大肠杆菌对氨苄青霉素耐药率的Meta分析△

邱立东 朱荣生 黄华泥 徐五星 任 易 陈 军 陈丽峰 周 菁

(湖北省赤壁市人民医院检验科 赤壁 437300)

近年来，抗生素在中国的养猪业得到了广泛的应用，猪的发病率和死亡率得到了有效地控制，但细菌的耐药率也在增长。β-内酰胺类抗生素是用作治疗猪源性大肠杆菌感染的常用一类药物，β-内酰胺类抗生素可分为：青霉素类、头孢菌素类、单酰胺环类、碳青霉烯类和青霉烯类酶抑制剂等[1～2]。β-内酰胺类抗生素的抗菌机制为抑制胞壁的青霉素结合蛋白，从而阻碍细胞壁粘肽合成，使细菌胞壁缺损，菌体膨胀裂解[3]。

为治疗致病性大肠杆菌的感染，养猪场大量使用氨苄青霉素，导致其耐药率增加[4～5]。查阅近十年的文献报道中，从养殖场中分离的大肠杆菌已经逐渐对我国常用的兽药抗生素产生了不同程度的抗药性。然而，在这些报告中，关于大肠杆菌对氨苄青霉素的抗性描述在地区和时间上有些零碎和分散，缺乏系统的对中国大肠杆菌耐药性的总体情况和趋势的研究数据。 因此，本文搜索了数据库中所有关于猪场中分离大肠杆菌的耐药性的文章，并进行了Meta分析。

1 材料与方法

1.1 搜索和选择标准

遵循系统评价和Meta分析(PRISMA)指南首选报告项目，检索了PubMed、EMBASE、EBSCO、ISI Web of Knowledge、中国国家知识基础设施(CNKI)和万方(中国)数据库，以确定2008年1月～2017年12月发布的中国猪分离的大肠杆菌耐药性研究。 检索词如下：“猪”、“耐药性”、“抗生素耐药性”、“β-内酰胺类”、“青霉素类”、“头孢菌素类”、“单酰胺环类”、“碳青霉烯类”、“大肠杆菌”、“猪原性大肠杆菌”、“华中”、“华东”、“华北”、“华南”、“东北”、“西北”、“西南”。在英文文献中，检索词需要添加“中国”，因为英文文献中会汇报其他国家。

1.2 纳入和排除标准

纳入标准为：(1)研究中可获得氨苄青霉素的耐药率；(2)可获得大肠杆菌菌株总数(或可用于计算它们的数据)。 排除标准包括：(1)重复数据的文献;(2)数据不足的文献;(3)评论和摘要里的数据;(4)日期范围之外的大肠杆菌菌株(从2008年1月～2017年12月)；(5)来源于其他国家的大肠杆菌的菌株，而非中国；(6)在耐药性检测前，大肠杆菌菌株通过其他标准预先选择，如含有某些基因；(7)从其他动物中分离的大肠杆菌菌株；(8)来自处理过的食物的数据，例如来自猪场环境的猪肉数据。所选文章和评论的参考文献也通过手动扫描以确定其他符合条件的研究。

1.3 统计分析

使用Microsoft Excel 12.0(Microsoft Co.，Ltd，Washington，USA)进行数据收集，使用Stata 12.0(StataCorp LP，College Station，TX，USA)在该荟萃分析中进行数据处理和统计分析。基于显著异质性的可能性，使用Q检验来估计研究之间的异质性，P<0.05被认为表明具有统计学显著的异质性，根据P值选择随机效应模型(REM)进行Meta分析。使用95%置信区间(CI)和合适的模型计算中国大陆分离的大肠杆菌以及不同省份和年份中β-内酰胺类抗生素耐药性的总发生率。

2 结果

2.1 搜索结果

检索了6个电子数据库，并确定了从2008～2017发表的1610篇文章(图1)。在对标题和摘要进行初步评价后，排除了1501篇不相关和重复的文章，其余文章的全文进行了综述。在93篇文章中，有32篇被排除在外，具体原因有：7篇是综述；6篇的研究样本少于5份；8篇研究使用相同的样本；5篇研究不是来自中国大陆；2篇研究在不同的语言中重复；在4篇研究中提供了不完整的信息。最后，在系统回顾和荟萃分析中纳入了61项研究(图1)。

2.2 不同地区的耐药发生率

从2008年～2017年所选择的出来的文献，通过Meta-分析每篇文献里猪源性大肠杆菌对氨苄青霉素的耐药率。为研究不同地区猪源性大肠杆菌的耐药情况，将文献按照地区进行分类，统计分析结果见表1。

图1 文献筛选过程

表1 氨苄青霉素在地区猪源性大肠杆菌耐药情况

地区耐药性(95%CI)PI-squaredModeln/N华东0.895(0.851～0.939)0.00089.4%REM110/1239华中0.921(0.860～0.981)0.00089.7%REM467/516华南0.790(0.685～0.895)0.00099.2%REM1693/2181华北0.927(0.889～0.965)0.0000.0%REM279/477西北0.768(0.686～0.849)0.00061.6%REM401/537西南0.832(0.808～0.856)0.00098.5%REM1805/2651东北0.822(0.772～0.872)0.0000.0%REM225/274

注：P>0.05表示无明显差异，P<0.05表示有统计学差异，P<0.01表示有显著性差异。I2=0%，表明无异质性；0%

3 讨论

猪源性大肠杆菌是引发猪腹泻的常见的细菌，针对猪原性大肠杆菌，常使用的抗生素为氨苄青霉素[6]。细菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的是由于超广谱β-内酰胺酶的产生，其使药物β-内酰胺环水解而失去抗菌活性[7～8]。细菌耐药性的增加，为养殖场疾病的预防和治疗带来了新的难题。对近10年来我国养殖场猪源致病性大肠杆菌对氨苄青霉素耐药率的分析发现，氨苄青霉素耐药性的高低依次是华北、华中、华东、西南、东北、华南以及西北地区。其中，华北地区耐药性高达92.7%，从地理位置可以看出，适合养猪的地区养殖场较多，其耐药率也会相对其它地区较高。不同地区的两种药物的耐药率均大于60%以上，这说明在使用抗生素时，氨苄青霉素的使用频率较高，导致不同地区对氨苄青霉素的耐药性增加。从统计分析结果来看，不同地区的研究结果存在异质性，这可能是收集的材料以及分析方法不同所导致的，另一方面也说明我国目前还缺乏系统性检测养殖场致病菌耐药率的有效渠道。