黄芩苷分散片的制备及溶出度分析

冯鹏飞, 叶晓娅△, 张 磊

(1.平顶山市食品药品检验所中药室； 2.平顶山学院药学院，河南 平顶山 467000)

黄芩苷在抗菌、抗炎、清热解毒等方面具有极其良好的生物活性。在国内广泛用于治疗过敏、肝炎等疾病，具有非常重要的临床意义[1-3]。黄芩苷粉末难溶于水，在体内不容易被吸收，因此将黄芩苷原料药制成分散片[4-5]，其在体内溶出快，吸收迅速，可达到较好的生物利用度及更好的临床治疗效果，所以受到广大患者欢迎。本研究采用正交试验优化黄芩苷分散片的重要辅料[6]，比较各法的分散均匀性时间，选出制片方法；找出最佳处方比例，测定其体外溶出度，为临床上黄芩苷分散片的应用提供理论基础，同时也为优化制备工艺提供有价值的参考，报道如下。

1 仪器与试剂

1.1 仪器 TDP-1.5单冲式压片机(长沙市长宏制药机械设备厂)，ZRS型智能溶出度试验仪(上海黄海药检仪器有限公司)，YPD-200C型片剂硬度仪(上海舜宇恒平科学仪器有限公司)，MA110电子天平(上海鸿都电子科技有限公司)，JJG705-2014高效液相色谱仪(北京普析通用仪器有限责任公司)，SYU-22-600DT超声波清洗机(郑州生元仪器有限公司)，BJ-Ⅲ型崩解时限测定仪(天津市旭阳仪器设备有限公司)。

1.2 试剂 淀粉(天津市科密欧化学试剂有限公司，批号：20190106)，羧甲基淀粉钠(湖州展望药业有限公司，批号：180305)，黄芩苷原料药(湖北百科格莱制药有限公司，批号：201902023)，硬脂酸镁(山东聊城阿华制药有限公司，批号：180627)，微晶纤维素(国药集团化学试剂有限公司，批号：20181025)，黄芩苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110715-201720，含量以93.3%计)，乙腈(常州市玉盟化工有限公司)，纯化水(实验室自制)。

2 方法与结果

2.1 正交试验设计 分散片处方设计出发点是使片剂遇水后在尽可能短的时间内崩解成很小的颗粒，并形成均匀分散的混悬液。试验设计将羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、硬脂酸镁和淀粉的用量作为变量，将崩解时限作为观察指标。采用正交试验[7]将该试验设计成三水平四因素的正交试验。见表1。

表1 正交试验水平因素分析(%)

2.2 崩解时限检查[8]按试验号制备的分散片，分别置100 mL(20±1)℃的水中振摇，记录时间。见表2。

表2 正交试验结果表

以时间低者为最佳，由上述正交试验结果可以看出，极差D=32.0，极差B=25.7，极差A=15.0，极差C=14.7，即羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、硬脂酸镁和淀粉用量对崩解时限的影响，由大到小依次为淀粉>微晶纤维素>羧甲基淀粉钠>硬脂酸镁。淀粉用量对崩解时限的影响有显著差异，而硬脂酸镁润滑剂对处方影响很小。根据正交试验结果分析得知，最佳的处方应该是A1B3C1D1。即羧甲基淀粉钠用量为5%，微晶纤维素用量为45%，硬脂酸镁用量为5%，淀粉用量为10 %时效果最好。

2.3 处方验证试验 取本试验优选处方黄芩苷分散片6片，测得其崩解时间。见表3。

表3 崩解时间分析

结果显示，处方条件按A1B3C1D1崩解速度快，且6片崩解时间差异小，表明本方案合理且稳定可行，故处方最终以A1B3C1D1方案制备。即将主药与和各辅料研细，过6号筛，按处方称取主药和辅料，混合均匀后直接压片，得黄芩苷分散片，每片含黄芩苷20 mg。

3 含量测定

3.1 色谱条件及系统适应性 色谱柱：Pgrandsil-STC-C18(250.0 mm×4.6 mm, 5 μm)；流动相：乙腈-水=60∶40；检测波长：290 nm；流速：1.0 mL·min-1；进样量：20 μL；柱温：30 ℃。

3.2 对照品溶液制备 精密称取黄芩苷对照品加入流动相超声溶解，定容后得到浓度为200 mg·L-1的溶液，作为对照品溶液。

3.3 供试品溶液制备 精密称取黄芩苷原料药20 mg和适当比例的辅料，置于100 mL容量瓶中，加流动相适量，超声使其溶解，放置至室温，用流动相定容至刻度、摇匀、滤过、即得。

3.4 专属性试验 取“3.2”项中对照品溶液和“3.3”项中供试品溶液适量，按“3.1”项中色谱条件进样测定。见图1。

图1 黄芩苷对照品及供试品溶液高效液相色谱法(high perfomance liquid chromatography,HPLC)图

3.5 线性关系考察 分别精密吸取“3.2”项中对照品溶液0.25、 0.50、1.00、2.00、4.00、 8.00 mL于50.00 mL容量瓶中，用流动相定容至刻度，即得浓度为1、 2、 4、 8、 16、 32 mg·L-1的对照组溶液。按“3.1”项中色谱条件，测定峰面积，以峰面积为(y)为纵坐标，进样量(x)为横坐标进行回归计算，得到黄芩苷的回归方程：y =79 922x-110 000 (R2=0.997 3)。结果表明：黄芩苷浓度在1～32 mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系。

图2 对照品线性关系图

3.6 精密度试验 按“3.1”项中色谱条件，精密吸取浓度为8 mg·L-1的黄芩苷对照品溶液，连续进样6次，每次20 μL，以黄芩苷峰面积计算相对标准偏差(relative standard deviation, RSD) (n=6)为2.41%，表明该方法精密度良好。

3.7 回收率试验结果 按照优选处方，精密称取一定量的黄芩苷制备成分散片，再分别精密加入黄芩苷对照品溶液，超声溶解并定容至100 mL，按“3.1”项中色谱条件测定，计算回收率,其平均回收率为99.3%，RSD为3.3%。见表5。

表5 加样回收试验结果

4 溶出度测定及结果

打开溶出度测定仪，调试桨叶，使桨叶最低处距离溶出杯底部25 mm，在测定仪中加入蒸馏水，在溶出杯以及补液杯中加入0.1 mol·L-1盐酸溶液，然后设定温度为(37±1)℃，调节转速为75 r·min-1，等待机器加热到设定温度后，将黄芩苷分散片放入溶出杯中，设定时间为60 min，分别在5、 10、15、 20、 30、 45、 60 min时用注射器抽液5 mL，并用注射器及时向烧杯补同温介质5 mL。抽取液用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，按“3.1”项中色谱条件，测定黄芩苷峰面积。见表6、图3。结果显示，最优处方A1B3C1D1以0.1 mol·L-1的盐酸溶液为溶出介质进行体外溶出度测定，采取HPLC测定黄芩苷含量，该方法分离程度较高、出峰时间较短、操作方便、灵敏度高，并且避免了此前采取紫外分光光度法测定黄芩苷成分时受到其他成分的干扰，使结果更加精确[5]。

表6 黄芩苷溶出度分析

图3 黄芩苷分散片溶出度图

5 讨论

在研究正交试验设计时，先确定试验目的是选择黄芩苷分散片的优化处方，以制成的黄芩苷分散片崩解时限为考核标准，再定水平，选因素，确定各因素之间是否存在交互作用。在此过程中，本试验是设计一系列辅料的种类和比例，直接压片测定崩解时限，选取合适的辅料及配比，制定因素水平表。这种方法不仅简单、快捷，还可以减少主药消耗，达到经济实惠的目的。溶出度检查方法主要包括转篮法、桨法、小杯法等。中药制剂在介质中分散后易形成混悬细颗粒状溶液，若采用转篮法，混悬细颗粒会堵塞转篮网的筛孔，影响试验结果。因此本研究采取桨法，使结果更为精准，避免不必要的误差。

本试验采用正交试验和HPLC，测试不同比例的微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁等主要辅料制备分散片的崩解时限和体外溶出度，从而找出最优处方，为优化制备工艺提供有价值的参考。