中药复方及单体成分对鼻咽癌放射增敏研究进展

曾凡艳，黄增琼，朱小东

(1.广西医科大学附属肿瘤医院，广西 南宁 530021；2.广西医科大学 药学院，广西 南宁 530021；3.广西医科大学附属武鸣医院，广西 南宁 530199)

鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma)高发于东亚及东南亚，我国病例约占全球的80%。由于发病部位的解剖结构较特殊，对鼻咽癌大多采取放射治疗为主的综合治疗。随着放疗技术的发展，鼻咽癌放疗后5年生存率逐步提高，但放射抗拒及化疗耐药仍是鼻咽癌治疗失败的主要原因。临床上，鼻咽癌的放射治疗还存在着诸如放射局部组织损伤、鼻腔炎症反应、放射抗拒和远处转移难以控制等问题。中药在鼻咽癌的放射治疗中，可减轻放疗不良反应、提高放射敏感性、增强疗效并提高患者生存质量。本文对近10年来中药复方及单体成分在鼻咽癌放射治疗中的放射增敏作用进行概述，旨在为鼻咽癌的基础研究和临床治疗提供参考。

1 鼻咽癌的放射治疗与放射增敏

鼻咽癌的发病部位及病理类型特点决定了其主要的治疗方式为放射治疗。化学治疗联合放射治疗提高了鼻咽癌的治疗效果，降低了远处转移率，但无可避免地增加了不良反应发生率。因此提高放疗敏感性、减少不良反应依然是鼻咽癌治疗的主要目标之一。

临床上，甘氨双唑钠常作为放射增敏剂，增强鼻咽癌的放疗效果[1-4]。在体外研究中，许多药物和化合物对鼻咽癌细胞均表现出放射增敏作用。这些物质可大致分为四类：①抗肿瘤药物，如洛铂[5]、奈达铂[6-8]、埃克替尼[9]和紫杉醇[10]等；②小分子化学药物或化合物，如二甲双胍[11]、塞来昔布[12-13]和沙利霉素[14]等；③生物大分子，如重组人血管内皮抑素[15]、miR-206[16]和Raf激酶抑制蛋白[17]等；④中药复方及中药单体成分，如通窍活血汤[18]和养阴益气颗粒[19]等。抗肿瘤药物虽然可提高放疗敏感性，但会带来不良反应。而其他化学药物限于适应证，临床应用受限。因此，毒性较低、对鼻咽癌放疗有增效减毒作用的中药复方受到越来越多临床工作者的关注。相应地，中药提取物或单体成分也引起了众多学者的研究兴趣。

2 中药复方与放射增敏

2.1 中药复方放射增敏临床观察

2.1.1 活血化瘀类与养阴益气类 临床上，对鼻咽癌有放射增敏作用的中药复方主要有活血化瘀类、养阴益气类和清热解毒类。早在30多年前，已有文献报道活血化瘀类中药的放射增敏作用，但近年来，相关临床研究报道较少。刘静等[18]探讨了通窍活血汤联合放疗对鼻咽癌的疗效，与单纯放疗相比，疗效无显著性差异。王宏琢等[20]报道了活血化瘀中药对鼻咽癌放疗后放射性脑损伤的修复作用，但未对其放射增敏临床疗效进行观察。由此可见，活血化瘀类中药可能不是提高鼻咽癌放射增敏作用的主要中药类别。近年来，报道较多的是益气养阴和清热解毒类中药复方的放射增敏作用。如关本岭等[19]采用放疗联合养阴益气颗粒对鼻咽癌进行治疗，结果发现该中药复方具有放射增敏作用，能提高患者的近期(3个月)和远期(1年)疗效。而骆华春[21]研究发现，放疗联合益气养阴方对鼻咽癌的临床疗效与单纯放疗相当，但能显著减轻放疗引起的不良反应。

2.1.2 清热解毒类 除了养阴益气类，具有清热解毒功效的中药复方常常用于肿瘤的放射增敏[22]。如具有清热解毒作用的紫金龙片能提高鼻咽癌的放疗敏感性，其可能是通过提高鼻咽癌G1期细胞p16的表达，减少细胞周期素1(CyclinD1)的过表达而发挥作用[23]。黄金圣等[24]以养阴清热方联合放疗治疗鼻咽癌，结果发现该法使鼻咽病灶完全消退的放疗剂量显著低于单纯放疗组，即养阴清热方能提高放疗敏感性。杨娜[25]研究也发现，清热解毒汤联合放疗可提高鼻咽癌的治疗有效率并减轻口咽部黏膜反应，这可能与该中药复方具有提高机体免疫功能、清热解毒、清除自由基和改善微循环等作用有关。然而，并非所有的清热解毒方对鼻咽癌都具有放疗增敏作用，如具有清热利湿、凉血解毒功效的复方苦参注射液联合放化疗治疗鼻咽癌，其疗效略高于常规放化疗，但差异无统计学意义[26]。

上述临床疗效观察中，虽然一些中药复方对鼻咽癌没有显著的放射增敏作用，但中药复方联合放疗减轻不良反应的作用是确切的。在这些临床研究中，只有极少数文献对放射增敏作用机制进行了初步探索，更多的是从方中单味药材的功效，或某味中药化学成分的作用机制去解释复方的作用机制，这是临床研究存在的局限性。

2.2 中药复方放射增敏作用机制

对中药复方放射增敏作用机制的研究，大多从分子水平对细胞凋亡相关因子或细胞周期调控因子的表达量进行研究。唐秋等[27]研究发现紫金龙可上调鼻咽癌裸鼠移植瘤p16基因，下调cyclinD1基因，提高对放疗敏感的细胞周期G1细胞比例，发挥放射增敏作用，该结论与其另一项研究[23]结论相似。范彩霞等[28-29]研究了鼻咽清颗粒对鼻咽癌CNE-2细胞放疗敏感性的影响，并以裸鼠移植瘤模型对放疗增敏作用及机制进行研究，结果发现，鼻咽清颗粒能使肿瘤细胞阻滞于G2/M期，降低肿瘤组织中凋亡相关蛋白P53和Bcl-2的表达，从而实现放疗增敏作用。黄沐等[30]研究发现，生脉姜黄散对鼻咽癌裸鼠移植瘤有放射增敏作用，其机制是上调细胞周期调控因子CDK6蛋白和mRNA表达，影响细胞周期，促进细胞凋亡。刘诗雅等[31]研究发现，生脉注射液可下调STAT3和p-STAT3蛋白，影响血管生成因子的表达，从而对鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株(CNE-2R)和裸鼠移植瘤产生放射增敏作用。郑剑霄等[32]从细胞水平研究发现，复方苦参注射液能促进放射线诱导的CNE-2细胞凋亡，从而产生放射增敏作用。

以上研究表明，中药复方及制剂主要通过调控细胞周期因子、凋亡因子或血管生成相关因子，而对鼻咽癌发挥放射增敏作用。然而，由于中药复方的化学成分复杂，其发挥作用的化学成分尚不明确。因此，以中药单体成分对鼻咽癌的放射增敏作用机制进行研究仍然是主要方向。

3 中药单体成分与放射增敏

3.1 生物碱类

近年来，关于生物碱类单体成分对鼻咽癌的放射增敏作用研究，报道较多的是黄连素(图1a)和汉防己甲素(图1b)。张弛等[33]研究发现黄连素能降低乏氧诱导因子(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达，从而对CNE-2细胞和裸鼠移植瘤产生放射增敏作用。WANG等[34]研究发现，黄连素可降低CNE-2细胞中特异性蛋白1(Sp1)的表达，从而发挥放射增敏作用。而汉防己甲素不仅可以下调CDC25C和CDK1的磷酸化，提高cyclin B1蛋白表达，阻止DNA在细胞周期G2/M期的修复，促进细胞凋亡[35]；还可以抑制CDC25C/CDK1/cyclin B1通路上游因子MEK和ERK，并诱导自噬而发挥放射增敏作用[36]。此外，张梦雅[37]研究发现千金藤碱(图1c)可使鼻咽癌细胞阻滞于对放射敏感的G2/M期，并抑制细胞修复蛋白RAD51和XRCC1表达从而具有放射增敏作用。从化学结构来看，汉防己甲素与千金藤碱极为相似，两者对鼻咽癌的放射增敏作用机制应较为相似。在今后的研究中，可以将两者进行对比研究。

3.2 黄酮类

黄酮类单体化合物的抗肿瘤研究一直是热门领域之一，但对鼻咽癌放射增敏作用的研究，近年来报道较少。向元悌等[38]研究了汉黄芩苷(图2a)对鼻咽癌裸鼠移植瘤的放射增敏作用，发现汉黄芩苷能通过抑制核转录因子NF-κB mRNA的表达而发挥放射增敏作用。WANG等[39]通过体外实验发现，黄芩苷(图2b)能抑制放疗诱导的细胞自噬，逆转CNE-2R的放射抵抗，提高放射敏感性。郭俊宇等[40]发现异甘草素(图2c)对鼻咽癌的放射增敏作用机制与黄连素一致[33]，可抑制HIF-1α和VEGF mRNA的表达，抑制肿瘤血管生成。黄酮类化合物药理作用广泛，大多具有抗炎、抗氧化、促凋亡和影响心血管系统等作用。因此，其对鼻咽癌的放射增敏作用可能涉及多种机制，这给研究者带来了较大的研究空间。

图1 黄连素(a)，汉防己甲素(b)和千金藤碱(c)化学结构

图2 汉黄芩苷(a)，黄芩苷(b)和异甘草素(c)化学结构

3.3 多酚类

常见的对鼻咽癌有放射增敏作用的多酚类单体成分包括：表没食子儿茶素没食子酸酯[41]、白藜芦醇[42]、丹酚酸B[43]、没食子酸[44]和姜黄素[45-49]等。涉及的机制包括影响细胞周期[41-42]、下调E2F1和p-AKT[42]、降低HIF-1α和VEGF的表达[43]以及抑制放射线诱导的STAT3和c-Jun 信号活化[44]等。其中，近年来对姜黄素(图3)的研究报道最多，其对鼻咽癌的放射增敏作用机制主要有三方面，一是通过调控microRNA或逆转放射诱导的长链非编码RNA(IncRNA)差异化表达发挥作用[45-47]；二是通过调控细胞周期和DNA 损伤修复相关基因的表达实现[48]；三是通过调控肿瘤干细胞样细胞circular RNAs (circRNAs)网络产生作用[49]。由此可见，多酚类单体成分对鼻咽癌的放射增敏作用机制较为复杂，涉及多种基因、蛋白和信号通路，这可能与多酚类化合物的母体结构不同有关。

图3 姜黄素化学结构

3.4 多糖类

植物多糖大多具有免疫调节和抗肿瘤作用。因多糖来源丰富，有关多糖的抗肿瘤活性研究报道较多，但对鼻咽癌的放射增敏作用研究却鲜有报道。范家铭等[50]研究发现，人参多糖可降低裸鼠移植瘤中β-catenin mRNA及蛋白的表达，促进移植瘤细胞凋亡，增强鼻咽癌的放射敏感性。而最近的体外研究发现，黄芪多糖可下调N-cadherin、p-Akt和p-ERK蛋白表达水平，上调E-cadherin、Bax和Caspase-3蛋白表达水平，促进CNE-1细胞凋亡而发挥放射增敏作用[51]。由此可见，多糖可增强放疗对肿瘤细胞的促凋亡作用，这可能与多糖对肿瘤细胞具有促凋亡作用有关。我们研究也发现，罗汉松实多糖可促进肝癌H22移植瘤小鼠肿瘤细胞的死亡，但其是否对鼻咽癌具有放射增敏作用，目前正在研究中。由于多糖的分子量较大，体外实验的浓度往往也较大，这可能会对肿瘤细胞的生长产生不良影响。并且，大多数多糖是通过调节免疫功能发挥抗肿瘤作用。因此，多糖对鼻咽癌的放射增敏作用研究，以裸鼠移植瘤模型进行体内实验，可能更科学并更具参考价值。

4 结语

综上所述，目前临床上用于鼻咽癌放射增敏的药物十分有限。除了甘氨双唑钠是最常用的化学药物外，一些抗肿瘤药物联合放射治疗虽然可以提高疗效，但大多作为诱导化疗或同步放化疗的治疗方案使用，其联合应用加重了放疗不良反应。相对于化学药物而言，具有抗肿瘤或辅助抗肿瘤作用的中药复方或中成药，在临床上的适用范围更广，是鼻咽癌放射增敏作用研究的理想对象。而中药单体成分，绝大部分还处于细胞或动物实验阶段。值得一提的是，虽然中药单体成分作为放射增敏剂应用于临床尚需时日。但由于其数量庞大，结构具有多样性，且往往有良好的生物活性，所以是研究放射增敏作用机制的最佳对象。从已报道的中药单体成分结构类型和数量来看，当前有关鼻咽癌放射增敏作用的研究还远远不足。究其原因，可能与鼻咽癌是一种具有较强地域性的癌症类型有关。由此可见，中药单体成分对鼻咽癌及其放射增敏作用的研究依然是未来一段时间内的研究热点之一。从中药单体成分中有望发现对鼻咽癌具有放射增敏作用的新药物。