尿液错误折叠蛋白检测与子痫前期及小于胎龄儿发生的关系研究

许艳　卞桂萍

【摘要】 目的 探讨尿液错误折叠蛋白检测与子痫前期及小于胎龄儿发生的关系。方法 回顾性分析2021年6月—2022年8月在靖江市人民医院产检的600名正常产检孕妇的临床资料，按尿液采集时间分为妊娠中期（孕13～27周）、妊娠晚期（孕28～37周）。对比不同孕期子痫前期发生情况，对比子痫前期者与正常妊娠者不同孕周尿液错误折叠蛋白定量差异，记录尿液错误折叠蛋白阳性检出率，并对比尿液错误折叠蛋白阳性者与阴性者小于胎龄儿发生情况，分析小于胎龄儿发生相关影响因素。结果 600名孕妇中出现子痫前期42例（7.00%），其中妊娠中期出现18例（3.00%），妊娠晚期出现24例（4.00%）。妊娠中期与妊娠晚期早发型子痫前期者尿液错误折叠蛋白定量均高于正常妊娠者，差异有统计学意义（P＜0.05）。600名孕妇中共检出尿液错误折叠蛋白阳性48例，阴性552例。阳性组中小于胎龄儿发生率为45.83%（22/48），高于阴性组的21.74%（120/552），差异有统计学意义（P＜0.05）。经多因素分析显示，羊水过少、吸烟或被动吸烟、尿液错误折叠蛋白阳性是小于胎龄儿发生的独立危险因素（P＜0.05）。结论 子痫前期发生率随着尿液错误折叠蛋白水平增加相应升高，小于胎龄儿发生可能性明显增高。可将尿液错误折叠蛋白水平作为预测小于胎龄儿与子痫前期的生物学标志物。

【关键词】 子痫前期；尿液错误折叠蛋白检测；小于胎龄儿

文章编号：1672-1721（2024）02-0123-03     文献标志码：A     中国图书分类号：R722.1

子痫前期发病机制与病因尚不明确，可能与胎盘因素、血管内皮细胞损伤、氧化因子、全身炎症反应等因素有关。该病可累及全身多系统，特别是肾脏，导致患者发生蛋白尿、血压升高，随着病情加重可导致患者昏迷或抽搐发作[1-2]。目前，对于子痫前期尚无有效治疗手段，适时终止妊娠是最有效的处理手段，但引起医源性早产的风险非常高。子痫前期发病原因非常复杂，具有发病通路多样化、发病机制特异性等特点，导致预测与诊断难度比较大。24 h尿蛋白定量检测是检测子痫前期与判断病情严重程度的重要方式之一，但存在干扰因素多、患者依从性差、收集过程复杂等不足，影响临床诊断结果[3]。蛋白质的线性氨基酸多聚体转变为三维立体结构后才能发挥相应功能，一旦其线性结构发生错误折叠，并异常聚集则会引起相应疾病[4]。基于此，本研究回顾性分析2021年6月—2022年8月在靖江市人民医院行产检的600名正常产检孕妇临床资料，分析尿液错误折叠蛋白检测与子痫前期及小于胎龄儿发生的关系，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2021年6月—2022年8月在靖江市人民医院行产检的600名正常产检孕妇的临床资料，按尿液采集时间分为妊娠中期（孕13～27周）、妊娠晚期（孕28～37周）。

纳入标准：符合《妊娠期高血压疾病血压管理专家共识（2019）》[5]内子痫前期相关诊断标准；无沟通障碍，意识清晰；知晓研究目的，自愿签订知情同意书；接受错误折叠蛋白检测。

排除标准：肝肾等重要脏器严重病变；精神疾患；合并消化系统、血液系统等疾病；多胎妊娠；临床资料不全；合并可能造成尿蛋白异常疾病，比如肾病综合征、急慢性肾炎等。

1.2 方法

采集孕妇清洁中段尿液测定尿液错误折叠蛋白水平，以斑点印迹法进行检测，采用固定量固定浓度的刚果红染色剂，在样本内加入定量尿液样，充分混合，将定量混合液滴于滤纸上，待自然干燥后用浙江数问生物技术有限公司提供试剂盒半定量测定尿中错构蛋白。以刚果红和亮蓝混合染色，滤纸上蓝圈、红圈半径比作为半定量辅助判断尿错构蛋白方法，当半径比≥0.615时，表示尿错构蛋白定性结果为阳性。

1.3 观察指标

（1）对比不同孕期子痫前期发生情况。（2）对比子痫前期者与正常妊娠者不同孕周尿液错误折叠蛋白定量差异。（3）记录尿液错误折叠蛋白阳性检出率，并对比尿液错误折叠蛋白阳性者与阴性者小于胎龄儿发生情况。小于胎龄儿判断标准[6]：与同胎龄新生儿相比，出生体质量小于第10百分位数。（4）收集患者资料，包括年龄、产次、流产史、羊水过少、饮酒史、吸烟或被动吸烟、孕期糖尿病、孕期贫血、服用铁剂等，分析小于胎龄儿发生相关影响因素。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件分析数据，计量资料以x±s表示，采用t检验，计数资料以百分比表示，采用χ2检验，多因素使用Logistic回归分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同孕期子痫前期发生情况

600名孕妇中出现子痫前期42例（7.00%），其中妊娠中期出现18例（3.00%），妊娠晚期出现24例（4.00%）。

2.2 对比子痫前期者与正常妊娠者不同孕周尿液错误折叠蛋白定量差异

妊娠中期与妊娠晚期子痫前期者尿液错误折叠蛋白定量均高于正常妊娠者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.3 尿液错误折叠蛋白阳性与阴性患者小于胎龄儿发生率对比

600名孕妇中共检出尿液错误折叠蛋白阳性48例，阴性552例。阳性组中小于胎龄儿发生率为45.83%（22/48），高于阴性组的21.74%（120/552），差异有统计学意义（χ2=14.191，P＜0.001）。

2.4 小于胎龄儿发生相关影响因素

2.4.1 单因素分析

羊水过少、吸烟或被动吸烟与小于胎龄儿发生有关，差异有统计学意义（P＜0.05）；年龄、产次、流产史、饮酒史、孕期糖尿病、孕期贫血、服用铁剂与其发生无关，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

2.4.2 多因素分析

以是否发生小于胎龄儿为因变量（未发生=0；发生=1），以单因素中差异有统计学意义的项目作为自变量[羊水过少（否=0；是=1）、吸烟或被动吸烟（否=0；是=1）、尿液错误折叠蛋白检测结果（阴性=0；阳性=1）]，经多因素分析显示，羊水过少、吸烟或被动吸烟、尿液错误折叠蛋白阳性是小于胎龄儿发生的独立危险因素（P＜0.05），见表3。

3  讨论

子痫前期属于妊娠期特有的综合征，主要临床特征为蛋白尿、高血压与水肿，病情严重时可引起HELLP综合征、器官功能障碍，可增加患者患代谢性疾病、心血管疾病的可能性，还可引起胎儿生长受限、早产、死亡、胎儿宫内窘迫等围生期不良结局，严重威胁母婴健康[7]。子痫前期具有典型的胎盘病理基础，有并发症多、进展快等特点，发病越早，病情演变越重、越快，可累及患者多脏器，致使孕妇脏器功能受损，常合并胎儿生长受限，是围生儿和孕产妇发生不良结局的重要因素[8]。尿蛋白检测，尤其是24 h尿蛋白定量是评估子痫前期发生及病情严重程度的重要指标之一，但样本采集与保存过程中会受到多种因素影响[9-10]，故需要寻找一种无创、简便且快捷的诊断手段。

因子痫前期发生原因十分复杂，可根据致病机制分为2种类型，即母源性子痫前期、胎盘源性子痫前期，而在子痫前期中胎盘源性子痫前期起到更重要的致病机制。在人体细胞中，线性氨基酸多聚体主要通过转变为三维立体结构功能蛋白发挥作用。蛋白质错误折叠于细胞内外基质积聚可诱发特定异常折叠蛋白，引起神经细胞死亡，诱发帕金森等疾病[11]。妊娠子宫胎盘血管系统的重铸障碍，可引起胎盘血流灌注不足、血管生成失衡、氧化应激、缺血缺氧、内皮功能障碍、炎症以及内质网应激，这些均参与了子痫前期的致病机制。而内质网在蛋白质转运、合成、折叠、降解中起到关键作用，当蛋白质合成受到影响时，就会改变内质网稳态，使得蛋白质错误折叠或者不折叠，在内质网管腔中积聚，从而引起病变[12]。子痫前期孕妇尿液中可检测到错误折叠蛋白，且尿液错误折叠蛋白的检出情况要早于子痫前期症状，对预测子痫前期有着十分积极的作用。本研究中，600名孕妇中出现子痫前期42例（7.00%），其中妊娠中期出现18例（3.00%），妊娠晚期出现24例（4.00%）；妊娠中期与妊娠后期早发型子痫前期者尿液错误折叠蛋白定量均高于正常妊娠者，提示子痫前期发生率随着孕周增长而逐渐增高，其尿液错误折叠蛋白水平随着孕周增长相应增高。分娩小于胎龄儿是子痫前期孕妇产检的不良妊娠结局之一，是孕妇肾小球毛细血管内皮细胞弥漫性肿胀，减少肾血流量，增加血管壁通透性，而出现大量蛋白尿，减低胎盘血流灌注，影响胎儿生长受限所致。小于胎龄儿会增加坏死性结肠炎、呼吸窘迫综合征等并发症发生可能性，也是造成新生儿死亡的重要因素之一。因此，预防小于胎龄儿发生对提高出生人口质量意义重大。本研究中，阳性组小于胎龄儿发生率均高于阴性组，且尿液错误折叠蛋白阳性是小于胎龄儿发生的独立危险因素，提示尿液错误折叠蛋白检测阳性与小于胎龄儿发生密切相关。子痫前期发病时，子宫螺旋动脉重铸障碍可造成“胎盘浅着床”，减少胎盘灌注量，使胎盘发生缺血、缺氧性改变，与炎症反应、氧化应激等因素共同作用，导致患者出现内质网应激，子宫螺旋动脉重铸障碍加重，加剧胎盘灌注减少，相应增加内质网应激引起的错误折叠蛋白，若未及时降解或自噬，会加剧内质网应激改变，可间接或直接影响胎儿生长发育与胎盘功能，增加小于胎龄儿与早发型子痫前期发生率。在胎盘滋养细胞中聚集的错误折叠蛋白可对滋养细胞的正常侵袭形成阻碍作用，引起内质网应激反应，造成胎盘缺血缺氧，轻则可增加蛋白质错误折叠频率，引起蛋白质淀粉样变与自发聚集，重则可引起氧化应激、释放炎症因子、螺旋动脉重铸不足、内质网应激等，蛋白质会发生淀粉样聚集，进一步加剧胎盘缺血，增大胎儿循环阻力，一定程度上会影响胎儿生长发育，降低新生儿体质量，增加小于胎龄儿发生可能性。

本研究中，羊水过少、吸烟或被动吸烟是小于胎龄儿发生的独立危险因素。羊水过少会增加小于胎龄儿发生风险，可能是与羊水过少可致胎盘灌注不足，造成胎盘缺血缺氧有关；吸烟产生的烟雾可分为测流与主流，测流烟雾中含有的一氧化碳、焦油与尼古丁成分明显高于主流烟雾，孕妇吸入后会进入血液循环，刺激神经末梢大量释放儿茶酚胺，导致子宫缺血、缺氧，对胎儿生长造成不良影响，增加小于胎龄儿发生概率。

综上，子痫前期发生率随着尿液错误折叠蛋白水平定量的增加而升高，小于胎龄儿发生可能性明显增高，可将此作为预测小于胎龄儿与子痫前期的生物学标志物。

参考文献

[1] 王娜，张小环，陈丽珍，等.血清低氧诱导因子-1α、胎盘生长因子及妊娠相关血浆蛋白A检测对子痫前期的预测价值[J].中国临床医生杂志，2021，49（1）：108-111.

[2] CERDEIRA A S，RANA S，KARUMANCHI S A.Is prolonging gestation in preeclampsia for better or worse in preventing cardiovascular disease？[J].Hypertension，2021，78（5）：1395-1397.

[3] 庄旭，冯蜀欢，陈漪，等.子痫前期蛋白尿孕妇尿微量白蛋白、转铁蛋白及α1-微球蛋白妊娠期界值的研究[J].中华妇产科杂志，2021，56（10）：665-670.

[4] LEAL-LASARTE M，MANNINI B，CHITI F.Distinct responses of human peripheral blood cells to different misfolded protein oligomers[J].Immunology，2021，164（2）：358-371.

[5] 中华医学会心血管病学分会女性心脏健康学组，中华医学会心血管病学分会高血压学组.妊娠期高血压疾病血压管理专家共识（2019）[J].中华心血管病杂志，2020，48（3）：195-204.

[6] 朱丽，张蓉，张淑莲，等.中国不同胎龄新生儿出生体重曲线研制[J].中华儿科杂志，2015，53（2）：97-103.

[7] ZHANG Y，LIANG B，MENG F，et al.Effects of Nrf-2 expression in trophoblast cells and vascular endothelial cells in preeclampsia[J].Am J Transl Res，2021，13（3）：1006-1021.

[8] 张优扬.早发型重度子痫前期患者血浆Ghrelin和SP1表达与胎儿生长受限的关系及二者联合检测对早发型重度子痫前期的诊断价值[J].中国妇幼保健，2021，36（5）：1014-1017.

[9] 陈艳，杨柳，张云珠，等.血清IFIP-16、tTG水平与子痫前期孕妇血压和尿蛋白的关系及其诊断价值[J].海南医学，2020，31（5）：593-596.

[10] 蔡江美.24 h尿蛋白定量对子痫前期孕妇发生不良妊娠结局的临床价值研究[J].中国妇幼保健，2019，34（15）：3460-3462.

[11] NAGARAJAPPA C，RANGAPPA S S，SURYANARAYANA R，et al.Urinary protein carbonyl levels and its correlation with protein misfolding in preeclampsia[J].Hypertens Pregnancy，2019，38（2）：124-128.

[12] YADAV K，YADAV A，VASHISTHA P，et al.Protein misfolding diseases and therapeutic approaches[J].Curr Protein Pept Sci，2019，20（12）：1226-1245.

（编辑：张兴亚）

作者简介：许 艳，女，硕士，主治医师。

通信作者：卞桂萍