“益气调血，扶本培源”药线灸对轻度认知功能障碍患者血清iNOS、GSH-PX的影响

罗本华 黄羽 周路 芮靖琳 陈周婧 王燕 张亚飞

(广西中医药大学 1针灸推拿学院，广西 南宁 530001；2第一临床医学院；3湖南永州职业技术学院；4深圳市第七人民医院；5湖南永州职业技术学院附属医院)

轻度认知功能障碍(MCI)是以记忆障碍或其他认知功能损害为主要特征，介于正常老化和轻度老年痴呆间的状态，但并未影响患者的社会及工作职能，未达到痴呆的诊断标准〔1〕。MCI是痴呆早期诊断研究中最活跃的部分，为痴呆症的防治提供了一个机会〔2〕，是目前获得公认的唯一可以防治、逆转的老年性痴呆类型。中医针灸、民族医药对本病防治做了许多创新，本文旨在探讨“益气调血，扶本培元”壮医药线灸对MCI患者血清诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量的影响及其改善认知功能的抗氧化应激损伤机制。

1 资料与方法

1.1临床资料 选取2015年8月至2017年11月广西中医药大学第一附属医院、仁爱分院和附属瑞康医院健康体检科、神经内科和针灸门诊及社区养老院就诊的年龄60岁以上的MCI患者(n=66，MCI组)，男30例，女36例，平均(64.57±6.84)岁；从1 046例60岁以上健康体检者中随机抽取66例为对照组；两组性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)。MCI组按随机数字表法分成药线灸组和药物对照组各33例；经临床实验脱落后各组均得到30例，药线灸组男12例，女18例，年龄(75.06±7.75)岁，病程(12.68±2.85)；药物治疗组男14例，女16例，年龄(72.06±8.34)岁，病程(14.37±2.64)。两者性别、年龄、病程差异均无统计学意义(P>0.05)。

1.2纳入标准及排除标准 纳入标准：①MCI病例纳入标准采用Petersen等〔1〕制定的标准：有记忆障碍或其他认知障碍且至少持续3个月以上(有家属或知情者证实)；简易精神状态量表(MMSE)〔3〕：中学以上25～27分，小学21～24分，文盲18～20分；记忆力或其他认知功能减退尚未达到痴呆的诊断标准，临床痴呆量表(CDR) 0.5分；日常生活活动基本自理；排除其他可引起脑功能衰退的系统疾病；受试者自愿签署知情同意书；对本研究的意义有正确认识，有良好的依从性；既往能阅读简单的报纸文章，意识清醒，无语言障碍，能配合完成相关量表检查。②对照组纳入标准：为同期医院健康体检科和养老院人员中，除外可能影响认知功能的疾病；均未发现认知功能衰退及日常生活能力损害，不能诊断为痴呆；MMSE 28～30分；CDR为0.0分；无严重心、肝、肾等内科疾患及精神科疾病。排除标准：①据《精神障碍诊断和统计手册》第Ⅳ版标准〔4〕，诊断为老年性痴呆的患者：MMSE检查(中学以上≤24分，小学≤20分，文盲≤17分)；CDR为1.0～2.0分。②血管性痴呆、多发梗塞性痴呆或皮质下动脉硬化性脑病患者；③嗜酒、长期服用抗精神病药物、严重头部外伤史者；④有影响中枢神经系统功能的内科疾病，如甲状腺疾病，贫血，维生素B12缺乏、叶酸缺乏，控制不佳的糖尿病，严重心、肝、肺、肾等脏器疾病者；⑤严重抑郁症、精神分裂症等精神疾病者；⑥不能配合认知功能检查者;⑦生化指标不完善者。

1.3临床干预 ①药线灸组：采用“益气调血，扶本培源”壮医药线灸疗法治疗。取穴：膻中、中脘、气海、血海、足三里、外关。采用2号药线(直径0.5 mm)，按《壮医药线点灸疗法》〔5〕中的施灸方法点灸，轻刺激手法，按“先上后下、先躯干再四肢、先阳后阴”次序点灸以上相应腧穴各3壮。均隔日1次，共15次。②药物对照组：口服盐酸多奈哌齐(批准文号：国药准字H20030583，产品规格：5mg，陕西方舟制药有限公司)，治疗用量5 mg/d，1次/d，晚上睡前口服，疗程为1个月。

1.4检测指标 均于清晨抽取静脉血，分离血清，-20°冰冻备检。MCI组均于治疗前1 d和治疗后1 d各检测血清iNOS、GSH-PX含量，检测方法均为酶联免疫吸附试验，iNOS、GSH-PX试剂盒均购自武汉贝茵莱生物科技有限公司。

1.5统计学方法 采用SPSS16.0软件进行配对样本t检验、独立样本t检验、χ2检验。

2 结 果

2.1MCI组和对照组血清iNOS、GSH-PX比较 MCI组iNOS含量显著高于对照组(P<0.001)，而GSH-PX含量显著低于对照组(P<0.001)。见表1。

表1 两组血清iNOS、GSH-PX含量比较

2.2MCI组临床干预结果 治疗前后两组iNOS、GSH-PX含量组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。两组治疗前后自身比较，血清iNOS含量显著降低、GSH-PX含量显著升高(均P<0.001)。见表2。

表2 治疗前后两组血清iNOS、GSH-Px浓度比较

3 讨 论

MCI就概念及临床表现，应归属于中医学的“健忘”范畴，中医理论认为，情志失畅，多脏腑失调，以致“忆、意、志、思、虑、智”的意识思维活动功能受损，是健忘的主要病因，故多脏腑失调、本虚标实、虚实夹杂是本病病机〔6〕。本实验使用的药线灸干预方法是以老年痴呆为多脏腑失调、上中下三焦多相兼发病的大量病例流行性调查基础上〔7〕，并以痴呆三焦气化失司相关论的新病机观和由此确立的“益气调血，扶本培元”治则〔8〕为基础，结合了具有“养生保健、抗老防衰的悠久历史、卓越功用”的壮医药线灸刺激而成；对延缓和阻止血管性痴呆(VD)和MCI的发生及防治取得成效〔9，10〕。

自由基损伤学说是衰老的公认发病机制，认为衰老过程中的退行性变化是由于在机体组织细胞正常代谢过程中不断产生的自由基积累，结果可与细胞中的各种成分(如膜磷脂、蛋白质、核酸等)发生氧化，造成细胞结构损伤和功能代谢障碍，导致神经性退行性病变发生。体内自由基防御能力随年龄的增长而减弱。自由基损伤学说也是近年来MCI发病机制的研究热点之一。神经变性性疾病与自由基代谢失衡有关〔11〕；GSH-PX是机体内广泛存在的催化过氧化氢分解的一种酶，对细胞膜结构和功能的完整性有保护作用，维持机体内正常的活性氧水平。iNOS是病理型一氧化氮合酶，是影响学习记忆的关键酶，激活后产生大量一氧化氮，引起细胞毒性作用。多奈哌齐是乙酰胆碱酯酶抑制剂，能选择性抑制中枢神经系统中乙酞胆碱的降解，增加神经细胞突触间隙乙酞胆碱浓度，改善认知功能障碍，是目前治疗老年性痴呆、MCI等主要一线治疗用药。研究也证实多奈哌齐能减轻自由基导致的神经变性作用，保护海马神经元免受损伤，达到改善拟VD大鼠的学习、记忆目的。研究发现〔12〕：多奈哌齐对拟痴呆大鼠海马神经元的保护作用机制可能是提高GSH-PX和过氧化氢酶的活性来减轻神经元损伤。Butterfield等〔13〕研究得出蛋白质氧化对MCI向痴呆转化具有重要意义。Pratico等〔14〕发现，与认知功能正常的老年对照组相比较，MCI患者的脑脊液、血浆和尿液中脂质过氧化的增强，也预示其有发展为AD的趋势。故血中GSH-PX、超氧化物歧化酶及iNOS等生化指标含量的变化不仅是反映MCI患者病情的重要指标之一，也可视为MCI的临床疗效评判标准，在MCI的防治中具有重要的意义。本研究提示MCI组存在广泛而明确的氧自由基损伤发病机制；本临床干预实验证实“益气调血，扶本培源”药线灸能显著改善氧自由基损伤，有助于MCI的临床疗效，改善胆碱能神经元认知损伤作用不差于多奈哌齐〔15〕。与刘存志等〔16〕、李谈等〔17〕的“益气调血，扶本培源”针法结果一致。因而，本研究确定该药线灸法具有显著抗MCI氧自由基损伤机制的作用，对于延缓、阻止MCI的发生及MCI的防治具有非常重要的意义，更对整个老年期痴呆的早防早治具有重要社会意义。