炒川 20.0 26.85±7.60 48.26±11.11**△▲▲ 50.54± 8.34**△△▲▲ 49.20± 7.98**△▲▲ 52.78± 8.63**△▲延+炒川 20.0 26.71±6.55 48.09± 7.09**△△▲▲ 44.11± 7.57**△▲ 47.87±10.14**▲ 49.01± 9.67**组别 剂量（g/kg）给药前痛阈值（秒）

表3 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对热传导引起拟痛反应影响（高剂量组，±s，n=10）

表3 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对热传导引起拟痛反应影响（高剂量组，±s，n=10）

注：与生理盐水组比较，**P<0.01；与延胡索组比较，△P<0.05，△△P<0.01;与川楝子组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；与延胡索+川楝子组比较，▽P<0.05。

给药后痛阈值（秒）给药后0.5 h 给药后1 h 给药后1.5 h 给药后2 h生理盐水组 - 25.02±3.35 22.61± 5.59 24.73± 4.77 26.71± 6.36 31.15± 7.13阿司匹林组 0.1 22.14±3.29 48.78± 7.75** 48.85± 8.60** 45.02±11.69** 55.31± 4.64**延胡索组 40.0 33.06±9.48 58.03± 6.24** 47.49±13.14** 54.71± 6.21** 55.43± 5.40**醋延胡索组 40.0 26.22±5.80 50.61± 4.28**△△ 47.65± 9.73** 51.22± 5.81** 56.16± 7.31**川楝子组 40.0 31.08±4.83 49.47± 8.14** 44.02±12.33** 46.48±11.38** 52.52± 5.91**炒川楝子组 40.0 29.81±5.67 53.97± 8.58** 54.11± 6.77** 51.85± 6.77** 54.58± 8.32**延+川 40.0 26.68±5.81 48.89±11.90**△ 46.77±14.09** 55.75± 9.65** 51.23±11.61**醋延+川 40.0 27.76±2.75 56.17± 8.09** 59.43± 1.09**△△▲▲▽ 55.65± 5.37**▲ 54.91± 9.64**醋延+炒川 40.0 27.84±2.62 56.77± 4.68**▲ 59.00± 3.17**△△▲▲▽ 55.84± 7.04**▲ 57.99± 5.91**延+炒川 40.0 26.45±5.12 51.61± 8.50** 52.38± 8.30** 51.49±11.12** 58.36± 5.18**▲组别 剂量（g/kg）给药前痛阈值（秒）

2.5 化学刺激引起拟痛反应 取昆明种小鼠260只，体质量18～22g，雌雄各半，按随机数字表法分为26组，每组10只，即生理盐水组、阿司匹林组、给药组低剂量组、给药组中剂量组、给药组高剂量组、编号，称质量，灌胃给药，每天1次，连续给药4 d，空白对照组给生理盐水（0.20 mL/10g），阳性对照组给阿司匹林，给药量1.0 mg/10g，低、中、高剂量组分别进行40、10、20g/kg灌胃给药。给药后1 h，各鼠腹腔注射1%醋酸溶液每只0.2 mL，观察注射后5～15 min内出现扭体反应次数（腹部两侧收缩内陷、腹壁下贴、臀部抬高或后肢伸展，即扭体反应），计算镇痛百分率。镇痛率(%)=（生理盐水对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数）/生理盐水对照组平均扭体次数×100%。结果见表4-6。

表4 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对化学刺激引起拟痛反应的影响（低剂量组，±s，n=10）

表4 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对化学刺激引起拟痛反应的影响（低剂量组，±s，n=10）

注：与生理盐水组比较，**P<0.01；与延胡索组比较，△△P<0.01;与川楝子组比较，▲▲P<0.01;与延胡索+川楝子组比较，▽P<0.05，▽▽P<0.01；与醋延胡索+川楝子组比较，▼P<0.05。

组别 剂量（g/kg） 10 min内扭体次数 扭体抑制率（%）生理盐水组 - 26.20±6.34 -阿司匹林组 0.1 2.90±3.25** 88.93延胡索组 10.0 15.90±1.52** 39.31醋延胡索组 10.0 11.50±3.72**△△ 56.11川楝子组 10.0 18.30±3.56** 30.15炒川楝子组 10.0 17.10±2.23** 34.73延+川 10.0 16.70±2.21** 36.26醋延+川 10.0 13.90±3.25**▲▲▽ 46.95醋延+炒川 10.0 11.50±1.58**△△▲▲▽▽▼ 56.11延+炒川 10.0 16.30±5.58** 37.79

表5 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对化学刺激引起拟痛反应的影响（中剂量组，±s，n=10）

表5 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对化学刺激引起拟痛反应的影响（中剂量组，±s，n=10）

注：与生理盐水组比较，**P<0.01；与延胡索组比较，△△P<0.01；与川楝子组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；与延胡索+川楝子组比较，▽▽P<0.01。

组别 剂量（g/kg） 10 min内扭体次数 扭体抑制率（%）生理盐水组 - 26.20±6.34 -阿司匹林组 0.1 2.90±3.25** 88.93延胡索组 20.0 12.90±4.33** 50.76醋延胡索组 20.0 13.00±6.32** 50.38川楝子组 20.0 16.70±8.14** 36.26炒川楝子组 20.0 15.20±6.65** 41.98延+川 20.0 13.20±4.16** 49.62醋延+川 20.0 9.20±4.42**▲ 64.86醋延+炒川 20.0 6.10±2.60**△△▲▲▽▽ 76.72延+炒川 20.0 11.20±5.88** 57.25

表6 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对化学刺激引起拟痛反应的影响（高剂量组，±s，n=10）

表6 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对化学刺激引起拟痛反应的影响（高剂量组，±s，n=10）

注：与生理盐水组比较，**P<0.01；与延胡索组比较，△△P<0.01;与川楝子组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；与延胡索+川楝子组比较，▽P<0.05。

组别 剂量（g/kg） 10 min内扭体次数 扭体抑制率（%）生理盐水组 - 26.20±6.34 -阿司匹林组 0.1 2.90±3.25** 88.93延胡索组 40.0 5.50±3.75** 79.01醋延胡索组 40.0 3.60±1.35** 86.26川楝子组 40.0 7.70±1.77** 70.61炒川楝子组 40.0 4.60±2.95**▲ 82.44延+川 40.0 4.30±2.50**▲▲ 83.59醋延+川 40.0 3.30±3.23**▲▲ 87.40醋延+炒川 40.0 1.70±1.83**△△▲▲ 93.51延+炒川 40.0 3.90±1.66**▲▲ 85.11

2.6 二甲苯致小鼠耳肿 取昆明种小鼠260只，体质量18～22g，雌雄各半，随机分为26组，每组10只，即生理盐水组、阿司匹林组、给药组低剂量组、给药组中剂量组、给药组高剂量组，编号，称质量，灌胃给药，每天1次，连续给药4 d，空白对照组给生理盐水（0.20 mL/10g），阳性对照组给阿司匹林，给药量 1.0 mg/10g，低、中、高剂量组分别给予 10、20、40g/kg灌胃给药。给药后1.5 h，将二甲苯0.05 mL均匀涂于小鼠右耳，30 min后处死，用7 mm打孔器分别打下左右耳片，以左右耳质量之差作为肿胀度，计算肿胀抑制率，肿胀抑制率（%）=（对照组平均肿胀度－给药组平均肿胀度）/对照组平均肿胀度×100%。结果见表7-9。

表7 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对二甲苯致小鼠耳肿的影响（低剂量组，±s，n=10）

表7 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对二甲苯致小鼠耳肿的影响（低剂量组，±s，n=10）

注：与生理盐水组比较，**P<0.01；与延胡索组比较，△△P<0.01；与川楝子组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；与延胡索+川楝子组比较，▽▽P<0.01。

组别 剂量（g/kg） 耳肿胀度（mg） 扭体抑制率（%）空白对照组 - 16.70±3.25 -阿司匹林组 0.1 3.52±1.80** 79.01延胡索组 10.0 13.81±0.90** 17.65醋延胡索组 10.0 11.22±1.09**△△ 33.09川楝子组 10.0 14.24±1.16** 15.09炒川楝子组 10.0 13.00±1.34**▲ 22.48延+川 10.0 12.91±1.55**▲ 23.02醋延+川 10.0 10.78±6.83** 35.72醋延+炒川 10.0 9.99±2.22**△△▲▲▽▽ 40.43延+炒川 10.0 12.52±0.96**△△▲▲ 25.34

表8 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对二甲苯致小鼠耳肿的影响（中剂量组，±s，n=10）

表8 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对二甲苯致小鼠耳肿的影响（中剂量组，±s，n=10）

注：与生理盐水组比较，**P<0.01；与延胡索组比较，△P<0.05;与川楝子组比较，▲P<0.05。

组别 剂量（g/kg） 耳肿胀度（mg） 扭体抑制率（%）空白对照组 - 16.70±3.25 -阿司匹林组 0.1 3.52±1.80** 79.01延胡索组 20.0 10.57±3.96** 36.97醋延胡索组 20.0 8.11±2.54** 51.64川楝子组 20.0 10.76±5.69** 35.84炒川楝子组 20.0 8.25±3.28** 50.81延+川 20.0 8.23±3.55** 50.92醋延+川 20.0 7.05±3.69** 57.96醋延+炒川 20.0 6.38±3.14**△▲ 61.96延+炒川 20.0 7.83±2.81** 53.31

3 讨论

实验结果表明单味延胡索、单味川楝子均具有较强的镇痛抗炎效果，与文献记载的延胡索具有活血、理气、止痛之功效，川楝子具有疏肝泻热、行气止痛之功效相符。实验结果也表明金铃子散药效明显优于单味药的镇痛抗炎效果，说明金铃子散中延胡索和川楝子在镇痛抗炎方面具有协同作用。有研究表明，川楝子中某些化学成分对延胡索中生物碱的溶出率可能具有一定的促进作用，延胡索与川楝子中的一些化学成分所发生的化学反应对延胡索中所含生物碱的成分有一定的影响[1-2]，大量的临床检验及观察发现，金铃子散在理气止痛方面的药效较单味药显著，这可能就是由于上述因素造成的，这在中医方剂配伍理论中解释为协同增效作用，其原理有待于进一步的药理实验研究。

表9 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对二甲苯致小鼠耳肿的影响（高剂量组，±s，n=10）

表9 延胡索和川楝子不同炮制品不同配伍对二甲苯致小鼠耳肿的影响（高剂量组，±s，n=10）

注：与生理盐水组比较，**P<0.01；与延胡索组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与川楝子组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；与延+川组比较，▽▽P<0.01。

组别 剂量（g/kg） 耳肿胀度（mg） 扭体抑制率（%）空白对照组 - 16.70±3.25 -阿司匹林组 0.1 3.52±1.80** 79.01延胡索组 40.0 8.51±0.60** 49.25醋延胡索组 40.0 6.90±1.71**△ 58.86川楝子组 40.0 9.75±3.00** 41.86炒川楝子组 40.0 7.67±3.06** 54.26延+川 40.0 7.46±1.93** 55.52醋延+川 40.0 6.52±2.51**△▲ 61.12醋延+炒川 40.0 4.78±1.94**△△▲▲▽▽ 71.50延+炒川 40.0 6.85±1.52**△△▲ 59.15

[1]刘生肸，刘喜平，董钰明.延胡索与川楝子配伍中总生物碱含量的研究[J].中医儿科杂志，2006，2（5）：42－44.

[2]窦志英，李迎春，郑蓓蓓.醋烘制川楝子炮制工艺的探讨[J].天津中医药，2011，28（4）：338-340.