孕妇产前血型不规则抗体检测结果分析

丁 婧，罗 云，汪宏梅

（江苏省泰兴市人民医院输血科 江苏 泰兴 225400）

血型不规则抗体是指不包括A、B、O型系统的其他抗体，常见的有Rh、MNSs、Lewis等血型系统的抗体。注射、母婴血型不合妊娠等途径是这些抗体的主要形成渠道，可导致免疫溶血性输血反应，也会使交叉配血难度变大。同时，也是引发新生儿溶血病（HDN）的常见原因之一。胎儿血型基因来自于母亲与父亲，占比均为50%[1]。若来自父亲的基因正好是母亲所没有的，胎儿红细胞上父本基因编码的抗原可能会对母体产生刺激作用，母体会生成相应抗体，而这类抗体经过胎盘与胎儿红细胞作用便会导致溶血发生。此病可造成胎儿贫血、水肿、早产，严重的可导致新生儿死亡。为此，有必要加强产前筛查，做好对此病的防范工作，确保输血安全与母婴安全。基于此，本次研究选取2018年6月—2020年6月在本院行产前检查孕产妇7 808例，均接受不规则抗体检测，回顾性分析其临床资料，观察不规则抗体检测在产前检查中的应用价值，现报告如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2018年6月—2020年6月收治的孕产妇中选取7 808例为研究对象，年龄22～42岁，平均年龄（28.6±5.3）岁；产次1～4次，平均为（2.0±0.4）次。2018年6月—12月有2 306例，Rh（-）22例；2019年1月—12月有3 862例，Rh（-）共30例；2020年1月—6月有1 640例，Rh（-）共12例，参与研究的孕产妇均知情且同意并签署同意书。

1.2 方法

1.2.1仪器与试剂 不规则抗体检测中使用的仪器包括TD-3A型血型血清学离心机，FYQ型免疫微柱孵育器，均来自长春博德生物技术有限责任公司。使用的抗人球蛋白检测卡，由长春博迅生物技术有限责任公司生产。不规则抗体筛选红细胞由长春博讯生物技术有限公司生产。不规则抗体鉴定谱细胞来自上海血液中心。

1.2.2检测方法 （1）试管盐水法。在3个试管内分别滴入一滴相应的浓度为2%～5%不规则抗体筛选红细胞悬液，将待检者的血浆各两滴滴入3个孔内。混匀后进行15 s离心处理，速率为3 400 r/min，轻轻晃动试管观察有无发生凝集。如果凝集说明不规则抗体呈阳性。孕妇血型为Rh阴性血的，还需接受抗人球蛋白检测，用于确定不规则抗体的检查结果[2]。（2）微柱凝胶抗人球蛋白卡法：准备一张抗人球蛋白凝胶卡，从3支试管中分别取50μL浓度为0.8%～1%不规则抗体筛选红细胞悬液，将其倒入对应的3个凝胶孔内。将待检者的血浆滴入3个孔内，分别为50μL，然后，微柱凝胶卡需保持垂直竖立状态，轻轻敲动加样槽，使血浆与红细胞悬液混合均匀，将其放入FYQ型免疫微柱孵育器中，温度为37℃，约15 min后再放入TD-3A型血型血清学离心机中进行离心处理5 min，观察记录结果。若抗原抗体复合物凝集在微柱凝胶孔的表面或胶中说明为阳性；若红细胞凝聚在微柱凝胶孔的尖底部则说明为阴性[3]。（3）鉴定不规则抗体：孕妇血型为Rh阴性血的，还需接受抗人球蛋白检测，用于确定不规则抗体的检查结果。

1.3 统计学分析

采用SPSS 21.0统计软件进行数据处理。正态分布的计量资料采用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验，计数资料用频数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 分析孕产妇不规则抗体检测结果

2018年6月—2020年6月不规则抗体检出情况，7 808例孕产妇中共检出64例阳性，阳性检出率为0.820%，见表1。

表1 2018年6月—2020年6月Rh（-）检出情况

2.2 孕产妇不规则抗体阳性分布情况

本次所检出的64例阳性红细胞不规则抗体孕产妇中，包括的抗体系统有Rh系统、MNS系统、Lewis系统、P血型系统等。检出率最高的是Rh系统，检出率为34.375%，见表2。

表2 64例孕产妇不规则抗体阳性分布情况

3.讨论

不规则抗体常常导致溶血性输血反应、新生儿溶血病。此类抗体也易增加血型鉴定难度，影响配血成功[4]。此类抗体多见于有输血史的人、有妊娠史的女性以及新生儿，可导致严重的免疫性溶血反应，包括孕妇流产、死胎，新生儿胆红素脑病、贫血、黄疸、智力低下[5]。因此，我国卫生部明确规定对于需要输血的患者及产妇，都应在输血前接受相关抗体筛查检测。目前，临床上主要采用红细胞血型抗体检测技术，不仅操作简单、迅速，而且干扰因素少，结果便于观察与保存。如果孕妇属于O型血，丈夫需进行A、B、AB型血特异性抗体筛查，结果为阳性说明已被致敏，若Rh血型不合抗体效价大于1:32,说明病情严重，ABO血型不合抗体效价大于1:512说明病情严重。针对疑似有溶血病的胎儿应尽快采取相应的干预措施，尽量防范溶血病的发生，减小对孕妇与胎儿的不利影响。

抗体筛选细胞难以将全部抗原筛查都覆盖到，因此，无法筛查出所有的抗体。一个试验结果为阴性并不代表血清内不存在不规则抗体，只能说明运用相关检测技术时，缺少与筛查细胞发生反应的抗体。因此，在检测不规则抗体的时候，孕妇血型抗体性质的差异性决定了必须选取恰当的检测方法。如果发生漏检，将直接给孕妇以及胎儿造成威胁。有研究显示，对589例孕妇采用两种不同检测方法检测不规则抗体，结果显示，传统试管抗人球蛋白法的阳性检出率只有0.17%，说明此法的敏感性较低，而微柱凝胶法的阳性检出率达到0.85%[6]。虽然两种方法的阳性检出率相差5倍，但二者的差异不存在统计学意义。造成这一结果的原因主要是专科医院的性质所决定。妇产科医院极少存在反复输血的病例，大多数孕妇只有一胎，不规则抗体检出率不高。

本次研究中64例不规则抗体为阳性的孕产妇中，主要包括Rh系统、MNS系统以及Lewis系统，大多数为Rh系统。由于Rh系统中D抗原免疫原性是最高的，在人群体中的阳性率非常高，为99.7%。本次研究中发现Rh血型系统中检出最多的属于抗-E抗体，而抗-D抗体仅有3例，说明抗-D抗体的检出率比抗-E抗体的检出率明显更低。原因可能是近年来国家已经把D抗原作为输血前的常规血型检测，特别是对RhD阴性的患者采用同型输注的方法。RhD阴性的女性在怀孕后，若胎儿为RhD阳性，则需注射抗D免疫球蛋白，用于封闭进入母体的RhD阳性血，进而可以防止母体在输血时或怀孕期间产生抗-D抗体。此外，E抗原检测与同型输注不易受到关注，常常被忽视。Rh血型不规则抗体是除ABO血型系统抗体之外最典型的一类红细胞血型抗体，易导致新生儿溶血病与免疫性溶血性输血反应。有研究显示，孕妇中Rh不规则抗体检出的阳性率较高，比例为52.12%[6]。本研究64例孕妇中共检出Rh抗体22例，阳性检出率为34.375%。因此，需要输血的患者应尽量做常规Rh抗原表型检测，并采用Rh抗原同型输注，从而防止不规则抗体的形成。MNS系统中主要为抗-M，多数为天然抗体，在37℃下没有反应，也不会导致溶血性输血反应或新生儿溶血病，但要注意在术中患者体温过低麻醉状态中，也可能出现输血反应。因此，如果患者检测出有特异性抗体，不管抗体的性质属于IgG，还是IgM，建议都选用对应抗原阴性的红细胞进行输注。

综上所述，伴随二胎政策的推出，多次妊娠的孕妇数量有所增加，不规则抗体阳性率也随着提高。对于孕产妇建议在产前接受常规ABO与RhD血型检测的同时，还应接受不规则抗体检测，尽量确保输血安全与母婴安全。