2型糖尿病患者血清Asprosin水平与颈动脉内中膜厚度的关系

夏虹， 李昊翔， 徐梦娇， 赵丽， 郭畅， 朱转转， 李彦彦， 戴梅清，于凡， 杨玲， 王东， 袁国跃

(江苏大学附属医院内分泌代谢科， 江苏 镇江 212001)

糖尿病慢性并发症尤其是大血管病变是导致2型糖尿病患者死亡的常见原因[1]。据统计，2型糖尿病患者心血管疾病的患病率较非糖尿病患者增加2～4倍，约68%的2型糖尿病患者死于心脏疾病[2-3]。动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)与糖尿病大血管并发症紧密相关，是导致其发生发展的主要病理机制。颈动脉内中膜厚度(carotid intima-media thickness, CIMT)可作为AS的早期标志[4]。多种危险因素如糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗、动脉壁内皮细胞损伤、肥胖及吸烟等共同作用导致颈动脉血管硬化斑块的形成。近年来研究发现一些脂肪因子也可能参与了2型糖尿病患者CIMT增厚的发生、发展[5-6]。

Asprosin是近年来新发现的截取Profibrillin的C末端蛋白片段分子，由FBN1基因的第65和66个外显子编码，在白色脂肪细胞中合成并分泌。研究发现Asprosin具有升高血糖、影响脂质代谢功能，其特异性抗体可改善胰岛素抵抗[7-8]。而糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗等是糖尿病大血管并发症发生发展的重要影响因素[9]。目前国内外关于血清Asprosin水平与2型糖尿病患者CIMT关系的研究鲜见报道。本研究探讨2型糖尿病患者CIMT与血清Asprosin水平的关系，以期为糖尿病大血管病变的预防及早期诊治提供新的临床依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2016年8月至2017年12月在江苏大学附属医院内分泌代谢科就诊的2型糖尿病患者99例，均符合WHO(1999)糖尿病诊断标准[10]。根据2011年《血管超声检查指南》标准[11]，分为2型糖尿病合并CIMT增厚(CIMT≥1.0 mm)患者46例(CIMT增厚组)，2型糖尿病CIMT正常(CIMT<1.0 mm)患者53例(CIMT正常组)。排除标准： ① 1型糖尿病、育龄女性服用避孕药物、皮质醇增多症等引起的继发性肥胖和糖尿病； ② 近期有雌激素、糖皮质激素、避孕药、抗精神药等药物服用史及妊娠哺乳史者； ③ 严重肝肾功能不全者； ④ 甲状腺功能异常者； ⑤ 有急性感染及恶性肿瘤史者； ⑥ 临床资料不全者。本研究通过江苏大学附属医院伦理委员会批准。

1.2 资料收集及生化参数测定

详细询问研究对象的姓名、年龄、既往病史及降脂药物使用情况等相关资料。由专业人员测量坐位血压、身高、体重、颈围、腰围和臀围，计算体重指数(BMI)、腰臀比等，其中BMI=体重(kg)/身高2(m2)，腰臀比=腰围(cm)/臀围(cm)。研究对象隔夜禁饮禁食至少10 h后，次日7:00-8:00行口服75 g葡萄糖耐量实验及胰岛素释放实验。采集静脉血，用放射免疫法测定胰岛素水平，葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)，高效液相层析法测定糖化血红蛋白(HbA1c)，酶法测定三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A(ApoA)、载脂蛋白B(ApoB)水平。计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR): FPG(mmol/L)×空腹胰岛素(FINS, mIU/L)/22.5；胰岛功能指数(HOMA-β): 20×FINS(mIU/L)/[FPG(mmol/L)-3.5]；致动脉粥样硬化指数(AIP):lg[三酰甘油(mmol/L)/HDL-C(mmol/L)]。由专人运用彩色多普勒超声诊断仪进行CIMT(血管壁内膜与管腔界面到中膜与外膜界面之间的垂直距离)的测定：选取左右颈动脉膨大下1 cm处进行测量，每处测量3次后取平均值。

1.3 血清Asprosin测定

研究对象隔夜禁饮禁食至少10 h后，采集外周静脉血，离心取上清液，-80℃冰箱冷冻保存。采用江苏菲亚生物公司ELISA试剂盒(批内CV≤10%，批间CV≤15%)测定血清Asprosin浓度。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 两组临床资料和生化指标的比较

与CIMT正常组相比，CIMT增厚组年龄、2型糖尿病病程、CIMT明显升高(P<0.01)。CIMT增厚组血清Asprosin水平明显高于CIMT正常组(P<0.01)。两组间性别、吸烟史、饮酒史、颈围、腰围、臀围、BMI、腰臀比、收缩压、舒张压、三酰甘油、总胆固醇、LDL-C、HDL-C、AIP、FPG、2hPG、HbA1c、ApoA、ApoB差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 2型糖尿病CIMT增厚组和正常组临床资料及生化指标的比较

2.2 血清Asprosin与各观察指标的相关性

相关分析结果显示，2型糖尿病患者血清Asprosin与CIMT、三酰甘油、AIP呈正相关(r分别为0.317、0.266、0.285，P<0.01)；与ApoA呈负相关(r=-0.242，P=0.016)。

2.3 CIMT与各观察指标的相关性

相关分析结果显示，2型糖尿病患者CIMT与年龄、病程、颈围、腰围、收缩压、Asprosin呈正相关(r分别为0.577、0.390、0.203、0.229、0.295、0.317，P<0.05或P<0.01)。

2.4 二元Logistic回归分析

为进一步探讨血清Asprosin水平与CIMT的相关性，以CIMT是否增厚为因变量(增厚=1，不增厚=0)，行二元Logistic 回归分析。结果显示，在校正了年龄、病程、体重、颈围、腰围、臀围、BMI、收缩压、舒张压、FPG、2hPG、三酰甘油、总胆固醇、LDL-C、HDL-C、HOMA-IR以及是否使用降脂药后，血清Asprosin是CIMT增厚的危险因素。见表2。

表2 Logistic回归分析CIMT增厚的相关因素

3 讨论

Asprosin是Romere等[7]研究发现的一种由白色脂肪细胞分泌的蛋白质分子，通过肝细胞G蛋白-cAMP-PKA信号通路上调肝糖合成与释放效率，并由此发挥升高血糖的生理功能；Asprosin也可通过血脑屏障，经cAMP通路激动下丘脑AgRP神经元，抑制下游的POMC神经元，促进食欲，引起脂肪含量及体重增加，影响脂质代谢[8]。本研究结果显示，2型糖尿病CIMT增厚患者血清Asprosin明显高于CIMT正常2型糖尿病患者，且2型糖尿病患者血清Asprosin与三酰甘油呈正相关。Zhang等[12]研究表明，2型糖尿病患者的血清Asprosin水平高于健康人群，2型糖尿病患者血清Asprosin浓度与HDL-C呈负相关，与三酰甘油呈正相关，且三酰甘油是Asprosin升高的独立危险因素。此外，在伴有胰岛素抵抗的肥胖小鼠模型中，经尾静脉注射Asprosin特异性抗体后，小鼠的胰岛素抵抗状态明显改善，而胰岛素抵抗又与2型糖尿病和肥胖发病密切相关[7, 9]。上述研究表明，Asprosin水平对机体糖脂代谢产生重要影响，可能成为2型糖尿病与肥胖潜在的治疗新靶点，但其影响糖脂代谢的具体机制仍需进一步深入研究。

CIMT增厚是早期AS的标志，也是发生心血管系统疾病和卒中风险重要的决定因素[13]。本研究发现2型糖尿病患者血清Asprosin与CIMT呈正相关，且在校正了三酰甘油、HOMA-IR等代谢因素后，血清Asprosin仍为CIMT增厚的危险因素。结果表明除外代谢因素，还可能存在其他机制，参与调节Asprosin对CIMT增厚发生发展的作用，但目前尚无相关报道。朱丽雯等[14]给予心肌损伤小鼠外源性重组Asprosin后，发现其左室射血分数、短轴缩短率显著上升，收缩末期左心室容积明显下降，提示重组Asprosin具有抑制心功能损伤，改善心功能的作用。Asprosin还可降低高糖环境下小鼠心肌细胞丙二醛和活性氧簇水平，调节细胞氧化应激[15]。Acara等[16]研究发现，心肌梗死患者在行冠状动脉造影后24 h，血清Asprosin的变化水平与Syntax评分呈显著相关，并提出Asprosin可能成为一种新的预测急性心肌梗死严重程度的血清标志物。综上，Asprosin与心血管系统疾病密切相关，但相关机制研究尚少。

既往研究显示Asprosin参与影响糖脂代谢与胰岛素抵抗状态的形成[7, 9, 12]，但本研究尚未发现其与FPG、2hPG、HOMA-IR、HOMA-β相关，CIMT与总胆固醇、LDL-C等脂代谢指标也无明显相关性。可能与本研究为横断面研究，且研究对象人数较少，患者使用的降糖、降脂、降压药物、血糖控制水平及糖尿病病程不同有关。故目前Asprosin对2型糖尿病患者心血管并发症的影响机制尚不清晰，仍有待开展多中心、大样本、长期的前瞻性研究。

综上所述，2型糖尿病患者血清Asprosin水平与CIMT呈正相关，且血清Asprosin是CIMT增厚的危险因素，提示Asprosin可能参与2型糖尿病患者大血管病变的发生、发展，但其对2型糖尿病患者心血管并发症影响的具体作用机制亟待更加深入的研究。