高迁移率蛋白1（HMGB1）在宫颈癌中表达及其意义

刘变利　郭霞

[摘 要] 目的：探讨高迁移率蛋白1（HMGB1）在宫颈癌中表达及其意义。方法：采用免疫组化法检测HMGB1在宫颈癌组织及正常宫颈组织中表达，并结合临床、病理资料进行分析。结果：HMGB1在正常宫颈组、宫颈癌组中强阳性表达率分别为0%、81.48%，两组差异有显著统计学意义（P<0.01）；淋巴转移患者及无转移患者HMGB1强阳性表达率分别为100%、75%，两组差异有统计学意义（P<0.05）； 不同宫颈癌分期、分化程度、年龄组HMGB1表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论：HMGB1在宫颈癌组织中呈过表达，并与淋巴转移密切相关。

[关键词] 高迁移率蛋白1；宫颈癌；免疫组织化学

中图分类号：R737.33 文献标识码：B 文章编号：2095-5200（2015）06-086-03

DOI：10.11876/mimt201506034

[Abstract] Objective：To explore the expression of HMGB1 in cervical cancer and its significance. Method： To detect the expression of HMGB1 in cervical cancer and normal cervical tissue by immunohistochemistry. Results：The positive expression rate of HMGB1 in normal cervix was 0%， while the expression in cervical cancer was higher significantly （81.48%） （P<0.05）. The positive-expression rate was much higher in lymphonode metastasis （100%） than that in non-metastasis group （75%） （P<0.05）. The difference was not statistically significant between age， clinical stages and degree of differentiati. Conclusions：HMGB1 was over-expression in cervical cancer， and it was significantly related to the metastases to local lymph nodes.

[Key words] HMGB1；cervical cancer；immunohistochemistry

HMGB1（高迁移率蛋白1）是与染色体结合的非组蛋白成分之一，功能复杂，可参与炎症反应、细胞分化、迁移、增殖、凋亡及神经生长等，并在肝癌、结肠癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中过表达[1-3]。研究发现，HMGB1与肿瘤发生浸润及淋巴转移密切相关[4-5]。本研究采用免疫组化检测Ia-IIb宫颈鳞状细胞浸润癌与正常宫颈组织中HMGB1表达，旨在探讨其临床意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选择2012～2014年27例行广泛子宫切除及盆腔淋巴结清扫术宫颈癌患者，年龄32～65岁，平均年龄（49.07±8.9）岁。所有患者术前均未经放化疗，术后经病理证实均为原发性宫颈鳞状细胞癌。FIGO临床分期：Ia期1例；Ib期7例；IIa期11例；IIb期8例。分化程度：低分化9例；中高分化18例。淋巴结转移：伴淋巴转移7例；无淋巴转移20例。同时选取5例因子宫肌瘤或子宫腺肌征行子宫全切术，术后病检回示为正常宫颈鳞状上皮组织者作为对照。所有患者临床资料完整，病理资料由病理科专业医师指导，实验标本选取典型病灶，进行石蜡连续切片观察，切片厚度4μm。

1.2 方法

采用免疫组织化学SP法。鼠抗人HMGB1单克隆抗体为香港abcam公司产品，HMGB1，一抗工作浓度1︰200，二抗为福建迈新有限公司产品。按说明书操作，DAB显色，苏木精复染，脱水、透明和封固。以PBS液代替一抗作为阴性对照。HMGB1阳性主要表达于细胞浆，部分细胞核中也有一定程度表达。以胞浆内出现淡黄色至棕黄色颗粒为标准，依据棕色反应阳性强度和面积综合评定结果，对每张切片阳性细胞强度按无着色、淡黄色、棕黄色和棕褐色分别评为0、1、2、3分：阳性着色面积按无着色、着色面积小于1/3、1/3-2/3、≥2/3分别评为0、1、2、3分。根据两项评分之和判断结果。0～3分判断为阴性或弱阳性，≥4分判断为强阳性表达。

1.3 统计学方法

所有数据应用SPSS17.0软件包进行统计分析，因总病例数小于40例，计数资料采用Fisher确切概率法进行检验， P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

如图1所示，HMGB1主要表达于肿瘤细胞胞浆。27例患者中强阳性22例，强阳性表达率为81.48%。而在正常宫颈组织内表达为阴性或弱阳性，强阳性表达率为0%（见图2）。对两组平均积分行确切概率法分析，差异有统计学意义（P<0.05）。

本实验中7例宫颈癌伴淋巴转移患者，HMGB1均呈强阳性表达，强阳性表达率为100%，而在淋巴转移阴性宫颈癌患者中，强阳性表达率为75%，两组间差异具有统计学意义（P<0.05）。

11例年龄小于45岁宫颈癌患者中，7例表达为强阳性，强阳性率为63.64%，而在16例≥45岁病例中，15例表达为强阳性，强阳性百分率为93.75%，两组间差异无明显统计学意义（P>0.05）。

3 讨论

随着分子生物学及基因工程发展，从蛋白水平研究宫颈癌肿瘤生物学行为越来越引起人们重视。HMGB1是一种非组蛋白染色体结合蛋白，广泛分布于心、肝、肾等组织中[6]。既往实验表明，HMGB1及其受体表达水平与肿瘤发生、发展、浸润及转移密切相关[7-8]，HMGB1可通过抑制巨噬细胞增殖或促进其凋亡，降低巨噬细胞数目，减弱其在抗肿瘤转移中作用，抑制机体抗肿瘤免疫机制有效发挥[9]。Guo等[10]应用免疫组化法研究胃癌组织中HMGB1表达，结果显示，76例胃癌组织标本中，HMGB1主要表达于胞核，多数呈强阳性表达，与正常组相比具有显著性差异，其中低分化组强阳性表达率明显高于高分化组，而在患者年龄、手术分期、性别、淋巴转移等方面，两组表达无明显差异。庞晓奡等[11]通过研究正常宫颈、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中HMGB1表达水平，发现宫颈癌中HMGB1表达水平明显上调，并与FIGO分期、淋巴结转移情况密切相关。Xue等[12]

李妍等[13]发现，宫颈癌患者中HMGB1表达水平与淋巴转移状态、远处转移、手术分期、复发等密切相关，可作为评价预后及复发重要指标之一，并可通过联合应用SCCA、CYFRA21-1等提高诊断敏感性及特异性，本实验中亦发现宫颈癌伴淋巴转移患者中HMGB1强阳性表达率明显高于非淋巴转移组，进一步提示HMGB1可能与肿瘤浸润转移有关，可作为患者预后及生存率重要指标，也是评估患者术后是否予以后续放化疗治疗依据。抗HMGB1表达亦有望成为抑制肿瘤浸润与转移方法之一。但本研究结果显示HMGB1表达水平与患者年龄、临床分期无明显相关性，低分化及中高分化组宫颈癌组织中HMGB1强阳性表达率分别为88.89%及77.78%，虽然两组间无明显统计学差异，但低分化组HMGB1过表达率较中高分化组有所增加。

本实验证实HMGB1在宫颈癌组织中呈过表达，并与淋巴转移密切相关。抗HMGB1表达亦有望成为抑制肿瘤浸润与转移方法之一。

参 考 文 献

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