非小细胞肺癌中E—cadherin、β—catenin和CXCR4蛋白表达及意义

申敬伟　舒红

【摘要】 目的 研究上皮钙粘附蛋白（E-cadherin）、β-连环蛋白（β-catenin）和趋化因子受体4 （CXCR4）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达和临床意义。方法 免疫组化SP法检测73例NSCLC组织及20例正常肺组织E-cadherin、β-catenin和CXCR4表达。结果 E-cadherin表达与β-catenin的异常表达与肿瘤的分化程度及淋巴结转移相关（P<0.05）；CXCR4表达与肿瘤的TNM分期及淋巴结转移相关（P<0.05）。E-cadherin与CXCR4及β-catenin表达呈负相关（P<0.05）， β-catenin与CXCR4表达呈正相关（P<0.05）。结论 E-cadherin低表达、β-catenin异常表达和CXCR4高表达都可促进NSCLC的转移， 且三者在NSCLC转移中相互作用， 可能成为研究NSCLC转移机制的新靶点。

【关键词】 上皮钙粘附蛋白；β-连环蛋白；趋化因子受体4；非小细胞肺癌；免疫组织化学

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.12.017

NSCLC占新发肺癌病例的75%～80%， 很多患者就诊时已经发生了远处转移。近年来趋化吸引理论逐渐成为研究的热点。肿瘤细胞的移动是由其所表达的趋化因子受体和靶器官表达的趋化因子所决定[1]。E-cadherin是细胞粘附分子的重要成员， 其表达减少或功能异常与肿瘤的发生、浸润和转移密切相关。在肿瘤转移中， β-catenin的异常表达使胞膜完整性受损， 促进肿瘤细胞生长、侵袭和转移。本研究探讨E-cadherin、β-catenin和CXCR4在NSCLC中的表达， 具体报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 收集2009～2010年中国医科大学附属盛京医院手术切除的NSCLC组织73例， 20例癌旁正常肺组织作为对照。所有病例均无术前放化疗史；男38例， 女35例；中位年龄61岁， 年龄≤60岁36例， >60岁37例；鳞癌21例， 腺癌52例；高分化22例， 中分化34例， 低分化17例；无淋巴结转移38例， 淋巴结转移35例；Ⅰ～Ⅱ期58例， Ⅲ～Ⅳ期15例。

1. 2 试剂与方法 鼠抗人E-cadherin、β-catenin单克隆抗体及兔抗人CXCR4多克隆抗体购自北京中杉生物技术公司， 免疫组化SP法， 按试剂盒说明书操作。

1. 3 统计学方法 采用SPSS13.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验；相关性采用Spearman等级进行分析。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 E-cadherin、β-catenin和CXCR4在NSCLC中的表达

E-cadherin在正常肺支气管黏膜及腺上皮细胞胞膜出现棕色颗粒， NSCLC中膜表达明显减弱， 部分NSCLC无表达。β-catenin在正常肺支气管黏膜及腺上皮细胞胞膜出现棕色颗粒， NSCLC中膜表达减弱， 胞浆积聚/核异常积聚。CXCR4阳性定位于胞浆， NSCLC中CXCR4阳性率65.75%明显高于正常肺组织阳性率15.00%。

2. 2 CXCR4、E-cadherin和β-catenin在NSCLC中表达与其临床病理关系 CXCR4的阳性表达与TNM分期、淋巴结转移相关（P<0.05）， E-cadherin的阳性表达与分化程度及淋巴结转移相关（P<0.05）， β-catenin的异常表达与分化程度及淋巴结转移相关（P<0.05）。见表1。

2. 3 E-cadherin、β-catenin和CXCR4在NSCLC中表达的相互关系 E-cadherin和CXCR4的表达呈负相关（r=-0.343， P<0.05）， CXCR4与β-catenin异常表达呈正相关（r=0.301， P<0.01）， E-cadherin与β-catenin异常表达呈负相关（r=-0.295， P<0.05）。

3 讨论

Chen等[2]最近证实CXCR4的高表达与NSCLC的脑转移相关。本实验中CXCR4的阳性率65.75%明显高于正常肺组织的阳性率15.00%， 与相关学者发现上皮性癌乳腺癌原发灶高表达趋化因子受体CXCR4结果一致。CXCR4的表达与年龄、性别、病理类型、分化程度无关（P>0.05）， 与临床分期、有无淋巴结转移相关（P<0.05）， 提示临床分期晚的NSCLC中CXCR4的含量高于分期早的， 有淋巴结转移的NSCLC中CXCR4的含量高于无淋巴结转移者， 说明NSCLC临床分期晚促使CXCR4的含量增高进而促进淋巴结转移， 其高表达可能是判断NSCLC是否转移的一个指标。

本研究中发现E-cadherin低表达与NSCLC淋巴结转移及分化程度相关（P<0.05）， 提示E-cadherin缺失有促进肿瘤发生和向周围组织转移的趋势。E-cadherin可成为甲状腺癌[3]转移和预后判断指标之一。CXCR4表达与E-cadherin呈负相关， 可能原因是高表达的CXCR4通过自分泌作用使E-cadherin向胞膜的转运过程减慢而在胞内聚集， 胞膜的E-cadherin表达减少， 依赖于E-cadherin的细胞间正常连接遭到破坏导致细胞间连接松散， 有利于肿瘤细胞脱离而促进转移。Tucci等[4]发现在皮肤黑色素瘤中E-cadherin表达缺失和CXCR4表达增加与不良预后有关。

本研究发现β-catenin胞膜表达减少， 主要为胞浆和胞核的异常聚集。89.04%的患者β-catenin在胞浆和（或）胞核内异常聚集， 癌细胞膜上的β-catenin向胞质中转移， 可能导致cadherin/catenin复合体结构破坏和功能障碍， 防止癌细胞转移的屏障消失， 从而使NSCLC发生和转移。β-catenin的异常表达与淋巴结转移及分化程度相关（P<0.05）， 表明β-catenin 功能异常与NSCLC发生、发展和转移有密切关系， 是肺癌转移的重要机制。本研究显示CXCR4 与β-catenin的异常表达呈正相关。

总之， E-cadherin低表达、β-catenin异常高表达与CXCR4高表达都可以促进NSCLC转移且三者之间相互作用， 联合检测E-cadherin、β-catenin及CXCR4有助于判断NSCLC的转移潜能和患者的预后。

参考文献

[1] 王青青， 王建莉. 趋化因子及其受体与肿瘤.中国肿瘤生物治疗杂志， 2001， 8（1）：2.

[2] Chen G， Wang Z， Liu XY， et al. High-level CXCR4 expression correlates with brain-specific metastasis of non-small cell lung cancer. World J Surg， 2011， 35（1）：56-61.

[3] 李春生.甲状腺乳头状癌组织E-cadherin蛋白表达及其与颈部淋巴结转移相关性研究.中华肿瘤防治杂志， 2011， 18（2）：102-104.

[4] Tucci MG， Lucarini G， Brancorsini D， et al. Involvement of E-cadherin， β-catenin， Cdec42 and CXCR4 in the progression and prognosis of cutaneous melanoma. Br J Dermatol， 2007， 157（6）： 1212-1216.

[收稿日期：2015-12-07]