EGFR基因在肺微浸润性腺癌中的突变特征及意义

2021-05-19孙小敏王敏李宏春

实验与检验医学 2021年2期

孙小敏，王敏，李宏春

（安阳市人民医院检验科，河南安阳 455000）

肺癌作为呼吸系统常见恶性肿瘤,其发病率及死亡率日增,已成为严重威胁人群健康的恶性肿瘤之一。该病病因及发病机制不明，吸烟、职业暴露、电离辐射、既往肺部慢性感染、遗传因素及大气污染等均属其发病相关危险因素,依据其组织病理特点可分为肺鳞状细胞癌、肺腺癌、肺未分化癌、肺泡细胞癌等类型[1,2]。肺腺癌（lung adenocarcinoma，LAC）属非小细胞肺癌重要亚型，常见发生于女性及不抽烟者[3]。LAC 治疗目前仍以外科手术、放化疗为主，以实现肿瘤根治及最大限度控制、提高生存率、改善生存质量、延长生存期为主要治疗原则[4]。以表皮生长因子受体（英文全称，EGFR）为靶点的生物靶向治疗（酪氨酸激酶抑制剂，EGFR-TKIs）因其治疗特异性及有效性日益受到重视[5]。既往研究发现EGFR 基因的人群突变率约10~50%[6,7]。虽组织病理表现可一定程度上提示EGFR 基因情况,但仍需行相应EGFR 基因检测以了解其具体突变情况。因筛查技术的进步，诸如原位腺癌、微浸润性腺癌（英文全称，LMIA）等肺腺癌早期类型可见检出,了解其EGFR 基因突变情况并给予及早治疗可显著改善患者预后[4]。本研究旨在了解LMIA 的EGFR 基因突变情况及其相应组织病理特点间的关联，为临床进一步诊疗方案制定提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集 2016 年 1 月至 2018 年 10 月本院经治 LMIA 90 例，其中男 40 例，女 50 例，发病年龄范围38~75 岁，中位年龄55 岁。纳入标准：所有患者均符合2018 版《中华医学会肺癌临床诊疗指南》[8]所述LMIA 诊断标准；均经病理活检确诊为LMIA；病历资料完整；肿瘤标本可获取；术前均未给予放疗、化疗及生物治疗等；患者或患者家属了解本研究并签署知情同意书。排除标准：合并其他系统恶性肿瘤者；近期给予相应抗肿瘤治疗者；合并高血压、脑梗等心脑血管疾病者；患者神志不清或明确表示拒绝入组者。收集所有病例的临床及病理资料与术后肿瘤组织样本。计算吸烟指数（即日吸烟支数×吸烟年限），≥400 者属吸烟病例，相反则为非吸烟病例。本研究得到医院医学伦理委员会的批准。

1.2 EGFR 基因突变检测

1.2.1 检测试剂及仪器 QIAamp DNA FFPE Tissue Kit 试剂盒（Qiagen 公司生产）；人 EGFR 基因突变检测试剂盒（上海透景生命科技股份有限公司生产）；752N 可见/紫外分光光度计（北京海天友诚科技有限公司生产）。

1.2.2 检测方法应用QIAamp DNA FFPE Tissue Kit 试剂盒从LMIA 标本组织中提取DNA，并应用752N 可见/紫外分光光度计检测DNA 浓度及纯度。根据人EGFR 基因突变检测试剂盒说明书提示，采用RT-PCR 的方法检测已提取DNA 样本中EGFR 突变基因（主要检测 19Del 及 L858R）。

1.3 统计学方法采用SPSS 23.0 对所有数据进行统计学分析。计数资料采用率（%）表示，并采用Pearson 相关分析两组间相关性。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 LMIA 中EGFR 基因突变情况共发现野生型25 例（27.78%），突变型 65 例（72.22%）。突变型中，32 例 19Del 突变（突变率 35.56%）,30 例 L858R 突变（突变率 33.33%）,另有3 例外显子 18 G719X 点突变（突变率3.33%）。

2.2 LMIA 中EGFR 基因突变与病理参数间的关联 EGFR 突变与肿瘤尺寸、病灶纤维化及病灶炎症细胞浸润间均存在关联（P 均＜0.05），而与性别、年龄、吸烟情况、病灶数量、病灶位置及病理亚型间均无关联（P 均＞0.05）。见表1。

表1 LMIA中EGFR基因突变与病理参数间的关联

2.3 LMIA 中EGFR 基因突变亚型与病理参数间的关联19Del 基因突变与年龄、病灶位置、肿瘤尺寸、病理亚型及病灶纤维化间均存在关联 (P 均＜0.05),而与性别、吸烟情况、病灶数量及病灶炎症细胞浸润间均无关联(P 均＞0.05)。L858R 基因突变与肿瘤尺寸、病理亚型及病灶炎症细胞浸润间均存在关联性(P 均＜0.05),而与性别、年龄、吸烟情况、病灶数量、病灶位置及病灶纤维化间均无关联（P 均＞0.05）。见表2。

3 讨论

肺腺癌作为主要非小细胞肺癌类型,其组织学特征及基因突变情况存在较强异质性[9,10]。LMIA 作为肺腺癌重要亚型,其主要是指肺泡壁出呈孤立性生长、直径≤3cm 的肿瘤细胞团块，且病灶内可见至少 1 个的浸润灶（直径≤0.5cm）[8]。临床诊疗中，LMIA 因其常无明显临床特征而易漏诊。既往研究发现EGFR 是肺腺癌的主要突变基因位点,亚洲人群发生率约46.9%,而在不吸烟女性中发生率＞16.2%[10],肺腺癌靶向治疗的主要作用靶点即为EGFR。既往研究发现EGFR 敏感性肺腺癌给予EGFRTKIs 治疗后,疾病无进展生存期可显著延长，且可显著提高患者生活质量[4,11]。EGFR-TKIs 已成为术后复发性肺腺癌及晚期EGFR 敏感性肺腺癌的一线治疗选择[4]。Yoshizawa 等[12]研究发现 EGFR 基因突变常见于LMIA，其主要突变类型包括19Del 与L858R。本研究所示EGFR 基因突变发生率为72.22%，其中 19Del 突变率 35.56%，L858R 突变率33.33%，与既往研究基本一致[13]，此外本研究还发现 3 例 18 G719X 点突变。我国 EGFR 基因突变情况较为常见[14]。EGFR 基因突变是给予EGFR 靶向酪氨酸酶抑制剂能否取得预期疗效的重要预测因素，治疗前明确其突变情况可增加临床决策效能、改善患者预后[15]。本研究发现EGFR 突变与肿瘤尺寸、病灶纤维化及病灶炎症细胞浸润间均存在关联（P 均＜0.05）；19Del 基因突变与年龄、病灶位置、肿瘤尺寸、病理亚型及病灶纤维化间均存在关联（P 均＜0.05）；L858R 基因突变与肿瘤尺寸、病理亚型及病灶炎症细胞浸润间均存在关联性（P 均＜0.05）；提示肿瘤尺寸、病理亚型、病灶纤维化及病灶炎症细胞等因素与EGFR 基因突变特征间存在一定的关联性,且EGFR 整体基因突变情况与不同突变亚型间存在差异,其具体差异对比情况尚需进一步研究去了解、证实。