大鼠烫伤模型制备的实验研究*

2011-03-17王雪妮张德芹黄云英王元元

天津中医药大学学报 2011年4期

王雪妮，张德芹，黄云英，王元元，沈丽，杜娟

实验采用YLS-5Q台式超级控温烫伤仪进行大鼠烫伤模型的制备，考察烫伤温度、时间、压力等因素对烫伤程度的影响，并进行烫伤皮肤病理学检查，成功地制备了大鼠体表深Ⅱ度烫伤、浅Ⅱ度烫伤、Ⅰ度烫伤模型。所建立的模型制备方法操作简单，温度、压力、时间准确可控，烫伤面积恒定，可重复性强[1]。

1 材料和方法

1.1 动物 Wistar大鼠，雄性，体质量（200±10）g，由天津市山川红实验动物科技有限公司提供，饲养于清洁级动物实验室内，室温（24±2）℃，相对湿度（50%±10%）。

1.2 试剂水合氯醛；甲醛；70%乙醇；80%乙醇；95%乙醇；无水乙醇；二甲苯；石蜡；1%盐酸乙醇；氨水；苏木-伊红（HE）染色剂。

1.3 仪器 YLS-5Q台式超级控温烫伤仪，济南益延科技发展有限公司；WH-71电热恒温干燥箱，天津市泰斯特仪器有限公司；BMJ-1生物组织包埋机，天津天利航空机电有限公司；LEICA RM 2135切片机，德国徕卡公司；电热恒温水箱，天津市中环实验电炉有限公司；DMI3000B倒置荧光显微镜，德国徕卡公司。

1.4 大鼠烫伤模型的制备根据Rubner公式计算大鼠体表面积[2]：S（m2）≈0.1×体质量（kg）2/3，根据实验条件，拟烫伤6%体表面积，大鼠体质量按200g计算，则烫伤面积（m2）=0.1×（200/1 000）2/3×6%≈0.002 0 m2=20（cm2）。取雄性 Wistar大鼠 32 只，将大鼠按体质量根据随机数字表法分为4组，每组8只，分别为正常对照组、模型1组、模型2组、模型3组。造模组剃除大鼠背毛，面积约为25 cm2以3.5%水合氯醛（10 mL/kg）腹腔注射麻醉。麻醉后用YLS-5Q台式超级控温烫伤仪配套的5 cm2的烫头进行烫伤，制作4个相同的创面，控制烫伤面积为20 cm2。正常对照组不麻醉不进行烫伤；模型1组烫伤条件：温度90℃，时间15秒，压力1 000g；模型2组烫伤条件：温度80℃，时间15秒，压力1 000g；模型3组烫伤条件：温度80℃，时间10秒，压力500g。分别于烫伤后6、24、48、72 h观察各组大鼠创面外观情况。

1.5 病理学检查取正常对照组及模型组大鼠背部皮肤标本，常规固定，石蜡切片，HE染色，观察皮肤组织学变化。

2 结果

2.1 一般情况模型1组（温度90℃，时间15秒，压力1 000g）：烫伤后创面皮肤立即变白，出现明显的皱褶，轻度肿胀，皮下可见有小红出血点散在，烫伤区域边界清晰，肉眼可明显区分烫伤创面与正常皮肤；烫伤后6 h创面比正常皮肤质硬，颜色加深呈浅黄绿色，小出血点面积扩大，颜色加深显紫红色；烫伤后24 h创面质变硬颜色略有加深，出血点颜色也略有加深；烫伤后48 h创面颜色加深，出血点处皮肤凹陷结痂；烫伤后72 h创面颜色加深，局部出现结痂。

模型2组（温度80℃，时间15秒，压力1000g）：烫伤后数分钟创面皮肤变白，有少量皱褶，轻度肿胀，烫伤区域边界清晰，肉眼可明显区分烫伤创面与正常皮肤。烫伤后6 h创面比正常皮肤质硬，颜色加深呈浅黄绿色；烫伤后24 h创面质变硬颜色加深呈黄色，局部可见紫红色血瘀斑；烫伤后48 h创面颜色加深，局部的紫红色血瘀斑颜色加深；烫伤后72 h创面颜色加深，局部出现结痂。

模型3组（温度80℃，时间10秒，压力500g）：烫伤数分钟后创面皮肤发白，有较少皱褶，稍微肿胀，烫伤区域边界清晰，肉眼可区分烫伤创面与正常皮肤。烫伤后6 h创面比正常皮肤颜色稍深，但边界不明显；烫伤后24 h创面颜色加深呈浅黄色，边界不明显，局部可见紫红色血瘀斑；烫伤后48 h创面颜色加深，局部的紫红色血瘀斑颜色加深；烫伤后72 h创面颜色稍微加深，局部的紫红色血瘀斑颜色也略有加深。

2.2 病理检查模型1组（温度90℃，时间15秒，压力1 000g）：烫伤后可见表皮下有水疱生成，表皮层细胞及毛囊上皮细胞核固缩，真皮组织深部受损，胶原纤维肿胀、融合，大量皮下脂肪细胞融合，真皮全层可见血管扩张充血，大部分皮脂腺、汗腺、毛囊被破坏，结构不清。病变符合深Ⅱ度烫伤创面特征[3]。

模型2组（温度80℃，时间15秒，压力1000g）：烫伤后可见真皮组织深部受损，胶原纤维离散、肿胀，部分皮下脂肪细胞融合，同时可见血管扩张充血，皮脂腺、汗腺腺上皮细胞及毛囊上皮细胞结构尚清楚，部分肿胀、溶解。病变符合浅Ⅱ度烫伤创面特征[3]。

模型3组（温度80℃，时间10秒，压力500g）：烫伤后可见表浅浅层、基底层健存，真皮浅层充血、水肿。病变符合Ⅰ度烫伤创面特征[3]。