扁平苔癣皮损组织CD147、MMP-3及MMP-7表达及意义

张翠苹　王君　李媛媛　王莹莹

[摘要]目的 探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（CD147）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）及基质金属蛋白酶-7（MMP-7）在扁平苔癣皮损组织中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化方法检测并比较40例扁平苔癣皮损及30例正常皮肤组织中CD147、MMP-3、MMP-7的表达。结果 扁平苔癣皮损组织中CD147、MMP-7的表达高于对照组（Z=-3.267、-2.331，P<0.05），且两者表达呈正相关（r=0.587，P<0.05）;两组MMP-3表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 MMP-7、CD147在扁平苔癣皮损组织中表达上调，两者可能在扁平苔癣的发病中发挥重要作用。

[关键词] 扁平苔癣;Basigin;基质金属蛋白酶3;基质金属蛋白酶7;免疫组织化学

[中图分类号] R758.65[文献标志码] A[文章编号] 2096-5532（2020）04-0455-04

doi：10.11712/jms.2096-5532.2020.56.085

[网络出版] http：//kns.cnki.net/kcms/detail/37.1517.R.20200519.1445.015.html;2020-05-19 17：19

EXPRESSION AND SIGNIFICANCE OF EXTRACELLULAR MATRIX METALLOPROTEINASE INDUCER， MATRIX METALLOPROTEINASE-3， AND MATRIX METALLOPROTEINASE-7 IN SKIN LESIONS OF LICHEN PLANUS

ZHANG Cuiping， WANG Jun， LI Yuanyuan， WANG Yingying

（Department of Dermatology， Affiliated Hospital of Qingdao University， Qing-dao 266003， China）

[ABSTRACT]Objective To investigate the expression and clinical significance of extracellular matrix metalloproteinase inducer （CD147）， matrix metalloproteinase-3 （MMP-3）， and matrix metalloproteinase-7 （MMP-7） in skin lesions of lichen planus （LP）.Methods Immunohistochemistry was used to measure and compare the expression of CD147， MMP-3， and MMP-7 in 40 cases of lichen planus lesions and 30 cases of normal skin tissues. Results Lichen planus lesions had significantly higher expression of both CD147 and MMP-7 than the control group （Z=-3.267，-2.331;P<0.05）， and the expression of CD147 and MMP-7 was positively correlated with each other （r=0.587，P<0.05）. Lichen planus lesions also had higher expression of MMP-3 than the control group， but the difference was not statistically significant （P>0.05）.Conclusion The expression of MMP-7 and CD147 is up-regulated in skin lesions of lichen planus; MMP-7 and CD147 may play important roles in the pathogenesis of lichen planus.

[KEY WORDS] lichen planus; Basigin; matrix metalloproteinase 3; matrix metalloproteinase 7; immunohistochemistry

扁平苔癣是一种发生在皮肤、黏膜、指（趾）甲的慢性炎症性皮肤病，主要病理表现为基底细胞液化变性及真皮上部界面炎症反应带。其病因及发病机制目前尚未完全明了。近年来国内外关于口腔扁平苔癣组织中基质金属蛋白酶（MMPs）表达的研究较多，结果认为MMPs作为蛋白酶参与了细胞外基质（ECM）的降解，可能在扁平苔癣基底细胞及基底膜损伤中发挥重要作用[1-3]。作为MMPs的上游调控因子[4]，CD147可诱导MMPs的活化并导致肿瘤的侵袭[5-7]。目前，国内外对于皮肤扁平苔癣中MMP-3、MMP-7、CD147表达的研究不多。本文检测扁平苔癣皮损组织中CD147、MMP-3、MMP-7的表达情况，探讨三者间关系及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象

2017年3月—2019年3月，选取我科收治、经组织病理检查确诊为皮肤扁平苔癣病人的组织标本40例，其中男20例，女20例;年龄22～69岁，平均47.40岁;病程1月～10年，平均13.9月;14例取材于躯干，26例取材于四肢;所有病人均排除其他系统性疾病，均未系统使用糖皮质激素治疗。同期选取我院美容外科手术切除的正常皮肤组织标本30例作为正常对照组，其中男12例，女18例;年龄为17～70岁，平均32.20歲;15例取材于躯干，15例取材于四肢;均排除其他系统性疾病。两组年龄、性别及取材部位差异均无统计学意义。所取标本均经甲醛固定、石蜡包埋、切片。

1.2 主要试剂

一抗：包括兔抗人 MMP-3多克隆抗体、兔抗人 MMP-7多克隆抗体、兔抗人 CD147多克隆抗体（均购自北京博奥森生物技术有限公司）;通用型二抗PV-6001、二氨基联苯胺（DAB）试剂、免疫组化笔（北京中杉金桥公司）。

1.3 实验方法

将标本切片置于64 ℃的烤片机上60 min后，经脱蜡、抗原修复、体积分数0.03过氧化氢阻断内源性过氧化物酶、加一抗（CD147、MMP-3、MMP-7，滴度分别为1∶300、1∶150、1∶150）、加二抗PV-6001、DAB显色、苏木精复染、脱水、中性树胶封片等步骤，光镜下观察染色情况。

1.4 结果判断

CD147、MMP-3、MMP-7阳性细胞染色淡黄色至棕褐色。光镜下，每张切片随机选取5个视野，每个视野计数100个细胞。染色结果依据半定量法进行判断。染色强度评分：基本不着色0分，淡黄色为1分，棕褐色为2分;阳性细胞百分比评分：<5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，>50%为3分。以细胞染色强度与阳性细胞百分比评分的乘积判定结果：0～1分为阴性，2～3分为阳性，4分及其以上为强阳性，分别用（-）、（+）、（）表示。

1.5 统计学处理

采用SPSS 24.0软件进行统计学处理，计数资料组间比较均采用曼-惠特尼秩和检验，相关分析采用Spearman法。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

扁平苔癣皮损组织中CD147阳性染色主要表现为表皮基底层、棘层、颗粒层细胞膜和细胞浆出现棕黄色颗粒，而正常对照组表皮基底层、棘层及颗粒层浅着色。扁平苔癣皮损组织中MMP-3阳性染色主要表现为表皮基底层细胞浆出现棕黄色颗粒，正常对照组表皮基底层细胞浆亦出现MMP-3阳性染色。扁平苔癣皮损组织MMP-7阳性染色表现为表皮基底层、棘层及颗粒层细胞浆和（或）细胞核均出现棕黄色颗粒，而正常对照组表皮基底层、棘层及颗粒层浅着色（图1）。扁平苔癣组CD147、MMP-7表达高于正常对照组，差异具有显著意义（Z=-3.267、-2.331，P<0.05）;两组MMP-3表达差异无显著性（P>0.05）。见表1。Spearman相关分析显示，扁平苔癣皮损组织中MMP-7与CD147表达呈正相关（r=0.587，P<0.05）。

3 讨论

MMPs属于锌依赖性内肽酶家族，能够降解ECM的多种成分[8-10]，正常表达水平的MMPs参与生长发育过程中ECM的重构以及细胞的增殖、迁移和黏附等，参与机体多种生理功能的调控;而MMPs的异常表达往往与炎症、肿瘤以及心血管疾病有关[11-14]。既往研究显示，MMP-2、MMP-9与扁平苔癣的发病机制相关[15-18]。作为MMPs家族的重要成员，MMP-3、MMP-7是否参与了扁平苔癣发病尚不清楚。MMP-3能够降解Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型胶原及纤连蛋白、蛋白聚糖、层粘连蛋白、明胶等，不仅在破坏细胞间桥、导致细胞凋亡中發挥重要作用，还能激活前体MMP-1、前体MMP-9[19]。有研究结果显示，MMP-3表达上调与口腔扁平苔癣的发病机制相关[20-21];其表达水平与口腔扁平苔癣的严重程度有关[22]，但其与皮肤扁平苔癣严重程度是否相关有待进一步研究。GUNDUZ等[1]研究显示，扁平苔癣皮损组织中MMP-2、MMP-3及纤连蛋白表达缺失，而正常皮肤组织上述因子尤其是MMP-3均有表达，主要表达在基底细胞层，认为上述因子表达缺失与扁平苔癣皮损组织炎症反应有关。本文研究结果显示，皮肤扁平苔癣中MMP-3表达虽有上调，但与对照组比较差异无统计学意义。分析其原因可能为：皮肤扁平苔癣与口腔扁平苔癣发病机制可能存在差异，或与研究样本量大小、染色方法及判断标准不同有关，其具体原因有待大样本研究进一步证实。

MMP-7也属于MMPs家族中重要的成员之一，是上皮特异性产物，有较强降解Ⅳ胶原的作用，并与上皮细胞凋亡相关。有研究表明，MMP-3与MMP-7在正常口腔黏膜、口腔扁平苔癣及口腔鳞癌

中的表达逐渐增高，MMP-3、MMP-7在侵袭过程中表达上调，与侵袭性相关[23-25]。这或许为甄别口腔扁平苔癣的恶变提供了可能。还有研究显示，口腔扁平苔癣口腔黏膜上皮与结缔组织MMP-7的表达高于正常口腔黏膜[23]，MMP-7与组织金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）的比值高于对照组[24]，认为MMP-7及MMP-7/TIMP的表达失调可能参与了口腔扁平苔癣的发病。本文研究显示，MMP-7在扁平苔癣皮损组织的基底层、棘层及颗粒层均有表达，并且MMP-7的表达明显高于正常对照组，表明MMP-7可能在扁平苔癣发病中发挥重要作用。

CD147又称细胞外基质金属蛋白酶诱导因子，是一种跨膜蛋白，属于免疫球蛋白家族，最初从恶性肿瘤细胞的质膜中分离得到[26]，主要表达于肿瘤细胞、表皮细胞、免疫细胞、内皮细胞等[27]，可诱导多种MMPs的活化，包括MMP-2、MMP-3、MMP-7及MMP-9等[5]，在肿瘤进展中起重要作用[28-29]。有研究结果表明，CD147能刺激MMPs的分泌，但对TIMPs并不产生影响，导致MMPs与TIMPs的失衡，从而导致基底膜与肿瘤外基质的降解，引起肿瘤的侵犯与转移[30]。一项对于甲状腺滤泡癌（FTC）的研究显示，CD147、MMP-3、MMP-7、MMP-9在人FTC组织中表达上调，并且培养的PTC-131细胞中MMP-3、MMP-7、MMP-9的表达依赖于CD147的调节[5]。本文研究结果显示，与正常对照组比较，扁平苔癣皮损组织中MMP-3的表达差异无统计学意义，MMP-7、CD147表达上调，且MMP-7、CD147表达呈正相关，推测CD147可能通过诱导MMP-7的活化，促进其分泌而协同参与扁平苔癣的发病，其具体作用机制有待于进一步研究。

綜上所述，扁平苔癣皮损组织中的CD147及MMP-7表达上调，且两者表达呈正相关，提示两者在扁平苔癣发病中可能发挥重要作用，至于两者是否直接导致扁平苔癣的发病需进一步研究证实。

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（本文编辑 黄建乡）

[收稿日期]2019-09-23; [修订日期]2020-02-17

[基金项目]山东省医药卫生科技发展计划（2016WS0281）

[第一作者]张翠苹（1992-），女，硕士研究生。

[通信作者]王君（1971-），女，硕士，副主任医师，硕士生导师。E-mail：junwangqd@126.com。