不同方法炮制当归化学成分分析

王素霞

（河南省许昌市中医院门诊中药房，河南 许昌 461000）

当归性味温、甘、辛，系伞形科植物，取其干燥根，去除水分后，药用价值广泛，具有活血调经、抗炎、抗血栓、补血、润肠通便等功效［1］。当归主要化学成分为挥发油、有机酸、氨基酸、多糖及其他成分，中药炮制可增强药效，降低毒性、增加药物利用率等。中药炮制方法多样，常见有生当归、酒浸炒当归、拌炒当归与当归炭，不同炮制方法影响药性和化学成分。本研究分析不同炮制方法对当归化学成分的影响，报道如下。

1 材料与设备

原料。1kg当归均购于本市大药房，经省中药鉴定所专家鉴定为当归后，密封储存。

仪器。1100 LC/DAD液相测谱仪［安捷伦科技有限公司，包括二极管阵列检测器（DAD）、真空脱气机、柱温箱、恒温自动进样器、梯度泵和自带化学工作站］，粉碎仪天津泰斯特仪器有限公司，梅特勒AG204电子称，Milli-Q纯水仪，OPTIMEL-80高速离心机（美国BECKMAN公司）。

试剂。阿魏酸对照品（批号408508）购自百灵威化学技术有限公司，Z-藁本内酯对照品（批号110825）购自上海融禾医药科技有限公司。

2 炮制方法

将当归取出后分成4等份，分别采用如下方法进行炮制。

生当归：取生当归的原材料，清除当归表面的杂质，洗净后晾晒，切成薄片状，或制成饮片。

酒当归：将生当归洗净后，按照生当归：黄酒=100∶10的比例搅拌均匀，直至黄酒被充分吸收，置于锅内炒制，加热生当归至表面呈深黄色，取出后放凉。

土炒当归：取适量土粉（每100kg当归片加入30kg土粉），放入锅内微火加热炒制，再倒入当归片一起炒制，直到当归片上粘满细土粉（俗称挂土）时，取出，抖去多余土粉，放置阴凉干燥处。

当归炭：将洗净后的生当归，放入锅中采用中火进行炒制，炒至当归表面呈现微黑色，喷洒少量清水，待火星灭尽后取出，放凉晾干。

3 化学检测方法

应用高效液相色谱法（HPLC）对不同炮制下当归的化学成分进行测定，分别取适量阿魏酸对照品和藁本内酯对照品于5ml的容量瓶中，加入30%甲醇，定容。精密称取生当归、土炒当归、酒当归以及当归炭粉末各0.2g，均加入70%甲醇溶液25ml。对各样品进行定量称重后40min加热回流处理，冷却后再次称定各样品重量，加入浓度70%甲醇溶液用于补足缺少的样品重量，混匀，采用0.45μm微孔滤膜过滤，色谱条件测定不同炮制方法下样品中的阿魏酸和藁本内酯的峰面积，按照线性回归方程，依次计算阿魏酸、藁本内酯的含量。采用水煮醇沉法分离提取当归中的多糖。根据《中国药典》（2015版）［2］中的烘干法对不同炮制方法下的当归进行水分含量进行测定。

4 观察指标

依次测定生当归、酒当归、土炒当归与当归炭等炮制样本中阿魏酸、藁本内酯、多糖、水分等化学成分的含量。测量不同炮制方法前后，当归质量的变化情况。 计算每种炮制方法前后，当归质量变化率。质量变化率=（炮制前当归质量-炮制后当归质量）/炮制前当归质量×100%。

5 统计学方法

用SPSS 20.0统计学分析软件进行处理，计数资料用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

6 结 果

6.1 不同炮制方法当归炮制样品化学成分含量比较

不同炮制方法取得的当归炮制样本中阿魏酸、藁本内酯及多糖含量比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。其中生当归各主要成分均为最高，其中阿魏酸、藁本内酯、多糖含量从高到低排序依次为生当归、酒当归、土炒当归和当归炭，水分含量从高到低排序依次为生当归、土炒当归、酒当归和当归炭，见表 1。

表1 不同炮制方法下当归炮制样品化学成分含量比较 （%）

6.2 不同炮制方法当归炮制样品质量变化比较

除了生当归外，其他炮制方法炮制前后当归质量及质量变化率比较差异明显（P＜0.05），酒当归炮制后当归质量增加，土炒当归、当归炭炮制后当归质量减少，见表2。

表2 不同炮制方法下当归炮制样品质量变化比较

7 讨 论

药理研究表明，当归具有止血调经、润肠、补血活血、抗血小板聚集、抗炎及清除自由基等功效［3］。当归成分为挥发油、有机酸、多糖、氨基酸和少量微量元素。其中挥发油以藁本内酯等苯酞类化合物占多数，有机酸以阿魏酸为代表。研究表明，炮制前后不仅其化学成分的含量发生变化，其化学组成也发生改变［4］。中药炮制的过程将对中药的疗效和有效成分产生直接影响［5］。

目前，提取和分离中药化学成分的方法多种多样，有机溶剂法、蒸馏法主要用于挥发油的分离和提取，其他还有薄层色谱法、硅胶柱色谱法［6］等。高效液相色谱法（HPLC）具有高压、高效、高灵敏度的优点，被广泛用于中药成分的检测。

当归中各主要成分有不同的作用。藁本内酯作为其中挥发油的代表，能够稳定心率、抑制心肌细胞肥大、缓解血管痉挛、抗心律失常；有机酸中大多数为阿魏酸，具有抗血小板凝集、保护血管内膜、清除自由基等功效；多糖能够活血、提高人体免疫力，具有抗肿瘤的作用［7］。

研究结果显示，不同炮制方法取得的当归炮制样本中阿魏酸、藁本内酯及多糖含量之前存在差异，其中生当归各主要成分均为最高，其中阿魏酸、藁本内酯、多糖含量从高到低排序依次为生当归、酒当归、土炒当归和当归炭。水分含量从高到低排序依次为生当归、土炒当归、酒当归和当归炭。说明不同炮制方法能够引起当归化学成分的变化，从而影响当归的药性和治疗效果。主要原因可能为土炒当归和当归炭都需高温加热、加速了藁本内酯的挥发，阿魏酸稳定性差、遇热易分解，高温环境进一步加重了多糖的碳化损伤［8］，而酒当归能够升高其中糖分的溶解度。

除了生当归外，其他炮制方法炮制前后当归质量及质量变化率比较差异明显。酒当归炮制后当归质量增加，土炒当归、当归炭炮制后当归质量减少，表明不同炮制方法能够影响当归的质量。当归的干燥根具有一定吸水性，在酒浸渍过后体积增加，一部分质量来自于酒中大部分水的质量。而土炒当归、当归炭炮制法主要以加热的方式，使当归中的水分以蒸发的形式减少，从而炮制后当归质量比炮制前减少。