茶树菇液体菌种应用及配套栽培技术研究

林 铃

茶树菇液体菌种应用及配套栽培技术研究

林 铃

（古田县食用菌研发中心，福建 宁德 352200）

探索液体菌种在茶树菇栽培上的应用技术，筛选出适用液体菌种的栽培基质配方：棉籽壳87%，麸皮10%，石灰3%，含水量60%。比较应用液体菌种与固体菌种栽培效果：应用液体菌种菌包含水量高、pH低，原基形成较迟而整齐，初潮产量与固体菌种差异不明显；应用液体菌种菌包萌发点多、生产周期大为缩短，生产占地面积小，用工减少、成本降低，污染率低，菌包成熟度较一致，出菇较整齐，容易实现工厂化生产。

茶树菇；液体菌种；固体菌种；培养基

茶树菇（）属伞菌目、粪伞科、田蘑属，又名茶菇、油茶菇[1]。其质地脆嫩，味道鲜美，营养丰富，含有8种人体必需氨基酸[2]，丰富的B族维生素以及钾、钠、钙、镁、铁、锌等矿质元素，深受百姓喜爱[3]。具有抗衰老，降血脂[4]，抗凝血[5]，防癌、抗癌[6]等功效，能够增强人体的运动及抗疲劳能力[7]，是一种药食兼用的食用菌。

茶树菇栽培历史悠久，栽培范围广，农户常采用固体菌种接种，生产成本高、周期长，污染率高[8]。目前国内外金针菇[9]、杏鲍菇[10]、海鲜菇[11]等品种工厂化栽培大部分采用液体菌种，应用液体菌种具有成本低，菌丝生长快，缩短生产周期，菌种纯度高、菌龄一致、萌发快等特点[12]，但其在茶树菇栽培方面的研究报道较少。

本研究筛选适用于茶树菇液体菌种的栽培基质配方，对比应用液体菌种和固体菌种在发菌和出菇过程的差异，以期简化茶树菇栽培工艺、缩短栽培时间、提升产品商品性状，提高茶树菇产业价值，从而形成一套可行的液体菌种栽培技术，降低菇农的生产成本，提高收益。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

茶树菇5号，由古田县佳鑫食用菌专业合作社提供。

1.2 主要仪器设备

130701卧式压力矩形蒸汽灭菌器（衡阳市金一帆制药设备实业有限公司），LDZX-75KBS立式压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂），40 L液体发酵罐（镇江市科远机械工程有限公司），SW-CJ-2FD洁净工作台（苏净集团苏州安泰空气技术有限公司），PH-100A背光笔式酸度计（上海力辰邦西仪器科技有限公司），HCB1002电子天平（艾德姆衡器武汉有限公司），PMB202水分测定仪（苏州乾芸仪器科技有限公司）。

1.3 栽培工艺流程

液体菌种栽培工艺流程：试管种→摇瓶种→培养罐种→出菇包→栽培管理→出菇。

固体菌种栽培工艺流程：试管种→原种→栽培种→出菇包→栽培管理→出菇。

1.4 培养基及菌种培养方法

试管种：用种前转管培养，提纯复壮。接种至PDA培养基（马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂15～20 g，水1 000 mL，pH自然），25 ℃恒温培养箱无光照培养。

摇瓶种：1 000 mL三角瓶，装600 mL培养液，培养液配方为鲜马铃薯200 g、葡萄糖20 g、磷酸二氢钾0.3 g、硫酸镁0.15 g、水1 000 mL，121 ℃灭菌30 min，冷却到25 ℃，每瓶接入5小块母种（一支母种的量）。置于旋转式摇床，无光照、25 ℃条件下培养5～7天。

培养罐种：培养液配方为土豆淀粉8 g、玉米淀粉1 g、葡萄糖20 g、磷酸二氢钾1 g、硫酸镁0.5 g、水1 000 mL，pH为6～7，121 ℃灭菌30 min，冷却到25 ℃，通气量1∶0.8，接种量2%～3%，40Ｌ的发酵罐接入１瓶摇瓶种，培养6天左右菌种成熟。

液体菌种质量要求：培养液澄清透明不浑浊，无杂菌、无异味；菌丝球（或菌丝片段）均匀悬浮于液体中不分层，直径不大于2 mm。

栽培种制备：培养料配方为棉籽壳86 %、麸皮10 %、生石灰3 %、石膏1 %，各原料混合搅拌，含水量60 %，每袋装料300 g，108 ℃灭菌5 h，冷却至70 ℃，压力降为零后卸锅置于接种房，冷却至25 ℃以下接种，期间臭氧+紫外杀菌2 h。

栽培基质试验配方见表1，4个配方基质含水量均为60%，单袋重800～900 g。

问题(8)即为文献[12]中提出的半正定规划问题,文献[12]已经理论证明了该问题中最优解Y的秩最高为2,而近似WLS问题的最优解的秩应为1。显然,由于松弛的影响,半正定规划的解并不一定是近似WLS问题的最优解。若要得到秩为1的解,一种自然的想法是通过加入其他有效约束来收紧该问题。观察约束‖x-s0‖=r0(即y(2k+1)=‖y(1:k)-s0‖),其经过松弛可变为‖x-s0‖≤r0,它涉及到优化变量y之间的内在联系。一个自然的问题是,若在现有半正定规划问题中加入此约束,能否起到收紧约束集的作用?下面的命题回答了这个问题。

表1 栽培基质试验配方

1.5 适于液体菌种的栽培基质配方筛选

根据配方制作栽培料包，最终测得装料重为873.00±3.70 g/袋，菌包高15.54±0.78 cm，直径10.38±0.35 cm，培养料含水量为58.96%±1.19%，pH（料/液比为1/5）为8.21±0.06。

采用划线法测量不同栽培配方的菌丝生长速度，测定初潮产量，筛选出适合茶树菇栽培的最优配方。

1.6 应用液体菌种与固体菌种的试验

（1）发菌过程菌包含水量和pH变化比较。菌丝长满料面后，随机分别取固体菌种和液体菌种接种的菌包料面栽培料20 g搅拌均匀，取其中5 g用含水量测定仪测量含水量；取其中10 g按1∶5比例加入蒸馏水，用pH测定仪测量pH。每间隔7天测量一次。

（2）发菌过程菌丝生长情况比较。固体菌种和液体菌种接种的菌包各取70袋，观察测量记录发菌过程中菌丝长满菌包的时间、菌丝状态、菌丝生长速度、菌包污染率等，进行对比分析。

（3）菌包出菇情况比较。对菌包进行开袋出菇，记录原基形成、子实体发育情况，测定初潮菇产量等，并进行对比分析。

1.7 数据处理

采用WPS Office 2019 11.1.0进行数据处理，运用SPSS Statistics V17.0软件分析差异显著性。

2 结果与分析

2.1 不同栽培基质配方的菌丝生长速度和初潮菇产量

如图1所示，采用液体菌种接种，不同栽培基质配方菌丝生长速度差异不显著，最高为0.46 cm/d。初潮菇产量，以配方3最高，为109.78 g/袋，配方1、4添加有适量的玉米芯或木屑，与配方3差异不明显。因此，如考虑节约成本，采用配方3时可适量添加玉米芯或木屑。

2.2 不同类型菌种菌包的发菌表现

图1 不同基质配方的茶树菇菌丝长速和初潮产量

图2 应用不同类型菌种菌包上表层菌料的含水量变化

（2）菌包上表层菌料pH变化。如图3所示，应用固体菌种的菌包比应用液体菌种的菌包pH略高，原因可能是含水量低提高了pH。应用液体菌种的菌包，上表层菌料的pH从接种后的8.24缓慢增加至第56天的8.89，与应用固体菌种菌包的变化一致。

图3 应用不同类型菌种菌包上表层菌料pH变化

（3）菌包菌丝生长情况。试验结果显示，应用液体菌种的菌包菌丝长满料面时间为10±1天，比应用固体菌种的（13±1天）早近3天。应用液体菌种的菌包20天时部分走满，比应用固体菌种的早5天；接种30天后，应用液体菌种的菌包有83.3%长满菌丝，而应用固体菌种的只有72.3%长满菌丝。

菌包应用固体菌种与液体菌种，菌丝均洁白浓密，没有明显差异。应用液体菌种菌丝生长速度为0.47±0.03 cm/d，与应用固体菌种（0.45±0.02 cm/d）的差异不显著。菌包污染率，应用液体菌种为2%，明显低于应用固体菌种的7%。

2.3 应用不同类型菌种的出菇表现

原基形成方面，应用液体菌种的菌包，原基形成较迟但整齐；应用固体菌种的，原基形成早、较整齐。子实体生长方面，应用液体菌种的菌包，子实体菇盖较小、菇柄较细长；应用固体菌种的菌包，菇盖较大、菇柄长，均为丛生。初潮产量，应用液体菌种的菌包为109.77 ±16.75 g/袋，与应用固体菌种（107.30±16.64 g/袋）的差异不显著。

3 小结与讨论

本研究探索液体菌种在茶树菇栽培中的应用技术，根据菌丝生长速度和初潮产量对比，筛选出适用于液体菌种的栽培基质配方，即棉籽壳87%，麸皮10%，石灰3%，含水量60%。发现应用液体菌种较应用固体菌种菌包含水量高、pH低、菌丝满袋时间快、菌包污染率低。原基形成较迟但整齐，子实体生长菇盖较小，菇柄较细长，初潮产量与应用固体菌种差异不显著。

本研究发现，应用液体菌种主要有以下优势：①生产周期缩短，从试管到摇瓶再到发酵罐生产出液体菌种23天就可完成，而生产固体菌种需要72 天；②生产占地面积小、用工少，液体菌种一罐40 L可接4 000袋菌包，占地面积只需1 m2，而对应固体栽培种需100袋，堆放面积至少2 m2；③生产成本低，用固体菌种接种，平均每袋成本5分，而用液体菌种接种平均每袋成本2分，且液体菌种接种快，用工成本低；④发菌时间短，30～45天菌丝就可布满菌包，较固体菌种走满栽培袋天数45～60天提前15天以上；⑤污染率低，利用接种枪等便捷操作设施，暴露时间短，多点萌发快，接种后6 h即可看到菌种萌发变白，24～48 h后就可吃料生长，使杂菌没有侵染机会。

然而，液体菌种也存在设备投资大，技术要求高，贮藏运输困难，抵抗不良环境能力弱等[13]缺点，如果操作不当会造成成批污染。其适合食用菌规模化、工厂化生产[14]。

本研究还存在一些问题需要克服，如接种针较短，使用时菌种会喷洒在袋口两侧；菌丝球因栽培基质的过滤作用难以流入菌包下层，多点萌发优势受影响，导致菌种发菌整齐度不够，有些菌袋30天走满，有些则要40多天，存在时间差，影响管理同步化。下一步将研究制作插入式接种针，以期实现多点喷射，多点萌发；研究菌包接种孔径大小，以提高菌种发菌整齐度，同时避免滋生病虫害。

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林铃（1988—），男，在读硕士，主要从事食用菌研究。E-mail：470977906@qq.com。

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2095-0934（2020）05-340-04