波生坦片在健康人体内的生物等效性研究

何秀玲，谭金华，宋天云，夏小容，唐 霞

(江门市五邑中医院，广东 江门 529000)

波生坦片在体内部分向活性产物羟基波生坦代谢，一方面具有对内皮素A受体的亲和作用，另一方面还具有对内皮素B受体的亲和作用，属于一种双重内皮素受体拮抗剂，能够促进肺及全身血管阻力的降低，在不将心率提升的情况下将心脏输出量增加[1]。在Ⅲ期、Ⅳ期动脉性肺动脉高压患者的治疗中应用[2]。本文研究了健康体检人员体内波生坦片的生物等效性。

1 材料与方法

1.1 一般资料

回顾性选取2019年3月至2020年10月本院健康体检人员80例，其中男性42例(52.5%)，女性38例(47.5%)，年龄18～35岁，平均(26.3±4.5)岁；体质量55～76kg，平均(65.3±10.4)kg；身高164～180cm，平均(172.5±10.3)cm；体质量指数19～24kg/m2，平均(21.3±3.4)kg/m2。

1.2 纳入和排除标准

纳入标准：(1)均经生命体征检查、体格检查、12导联心电图检查、实验室检查确定为健康人员；(2)体质量均在50kg及以上；(3)均具有良好的依从性。排除标准：(1)有器官疾病史；(2)有药物滥用史；(3)近2周内应用过中成药、处方药及非处方药。

1.3 方法

1.3.1药品、试剂和仪器

购买国内医药企业生产的波生坦片(规格：125mg/片，生产批号：201560302)作为受试试剂(T)，购买美国Genentetch Inc与瑞典Actelion公司联合开发生产的波生坦片(全可利，规格：125mg/片，生产批号：IPO59A0201)作为参比制剂(R)，购买国内医药企业生产的波生坦对照品(纯度96.7%，生产批号D0)、Toronto Research Chemicals生产的羟基波生坦对照品(纯度98.0%，生产批号1-YHH-52-2)、内标波生坦-d4(纯度95.0%，生产批号6-XAL-5-1)、羟基波生坦-d4(纯度95.0%，生产批号14-MVI-183-3)。购买美国Applied Biosystems/SCIEX公司圣翰的QTRAP 5500质谱，日本岛津公司生产的LC-30AD液相色谱。

1.3.2测定方法

1.3.2.1 色谱条件

色谱柱：1.9μm Hypersil Gold C18，规格为2.1mm×100mm。流动相A相、B相分别为5mmol醋酸铵水溶液、甲醇，流速、柱温分别为0.3mL/min、40℃。自动进样器温度、进样量分别为4℃、5μl。洗脱梯度(A相：B相)：90：10、90：10～10：90、10：90、90：10分别0.00～0.30min、0.30～0.60min、0.60～2.50min、2.51～4.00min。

1.3.2.2 质谱条件

采用正离子电喷雾离子源(ESI)，应用多反应监测模式。离子化电压、气帘气、温度、雾化气(Gas1)、辅助气(Gas2)分别为5500V、40L/min、550℃、30L/min、60L/min。波生坦的检测离子对为m/z552.0→m/z508.0，羟基波生坦的检测离子对为m/z568.0→m/z202.0，内标波生坦-d4的检测离子对为m/z556.0→m/z508.0，羟基波生坦-d4的检测离子对为m/z572.0→m/z202.0。

1.3.2.3 血浆样品处理

混旋50μl血浆样品+400μl内标工作液(波生坦d-4/羟基波生坦-d4：10/6ng/mL)混匀2min，在4℃的温度下离心10min，速率为3000r/min，将100μl上清液取出来进样分析。

1.4 观察指标

(1)健康人血浆中波生坦片、羟基波生坦的精密度和回收率；(2)健康人供试品和参比制剂波生坦片空腹、餐后主要药动学参数。

1.5 统计学分析

2 结果

2.1 健康人血浆中波生坦片的精密度和回收率分析

健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血浆中波生坦的日内、跨日精密度均逐渐升高(P<0.05)。见表1。

表1 健康人血浆中波生坦片的精密度和回收率分析

2.2 健康人血浆中羟基波生坦的精密度和回收率分析

健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血浆中羟基波生坦的日内、跨日精密度均逐渐升高(P<0.05)。见表2。

表2 健康人血浆中羟基波生坦的精密度和回收率分析

2.3 健康人供试品和参比制剂波生坦片空腹主要药动学参数比较

健康人波生坦片空腹试验、参考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均显著高于羟基波生坦(P<0.05)，tmax、t1/2均显著低于羟基波生坦(P<0.05)。见表3。

表3 健康人供试品和参比制剂波生坦片空腹主要药动学参数比较

2.4 健康人供试品和参比制剂波生坦片餐后主要药动学参数

健康人波生坦片餐后试验、参考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均显著高于羟基波生坦(P<0.05)，tmax、t1/2均显著低于羟基波生坦(P<0.05)。见表4。

表4 健康人供试品和参比制剂波生坦片餐后主要药动学参数比较

3 讨论

相关医学研究表明[3-4]，在空腹条件下、餐后条件下，波生坦片受试制剂、参比制剂均具有生物等效性。本研究结果表明，健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血浆中波生坦的日内、跨日精密度均逐渐升高。健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血浆中羟基波生坦的日内、跨日精密度均逐渐升高。健康人波生坦片空腹试验、参考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均显著高于羟基波生坦，tmax、t1/2均显著低于羟基波生坦。健康人波生坦片餐后试验、参考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均显著高于羟基波生坦，tmax、t1/2均显著低于羟基波生坦，和上述研究结果一致。

综上所述，健康体检人员体内波生坦片在空腹、餐后条件下均具有生物等效性。