聚丙烯安瓿包装盐酸氨溴索注射液相容性试验—抗氧剂的研究

于洪华，赵同申，颜红，丁锐，杨清华

(1.山东华鲁制药有限公司，山东 聊城 252100；2.山东省药学科学院，山东 济南 250101)

盐酸氨溴索注射液是一种呼吸系统药物，具有促进黏液排除的作用及溶解分泌物的特性，它可促进呼吸道内黏稠分泌物的排除及减少黏液的滞留，因而显著促进排痰，改善呼吸状况。适用于伴有痰液分泌不正常及排痰功能不良的急性、慢性呼吸道疾病例如慢性支气管炎急性加重、喘息型支气管炎及支气管哮喘的祛痰治疗；术后肺部并发症的预防和治疗；早产儿及新生儿的婴儿呼吸窘迫综合征(IRDS)的治疗[1-2]。其临床应用广泛，临床疗效好，无明显毒副作用，且耐受性较好[3-8]。

盐酸氨溴索注射液于20世纪80年代初在德国上市，随后在法国、意大利、日本、西班牙等许多国家上市，商品名：沐舒坦。规格：2 mL：15 mg，棕色玻璃安瓿包装。本文研究的盐酸氨溴索注射液采用聚丙烯安瓿包装，产品生产吹、灌、封在A级区内完成，可以将污染风险降到最低，因此产品的安全性更高；同时不易破碎、使用方便。聚丙烯原料在生产过程中常添加少量抗氧剂(一般为抗氧剂1010、330、1076、168)和除酸剂(一般为铝镁滑石)等，以增强聚丙烯材料的稳定性。包材中添加剂的加入对所包装的药品就可能引入安全性风险，《欧洲药典》规定注射剂包装中抗氧剂的最大用量为0.3%。本文参考《欧洲药典》的相关规定、《化学药品注射剂与塑料包装材料相容性指导原则(试行)》以及相关文献[9]，对聚丙烯安瓿是否与盐酸氨溴索注射液具有相容性进行研究及评估。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1260高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)；TE612-L和BT125D电子天平(赛多利斯公司)；色谱柱：Cosmosil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)。

1.2 试药 抗氧剂1010对照品(EP，批号：3.1)；抗氧剂330对照品(EP，批号：2.1)；抗氧剂1076对照品(EP，批号：2.2)；抗氧剂168对照品(EP，批号：4.0)。甲醇(色谱纯，山东禹王实业有限公司禹城化工厂)；乙腈(色谱纯，天津赛孚瑞科技有限公司)；乙醇(分析纯，天津富宇化工精细有限公司)；二氯甲烷(分析纯，天津富宇精细化工有限公司)；水(去离子水，自制)。

1.3 样品 空白聚丙烯安瓿及盐酸氨溴索注射液(批号：C1708211、C1708221、C1708231)，由山东华鲁制药有限公司生产。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇为流动相；检测波长274 nm；柱温25 ℃；流速1 mL·min-1。

2.2 对照品溶液的制备 分别精密称取抗氧剂对照品1010、330、1076、168均约15 mg，置同一25 mL量瓶中，加1 mL二氯甲烷，溶解后，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取5 mL，置25 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 取空白聚丙烯输液瓶剪碎，精密称取2.5 g，精密加入乙腈20 mL，精密称定，回流6 h，冷却后用乙腈补失重量，作为提取试验供试品溶液。

取盐酸氨溴索注射液稳定性考察样品各时间点的样品溶液作为迁移试验供试品溶液。

2.4 定量限和检测限 取“2.2”项下的对照品溶液，用甲醇定量稀释成不同倍数的系列溶液，按上述色谱条件进行测定。测得抗氧剂1010、330、1076、168的定量限分别为24、24、36和36 ng；检测限分别7.2、7.2、10.8和10.8 ng。

2.5 精密度试验 精密量取“2.2”项下的对照品溶液20 μL，注入高效液相色谱仪，连续进样6针，记录色谱图及峰面积。结果：抗氧剂对照品1010、330、1076、168对照品溶液平均峰面积的RSD分别为：0.14%、0.07%、0.07%和0.05%。

2.6 线性与范围 取“2.2”项下的对照品贮备液，精密量取不同体积，用甲醇稀释至不同浓度的溶液6份，精密量取各溶液20 μL，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图及峰面积，结果见表1。

表1 4种抗氧剂线性试验结果

可见，4种抗氧剂在各自浓度范围内，线性关系均良好。

2.7 溶液稳定性试验 分别于0、2、4、6、8、10、12、24 h，精密量取对照品溶液20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图及峰面积。结果对照品溶液中抗氧剂1010、330、1076、168峰面积的RSD分别为0.36%、0.46%、0.39%、0.29%。说明抗氧剂的对照品溶液24 h稳定性良好。

2.8 回收率试验

2.8.1 抗氧剂溶剂提取回收试验 对照品溶液：照“2.2”项下制备。

供试品溶液：取空白聚丙烯安瓿，清洗干净，晾干，剪碎，取1.25 g，精密称定，置圆底烧瓶中，分别精密加入对照品溶液2 mL，然后加入乙腈18 mL，回流6 h。同法制备供试品溶液6份。作为提取回收率供试品溶液。

取对照品溶液及供试品溶液各20 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图及峰面积。计算回收率，结果见表2。

表2 4种抗氧剂提取回收率试验结果

4种抗氧剂的提取回收率均达到95%以上。

2.8.2 抗氧剂在药液中的迁移回收率试验 对照品溶液：照“2.2”项下制备。

供试品溶液：量取盐酸氨溴索药液(样品批号：C1708221)10 mL，再精密量取对照品贮备液0.5 mL，摇匀，同法制备供试品溶液6份，作为迁移回收率供试品溶液。

取对照品溶液及供试品溶液各20 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图及峰面积。计算回收率，结果见表3。

表3 4种抗氧剂在药液中的迁移回收率试验结果

4种抗氧剂在药液中的迁移回收率均达到90%以上。

2.9 样品测定 样品批号：C1708211、 C1708221、C1708231。对照品溶液：照“2.2”项下制备。供试品溶液：照“2.3”项下制备。

取对照品溶液和供试品溶液各20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图及峰面积，用外标法计算含量，结果见表4～5。典型图谱见图1～3。

图1 对照品溶液HPLC图(出峰顺序依次为：抗氧剂1010、330、1076、168)

表4 聚丙烯安瓿提取溶液中抗氧剂含量测定结果

提取试验结果：检测到可提取物有3个，为抗氧剂1010、抗氧剂330和抗氧剂168，其中抗氧剂330含量最高。

表5 迁移试验样品中抗氧剂迁移量测定结果

迁移试验结果：盐酸氨溴索注射液3批样品在长期24月及加速6月稳定性考察中4种抗氧剂均未检出。

3 讨论

3.1 抗氧剂提取溶剂的选择 分别采用乙腈、95%乙腈、乙醇，对空白聚丙烯安瓿进行回流提取6 h，测定提取液中各抗氧剂的含量，结果：提取溶剂为乙腈时，各种抗氧剂提取量最多，故选择乙腈为提取溶剂。

图2 提取试验抗氧剂测定HPLC图(出峰顺序依次为：抗氧剂1010、330、168)

图3 迁移试验抗氧剂测定HPLC图

3.2 抗氧剂提取时间的选择 以乙腈为提取溶剂，对空白聚丙烯安瓿分别回流提取3、4、5、6、6、7 h，测定提取液中各抗氧剂的含量，结果：提取6 h和7 h的样品检出4种抗氧剂的种类和含量基本一致，说明提取6 h即能将4种抗氧剂基本提取完全，因此，回流提取的时间选择6 h。

3.3 强制迁移研究 取聚丙烯安瓿包装的盐酸氨溴索注射液，置高压蒸汽灭菌锅中，121 ℃条件维持60 min，测定该样品溶液中各抗氧剂的含量，以考察包材中抗氧剂向药液中迁移的可能性。结果测得抗氧剂1010、330、168含量分别为0.74、0.71、0.44 μg·mL-1，抗氧剂1076未检出。说明高温高压等剧烈条件可使聚丙烯材料中添加的抗氧剂迁移入药液之中。但本试验条件下的强制迁移量均较小。

3.4 提取试验及强制迁移研究中，检出抗氧剂1010、330、168，但含量均远远小于0.3%的限度(即3 000 μg·g-1)；迁移试验中盐酸氨溴索注射液3批样品长期24月稳定性考察中均未检出抗氧剂。说明包材聚丙烯安瓿中抗氧剂没有迁移入药液或迁移量很小。表明本品聚丙烯输液瓶中的添加剂-抗氧剂不会改变药品的有效性及安全性，对患者的安全性风险很小，说明本品包装材料与药品具有良好的相容性。

3.5 聚丙烯安瓿包装注射液产品由于其自身的优点，近几年获得高速推广和发展，但并非所有注射剂产品皆可采用聚丙烯安瓿包装。选用时应考虑聚丙烯安瓿材料本身添加了少量的添加剂且具有透气性，需要分析产品的特性和包材的特性，然后根据相关指导原则进行研究，以确保产品的安全性、有效性和治疗可控。