奥硝唑-甘草泻心汤的CS/SA口腔双层溃疡膜的初步研究

2023-11-25马海绒杨嫣云鲁奕男

北方药学 2023年9期

马海绒,杨嫣云,鲁奕男,李颖,武鹏,牛闯

(宁夏医科大学口腔医学院,宁夏银川 750004)

复发性口疮性口炎(RAS)是一种最常见的口腔溃疡性疾病,发病率为5%～20%[1]。RAS病因至今未明,因而阻碍了对该疾病的有效治疗[1]。RAS慢性、可复发性的特点导致在临床治疗时,局部用药的效果优于全身用药,因此目前临床上治疗RAS以散剂、喷剂、凝胶剂、膜剂等局部药物为主,其中口腔膜可将药物直接作用于溃疡面而且可以延长了药物的作用时间[2],相比较而言膜剂材料更容易受到患者青睐[3]。因此,对膜剂的制作和临床应用至关重要的环节是找到一种具有良好生物相容性、足够黏附力及合理经济成本的材料[4]。

壳聚糖(Chitosan,CS)是一种具有生物降解性和生物相容性的多糖,可以作为RAU治疗药物的缓释载体,有减少疼痛、促进愈合的效果[4]。海藻酸钠(Sodium alginate,SA)具有价格低廉,良好的生物相容,对环境无害,一定的抑菌作用等特点[5]。单独西医治疗主要以缩短病程,缓解症状,减轻病人的痛苦为主[6]。如长期是使用复发性口腔溃疡常用药物如糖皮质激素、非甾体类抗炎药等,很容易产生毒性反应,并可能诱发或加剧溃疡局部感染[6]。而在防止复发和控制并发症、较小副作用方面中药材料具有优势[6],因而被广泛用于口腔溃疡的治疗[5]。医圣张仲景在《金匮要略·百合狐惑阴阳毒病脉证治》及赵以德《金匮玉函经二注》提出,甘草泻心汤可治RAS,目前也已有中医学者采用甘草泻心汤为主方在临床上治疗复发性阿弗他溃疡,并取得较为满意效果[7]。现代药理研究表明甘草泻心汤具有增强机体免疫机能、镇痛、抗炎和抗口腔溃疡等药理作用,同时发现甘草泻心汤可以有利于改善患者的临床不良症状,并且降低患者溃疡的复发率[8-9]。奥硝唑抑制杀灭绝大多数的厌氧菌,在抗厌氧菌的同时有着较小的毒副作用,而且可有效消除口腔内部细菌造成的溃疡创伤炎症反应,为溃疡的愈合创造有利环境[10]。本研究以SA和CS为主要成分,在其中加入适量的奥硝唑和甘草泻心汤,探究双层膜的制备方法,对制备奥硝唑-甘草泻心汤的CS/SA口腔双层溃疡膜进行体外评价,筛选奥硝唑-甘草泻心汤的CS/SA口腔双层溃疡膜制备最佳配比。

1 材料与方法

1.1 实验试剂与仪器

壳聚糖、海藻酸钠、奥硝唑(上海阿拉丁生化科技股份有限公司),冰乙酸(天津市博华通化工产品销售中心),甘草泻心汤购于宁夏银川市古方中医药店。

培养板(比克曼生物,中国)、恒温干燥箱(赛默飞,美国),生物安全柜(赛默飞,美国),磁力搅拌器(Joanlab,中国)。

1.2 方法

1.2.1 膜的制备

单层膜制备:(1)取1mg的CS,加入100mL,浓度为0.5%的冰乙酸水溶液中,磁力搅拌3h,使壳聚糖完全溶解,静置脱泡后,倒入模具,37℃恒温干燥,得单层壳聚糖膜。(2)取适量SA,加入90mL纯水,磁力搅拌5h使壳聚糖完全溶解,加入10mL甘草泻心汤和奥硝唑混合液,磁力搅拌1h,静置脱泡后,37℃恒温干燥,得单层壳聚糖药膜。

双层药膜制备:取1mg的壳聚糖,加入100mL,浓度为0.5%的冰乙酸水溶液中,磁力搅拌使壳聚糖完全溶解,脱泡后,倒入模具中,37℃恒温干燥4h成型后,将制备好的海藻酸钠单层药膜液倒入模具中,干燥、脱膜,得双层药物膜。

双层膜优化:载药层膜剂基质比例优化,选择奥硝唑和海藻酸钠作为正交因素进行试验,含奥硝唑含量分别为0.05%、0.1%、0.15%、0.2%,及海藻酸钠分别为0.1%、0.2%时所制膜的性能差异,选择最优配比。

1.2.2 膜的体外检测

1.2.2.1 外观性状测定

以双层贴膜的成膜性、易剥程度、柔韧性、脆性等作为评价指标。以10分制打分,打分越高,膜外观越好,其中药物与基质分离打0分。扫描电镜下观察膜的形态。

1.2.2.2 溶解性

将100 mL蒸馏水放入烧杯中,37℃水浴恒温加热,用玻璃棒搅拌,搅拌速度为30 r/min,将载药层膜(1 cm×1 cm)放入水浴中并开始计时,记录膜剂溶解的时间。膜溶解时间越长,其停留在口腔的时间越长,效果越好。

1.2.2.3 成膜性

主要用揭膜完整性来评价。用手揭双层膜的最大面积的膜重量与总膜重的百分比来表示,比值越大越好。

2 结果

2.1 不同甘油含量1%壳聚糖单层基底膜成膜性能比较

实验发现,在壳聚糖(CS)中不加甘油,成膜后极易破碎,因此将甘油作为一个因素进行实验,表1结果显示含0.1%甘油的CS基底膜更符合实验所需。

表1 不同甘油含量1%壳聚糖单层基底膜成膜性能比较

2.2 不同含量奥硝唑-甘草泻心汤-海藻酸钠药膜成膜性能比较

海藻酸钠含量为2%,奥硝唑含量为0.1%时,药膜的成膜性最佳。详见表2。实验中将添加了0.1%甘油的1%(mg/mL)壳聚糖作为基底膜,0.1%奥硝唑-甘草泻心汤-2%SA制备药膜,将基底膜与药膜结合,制备双层膜。对制备好的双层药膜,进行外观性能、溶解性、成膜性检测,结果详见图1。单纯SA膜为白色透明状,加入奥硝唑后SA单层膜为白色,奥硝唑-甘草泻心汤-CS/SA双层膜为浅黄色,能够看到双层形态,奥硝唑分布均匀,未见明显的粉末状沉积。图2结果显示,壳聚糖和海藻酸钠可以较好的融合,双层膜不会自动分离。说明溶剂浇铸法可以作为制备双层载药口腔膜剂的方法。见图2。

图1 奥硝唑-甘草泻心汤-CS/SA膜实物图

图2 奥硝唑-甘草泻心汤-CS/SA双层膜横切电镜图

表2 不同含量奥硝唑-甘草泻心汤-海藻酸钠药膜成膜性能比较

2.3 奥硝唑-甘草泻心汤-CS/SA双层膜与市面常见溃疡材料性能对比

与市面上常售的几种治疗口腔溃疡材料相比,本实验制备的CS/SA口腔双层溃疡膜颜色为浅黄色更容易被接受,柔韧性好,薄厚适宜,溶解性一般,能较长时间维持形态,有利于药物释放,利于溃疡愈合,但黏性一般,如过敏还可及时取出。详见表3。

表3 奥硝唑-甘草泻心汤-CS/SA双层膜与市面常见溃疡材料性能对比

3 讨论

目前市面上常见的口腔溃疡膜药物主要成分有西药或者中药,西药主要以抗菌和局麻药为主如醋酸地塞米松、利多卡因;中药多见蜂胶,暂未见到西药和中药混合制备的双层溃疡药膜。

本实验利用溶剂浇铸法将添加了0.01%甘油的1%(mg/mL)壳聚糖作为基底膜,0.1%奥硝唑-甘草泻心汤-2%SA制备药膜,将基底膜与药膜结合,成功制备制备处双层口腔溃疡膜。

SA为白色或淡黄色粉末,溶于水会形成黏稠状的溶液,这是因SA含有大量的极性基团,所以其易溶于水,不溶于有机溶剂,因此具有很强的亲水性[11]。同时SA的溶液浓度及聚合度的增大又会增加溶液的黏度[11]。甘草泻心汤的处方中含有甘草、大枣等含糖药材,因此当奥硝唑含量过高时,成膜后更容易粘贴在模具上,不能较好保持完整的药膜形态,所以选择0.01%奥硝唑作为最适药量。扫描电镜照片提示壳聚糖和海藻酸钠可以较好的融合,双层膜不会自动分离,这可能与壳聚糖带正电荷而海藻酸钠带负电荷有关。

实验制备的口腔溃疡膜含有奥硝唑和甘草泻心汤两种药物,奥硝唑在抗菌消炎、促进溃疡伤口愈合方面效果显著,但单一奥硝唑口腔粘贴片无法有效预防RAS复发,而甘草泻心汤具有益气和胃的功效,适用于口腔溃疡脾胃虚弱证,因此两药联合可增强治疗效果[8-10]。制备的双层溃疡膜能以直接贴附持效的方式给药,保证药物在溃疡表面最大程度释药,而良好的溶解性又可延长给药时间进而增强药物疗效。