1起猪传染性胸膜肺炎的诊断与防治

胡迎东

（江西宜春学院，江西 宜春 336000）

猪传染性胸膜肺炎（Porcine contagious pleuropneumonia，PCP）是由胸膜肺炎放线杆菌 (Actinobacillus pleuropneu-moniae，APP)引起猪的一起以胸膜炎和肺炎为主要特征的高度传染性呼吸道传染病［1］。其病原胸膜肺炎放线杆菌是革兰氏阴性小球杆菌，有时呈线状或多形性，不形成芽孢，有鞭毛，且具运动性。

APP对猪有高度宿主特异性，病原可通过飞沫扩散传播，各阶段猪均对其易感，尤其是断奶仔猪在环境温度、湿度应激下多发，有时会出现急性暴发，引起群发性死亡；而一些慢性感染猪只，会成为APP的无症状隐性带菌者，在生长缓慢的同时成为其他猪的传染源，造成饲料的报酬降低和药物的防制费用增加，给生猪场造成重大的经济损失。近些年来，在我国大多数省市均有报道此病的发生，呈不断上升趋势，APP现已发现有15个血清型，而在不同地区流行的血清型有所差异，主要以1、3、7型为主［2～4］，从而降低了现有多价疫苗的免疫效果，给该病的防控带来了巨大困难。

某猪场仔猪发生疑似猪传染性胸膜肺炎病，根据临床症状、病理变化及细菌分离鉴定，确诊该猪场感染了猪传染性胸膜炎放线杆菌，再通过药敏试验，使用敏感药物使疫情得到有效控制。

1 材料和方法

1.1发病情况

江西某猪场，育肥舍几头育肥猪突然出现食欲废绝，精神萎顿，体温升高至41℃以上，张口伸舌、呼吸困难、呈犬坐姿势，并发生急性死亡，部分病猪临死前从口鼻流出带血性泡沫分泌物，在48～72 d内死亡。

1.2病理变化

对病死猪进行剖检，剖检特征病变主要在胸腔，胸腔内有大量渗出液，出现典型的纤维素性肺炎及胸膜炎，肺炎多呈两侧性，出现肉样变坏死灶；肺脏与胸膜粘连，表面覆有弥漫性纤维素渗出物；切开气管和支气管，发现里面有大量带血色的泡沫状分泌物。

1.3实验室诊断

1.3.1 试剂。山羊血巧克力平板、麦康凯琼脂平板、伊红美兰培养基、改良马丁汤等常用培养基，微量生化反应管、药敏纸片、猪传染性胸膜肺炎抗原及抗体ELISA检测试剂盒、灭活剂、佐剂等购于长沙市佳和生物科技有限责任公司；APP 1、3、5、7、9 型阳性血清购于中国农业科学院兰州兽医研究所；PPLO琼脂和 NAD购于扬州市广陵区全球通实验用品销售中心；TSA培养基购自北京陆桥技术有限公司，含NAD和牛血清的TSA培养基平板、含NAD的兔血培养基平板为实验室自制。

1.3.2 细菌分离培养与生长形态观察。用棉拭子无菌取病死猪的肺部、气管分泌物和胸腔积液涂片，进行革兰氏染色，油镜下观察细菌的形态；并将无菌取的样品接种于普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板及含2%NAD的巧克力培养基，置于5%CO2培养箱和普通恒温培养箱中37℃培养24～36h，观察分离菌在培养基上生长的形态特性。然后挑取可疑菌落(圆形、透明、光滑)进行纯化培养，将分离纯化的菌落进行革兰氏染色镜检。

1.3.3 CAMP试验。用产溶血素的金黄色葡萄球菌在兔血琼脂平板上划一条横线；再取待检的分离菌与前一划线垂直但不相接触的2条直线划线接种，两者相距 0.5～1 mm，37℃培养 24～36 h，观察观察卫星生长现象。

1.3.4 生化试验。将分离菌株分别接种于葡萄糖、阿拉伯糖、乳糖、麦芽糖、棉子糖、蔗糖、麦芽糖、木糖、棉籽糖、果糖、甘露醇、山梨醇、甘露醇枸橼酸钠、脲酶、VR试验、MR试验等微量生化反应管，37℃培养24～48 h，观察和记录试验结果。

1.3.5 药敏试验。采用纸片扩散法检测分离菌对氟苯尼考、氨苄西林、头孢唑肟、复方新诺明、恩诺沙星、链霉素、强力霉素、庆大霉素、林可霉素、卡那霉素等十种抗生素的敏感性。

用灭菌生理盐水将菌落洗脱，均匀涂布在含2%NAD的巧克力培养基平板上，然后将药敏纸片均匀的贴在平皿琼脂表面，每个培养皿上放5个药敏片，置于5%CO2培养箱温箱中，37℃培养24 h后观察结果，测量抑菌环大小，按照抗菌药物的药敏试验判定标准来判定分离菌对上述10种不同抗生素的敏感程度。如果有些抑菌圈过大，无法量取时，需要将单个药敏片放平皿中重复药敏实验。

1.3.6 血清型鉴定。用灭菌生理盐水将纯化培养的菌落洗脱，制成悬液。将纯化培养的分离菌株37℃培养 24 h，用生理盐水洗下，制成生理盐水细菌悬液。 取 1滴APP可疑菌株分别与APP 1、3、5、7、9单因子标准阳性血清均匀混合，按照常规方法进行平板凝集试验，观察结果。

2 结果

2.1形态学检查

病料抹片和分离纯化菌革兰氏染色镜检，结果显示分离菌为革兰氏阴性、多形态的细菌，主要为球杆菌、短杆菌，少量为长丝状或多形性。

2.2细菌培养特性

分离菌在普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板上及普通恒温培养箱不生长；分离菌在5%CO2培养箱、含2%NAD的巧克力培养基上可以生长，菌落呈圆形边缘整齐、露珠状、半透明、针尖大小（1～2 mm），但生长缓慢。

2.3CAMP试验

在两种细菌划线的交界处明显出现的箭头形透明β型溶血区域，离线越远生长越差，结果判断为阳性，能呈现“卫星现象”。

2.4生化试验

分离菌的生化试验结果表1所示。

表1 分离菌生化试验结果

2.5药敏试验

由表2药敏实验结果可知：分离菌对氟苯尼考、头孢唑肟极度敏感；对恩诺沙星、复方新诺明、强力霉素敏感；对氨苄西林、庆大霉素、林可霉素、卡那霉素中度敏感；对链霉素低敏。

表2 药敏实验结果 mm

2.6血清型鉴定

分离的细菌与 APP 3型阳性血清发生强烈的凝集反应，鉴定为血清3型，而与生理盐水和其他血清型的阳性血清未见凝集现象。

2.7确诊

结合流行病学特点、临床症状、病理剖检和实验室检测，确诊这个案例为猪传染性胸膜肺炎。

3 防治措施

3.1药物防治

根据药敏试验结果，针对性的选择敏感药物进行预防、治疗，方案如下：

方案一：对于病情轻微猪群使用氟苯尼考注射液肌内注射（20 mg/kg），每隔 48 h 一次，连用 2～3次。

方案二：受威胁的健康猪群，采用氟苯尼考500 mg+强力霉素300 mg兑水100 kg饮水治疗，白天不间断供药5～7 d，采取上述措施后，疫情得到有效控制。

3.2对病死猪进行无害化处理，加强畜舍卫生管理。

4 小结与讨论

4.1猪传染性胸膜肺炎的发生与环境因素的变化如季节交换、转群等有很大的相关性，所以在生产管理上要做好环境的改善与控制，减少应激的产生。

4.2随着兽药的广泛使用，各猪场的耐药性有所不同，所以一旦猪感染发生传染性胸膜肺炎后，可通过流行病学特点、发病猪的临床症状、剖检病死猪观察病理变化以及实验室检测来确诊，从而筛选出敏感药物，及早采取合理的治疗方案［5］。

4.3疫苗是控制猪胸膜肺炎放线杆菌感染的有效手段，由于猪传染性胸膜肺炎的血清型较多，且无交叉免疫保护性［6］，目前市场上虽有亚单位苗和灭活苗出售，但不能抵抗所有血清型的攻击，不能消除患病动物的带菌状态。所以可根据猪传染性胸膜肺炎的流行病学情况，分离鉴定出特异性的场内猪传染性胸膜肺炎放线杆菌，制备自家苗或组织苗，能很好的控制该病。