艾叶提取物对2型糖尿病小鼠血糖和氧化应激的影响

尚喜雨 曲震理 刘尚书 刘庆春 王卿 未小明 张园园 薛士鹏

糖尿病是胰岛素不足所致的代谢紊乱性疾病。糖尿病发病过程中会出现糖尿病肾病、糖尿病眼病、糖尿病心脏病等并发症，影响患者生存质量和生命安全。控制血糖是延缓并发症发生的关键，而选择合适的药物控制血糖是治疗糖尿病的关键。随着临床对糖尿病研究的深入，中草药在糖尿病血糖控制中有所应用。艾叶为菊蒿属多年生草本植物艾的干燥叶。从艾叶中分离的成分有萜类、黄酮、苯丙素、芳香酸（醛）、甾体及脂肪酸等。现代药理学研究提示，艾叶具有抗菌抗病毒、降血糖、降血压、免疫调节等作用[1]。本研究旨在探讨艾叶提取物对2型糖尿病小鼠血糖水平的影响及相关机制，为临床寻找降血糖药物提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料选择由华中科技大学动物实验中心提供的健康清洁级昆明种雄性小鼠60只，重（15±4）g。实验前均给予小鼠标准饲料进行喂养。实验过程中均给予高脂饲料（其中基础饲料占78.8%、胆盐占0.2%、胆固醇占1%、猪油占10%、蛋黄粉占10%）喂养。艾叶提取物购自西安旭煌生物技术有限公司，规格50∶1 TLC，棕黄色粉末。四氧嘧啶购自Sigma公司。链脲佐菌素购自上海艾研生物科技有限公司。实验中测定抗氧化相关指标所用试剂（超氧化物歧化酶、丙二醛）购自南京建成生物工程研究所。

1.2 方法所选60只小鼠随机分为5 组，每组12只，分别为：对照组、模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组。对照组给予小鼠标准饲料喂养，其余4 组小鼠均给予高脂饲料喂养4 周后，禁食不禁水12h，连续3 天给予链脲佐菌素腹腔注射，注射剂量为35mg/kg，继续给予高脂饲料喂养7d，禁食24h后，测定空腹血糖，血糖测定值大于11.0mmol/L 则提示糖尿病小鼠模型建立成功，继续采用高脂饲料喂养。对照组给予同体积生理盐水灌胃，连续应用4 周。模型组造模成功后给予同体积生理盐水灌胃，连续应用4 周。低剂量组、中剂量组、高剂量组在糖尿病模型造模成功后，分别给予艾叶提取物灌胃，剂量分别为0.56g/kg、1.12g/kg、2.24g/kg，连续应用4 周。

1.3 检测指标

1.3.1 测定灌胃4 周后小鼠的空腹血糖、空腹胰岛素及肝糖原水平 连续灌胃4 周后，最后一次给药后对小鼠禁食12h，测定其空腹血糖、空腹胰岛素和肝糖原水平。肝糖原水平测定采用蒽酮比色法。空腹胰岛素水平测定采用放射免疫法测定。

1.3.2 测定各组小鼠超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平 超氧化物歧化酶测定采用黄嘌呤氧化酶法。丙二醛测定采用硫代巴比妥酸法。

1.4 统计学方法采用统计学软件SPSS 19.0 对本研究所得数据进行分析，均数比较采用t检验，各组不同均数比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组小鼠灌胃前后一般情况正常组小鼠灌胃前后无差异行为表现，模型组小鼠糖尿病造模成功后到灌胃实验结束，2只小鼠死亡，可能与长时间高血糖水平有关。高剂量组1只小鼠死亡、中剂量组1只小鼠死亡、低剂量组2只小鼠死亡。

2.2 各组小鼠空腹血糖、空腹胰岛素、肝糖原水平比较模型组空腹血糖水平高于对照组，空腹胰岛素水平与肝糖原水平均低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。高、中、低剂量组的空腹血糖水平分别低于模型组，空腹胰岛素水平与肝糖原水平均分别高于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）。高剂量组空腹血糖水平低于中剂量组，中剂量组空腹血糖水平低于低剂量组，差异有统计学意义（P＜0.05）。高剂量组空腹胰岛素和肝糖原水平高于中剂量组，中剂量组空腹胰岛素和肝糖原水平高于低剂量组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 各组小鼠空腹血糖、空腹胰岛素和肝糖原水平比较

2.2 各组小鼠超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平比较模型组超氧化物歧化酶活性低于对照组，丙二醛水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。高、中、低剂量组的超氧化物歧化酶活性分别高于模型组，丙二醛水平分别低于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）。高剂量组超氧化物歧化酶活性高于中剂量组，中剂量组超氧化物歧化酶活性高于低剂量组，差异有统计学意义（P＜0.05）。高剂量组丙二醛水平低于中剂量组，中剂量组丙二醛水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 各组小鼠超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平比较

3 讨论

糖尿病是胰岛素缺乏所致的代谢紊乱性疾病，主要表现为三多一少症状（多饮、多食、多尿、消瘦）。胰岛素不足或相对不足是导致糖尿病的根源[2]。糖尿病在其慢性发病过程中会产生相关并发症，如糖尿病肾病、糖尿病眼病、糖尿病周围神经病变、糖尿病心脏病等，这些并发症会加速机体衰退[3，4]。糖尿病的有效治疗就是应用相关药物稳定血糖水平，延缓并发症的发生。目前糖尿病患者的血糖控制药物较多，如西药中的胰岛素制剂、口服降糖药物双胍类、黄酰脲类等[5，6]。这些药物作用机制明确，疗效确切，但作用具有单一性，而且长期服用可出现严重程度不一的不良反应，影响患者继续治疗。随着中草药研究深入，中药在糖尿病治疗中有所应用，并不断加强。寻找改善糖尿病患者血糖水平的草药是目前研究的重点之一。

艾叶为菊科蒿属多年生草本植物艾的干燥叶，具有温经止血、散寒止痛的作用。现代药学研究表明[7，8]，艾叶提取物中的成分复杂，包含萜类、黄酮、苯丙素、芳香酸（醛）、甾体及脂肪酸等化学成分。研究认为，艾叶提取物具有镇痛消炎、抗菌、抗病毒作用，还具有抗肿瘤、降血糖及降血压等作用[9～11]。而在对艾叶提取物成分作用的研究中发现，艾叶中咖啡酸酯具有中度抗氧化活性[12～14]。艾叶总多糖、艾叶总黄酮也具有较好的抗氧化活性[15，16]。

本结果显示，高、中、低剂量组的空腹血糖水平分别低于模型组，空腹胰岛素与肝糖原水平均分别高于模型组。说明艾叶提取物有助于改善2型糖尿病小鼠的空腹血糖、空腹胰岛素水平和肝糖原水平，提示艾叶提取物具有一定降血糖作用。高、中、低剂量组的超氧化物歧化酶活性分别高于模型组，丙二醛水平分别低于模型组。说明艾叶提取物能够提高糖尿病小鼠超氧化物歧化酶活性，降低小鼠体内丙二醛水平，提高糖尿病小鼠的抗氧化能力，有助于降低糖尿病小鼠体内脂质过氧化水平，减轻氧化应激对糖尿病小鼠造成的损伤。综上所述，艾叶提取物能够改善2型糖尿病小鼠血糖情况，这种改善血糖作用可能与其抗氧化应激作用有关。