GC-MS分析成都产泽泻挥发油化学成分
2022-06-09王雅琴吴伟铭丘志龙朱文雅张毅彬张伟云
王雅琴,吴伟铭,丘志龙,朱文雅,张毅彬,张伟云*
(1.厦门医学院 药学系/厦门市中药生物工程重点实验室,福建 厦门 361023;2.福建中医药大学,福建 福州 350122)
泽泻为泽泻科植物东方泽泻Alismaorientale(Sam.) Juzep.或泽泻Alismaplantago-aquaticaLinn.的干燥块茎。泽泻因其特殊的利水渗湿、泄热、化浊降脂等疗效[1],常被医者广泛使用。泽泻主要有促进尿液排泄[2]、降血糖血脂[3,4]、抑制肾结石的形成[5]等功效。泽泻中所含的化学成分,除了三萜、二萜以及倍半萜以外,还有含氮化合物、苯丙素、糖类、甾体、黄酮、酚酸、脂肪烃及其衍生物等[1]。
泽泻挥发油中,倍半萜类化合物占据了很大部分,这类化合物不仅仅出现于挥发油中的高沸点部分,还多具有芳香气味。研究发现,目前已从泽泻中分离出了52个倍半萜[6],主要分为三类:桉叶烷型、吉玛烷型和愈创木烷型(占据多数)[7-8]。另外还包括少量刺参烷型、苍耳烷型和其他类型的倍半萜[9]。因此,本实验利用水蒸气蒸馏法提取成都产泽泻挥发油,运用气质联用仪进行成分分析,并与不同产地泽泻的挥发油化学成分进行比较,研究不同产地泽泻的开发利用可能性,为不同产地泽泻的临床治疗及相关物质基础研究提供参考。
1 材料及方法1.1 材料与仪器
气质联用仪(型号:7890B/7000,美国安捷伦科技有限公司生产)。泽泻产于四川成都[购自北京本草方源(亳州)药业科技有限公司,生产许可证号为皖20160125,药材批号为190801,执行标准为2015版《中华人民共和国药典》],经厦门大学药学院陈全成副教授鉴定为泽泻Alismaplantago-aquaticaLinn.的干燥块茎。蒸馏水、正己烷与甲醇均为色谱级。
1.2 水蒸气蒸馏法
采用粉碎机将成都产泽泻粉碎,过10目筛,分别两次称取100.00 g成都产泽泻(已粉碎过筛)放置于两个2 000 mL圆底烧瓶中,分别加入800 mL蒸馏水,将圆底烧瓶放于电热套上,连接挥发油提取器,从测定管上端加水至“0”的刻度线,连续提取6 h。用吸管将挥发油移至1.5 mL试管中,因为该试管中含有少量蒸馏水,故需要加入少量无水硫酸钠进行脱水。吸取少量深绿色的挥发油置于未使用且干净的EP管中,加入适量正己烷与甲醇溶解深绿色的泽泻挥发油,用微孔滤膜(0.45 μm)过滤至2 mL的样品瓶,作为成都产泽泻挥发油GC-MS分析用的样品。
1.3 气相色谱-质谱法
实验条件详见表1。
表1 气相色谱-质谱法解析化合物条件
2 实验结果
2.1 水蒸气蒸馏法提取所得的化合物
采用水蒸气蒸馏法且参照实验设定的条件提取成都产泽泻挥发油进行GC-MS解析,水蒸气蒸馏法提取成都产泽泻挥发油的GC-MS总离子流见图1。
图1 水蒸气蒸馏法提取成都产泽泻挥发油的GC-MS总离子流
在NIST MS谱库进行检索,采用Agilent MassHunter Qualitative Analysis B.06.00 分析软件对谱图进行分析,发现共有85个色谱峰,有66个化合物,具体化合物见表2。
表2 水蒸气蒸馏法提取成都产泽泻挥发油的化学成分
续表2
其中水蒸气蒸馏法提取成都产泽泻的挥发油,经过AgtQual分析软件中的面积归一化法计算得出,有10个化合物相对含量较大,将这些化合物相对含量从大到小进行排列,详见表3。
表3 成都产泽泻采用水蒸气蒸馏法所得挥发油中相对含量大的化合物
2.2 成都产泽泻与其他产地泽泻挥发油相同的化合物
实验提取成都产泽泻所得的化合物与其他产地泽泻的化合物有少部分相同,具体详见表4、表5。
3 讨论
经过对参考文献[10-13]的解读与分析,发现不同产地泽泻挥发油有部分化合物相同,主要选取福建省、四川省以及江西省所产泽泻的挥发油进行成分研究解析,将这几个产地泽泻挥发油进行比对,发现共有21个化合物重复出现(出现在以上四个产地≥2次),具体为δ-榄香烯、β-榄香烯、α-榄香烯、1,7,7 三甲基-2-乙烯基双环[2.2.1]庚-2-烯、异长叶烯、斯巴醇、γ-古芸烯、2-戊基呋喃、3,5 辛二烯-2-酮、蛇麻烯、γ-木罗烯、2-蒈烯、氧化石竹烯、香树烯、雅槛蓝烯、紫罗烯、十六烷酸乙酯、棕榈酸、3,5-辛二烯-2-酮、巴伦西亚烯、(+)-喇叭烯。
实验研究对象为成都产泽泻,经过水蒸气蒸馏法提取的挥发油与上文提及的4个产地泽泻挥发油相同的化合物占据提取分析出总化合物中的很小部分,详见表5,可以初步说明,成都产泽泻与其他产地泽泻中挥发油成分有明显不同。
表4 成都产泽泻与其他产地(不同提取方法)泽泻挥发油相同的化合物数量
表5 成都产泽泻与其他产地(不同提取方法)泽泻挥发油具体相同化合物
虽然未对泽泻的挥发油进行定量测定,但在水蒸气蒸馏法提取成都产泽泻挥发油过程中发现,泽泻药材本身含油量较少,最先提取出的挥发油呈淡黄色的透明油状,经过一段时间的提取,挥发油逐渐变为深绿色。经过后期的讨论,猜测泽泻挥发油可能是氧化的缘故,才转变了颜色。这也为今后研究泽泻挥发油的药理作用提供了参考。
通过提取成都产泽泻挥发油成分来进一步完善不同产地泽泻挥发油的化合物研究。同时,经过将不同产地泽泻进行比较,说明泽泻具有一定的地域特点,选取质量优良的泽泻,发现新的化合物和新的疗效,为后续研究泽泻挥发油活性以及开发利用泽泻提供思路。