子宫内膜癌组织Septin- 9表达变化及其意义

杨爱萍

(青海红十字医院，西宁810000)

子宫内膜癌组织Septin- 9表达变化及其意义

杨爱萍

(青海红十字医院，西宁810000)

目的探讨子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达变化及其临床意义。方法选择子宫内膜癌患者120例(子宫内膜癌组)、子宫内膜不典型增生患者63例(不典型增生组)、子宫肌瘤患者70例(子宫肌瘤组)，分别取手术切除的子宫内膜癌组织、子宫内膜不典型增生组织、正常子宫内膜组织，采用qRT- PCR法检测各子宫内膜组织Septin- 9 mRNA表达。同时分析子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达与患者临床病理参数及预后的关系。结果子宫内膜癌组、不典型增生组、子宫肌瘤组Septin- 9 mRNA相对表达量分别为1.98±0.51、1.64±0.23、1.00±0.00，组间两两比较P均<0.05。子宫内膜癌组Septin- 9 mRNA表达与淋巴结转移、肌层浸润和FIGO分期有关(P均<0.05)，与患者年龄、绝经状态、病理类型及病理分级无关(P均>0.05)。以子宫内膜癌组Septin- 9 mRNA相对表达量的下四分位数为界值，将子宫内膜癌患者分为Septin- 9 mRNA低表达者和Septin- 9 mRNA高表达者。Septin- 9 mRNA高表达者术后5年生存率及总生存时间均低于Septin- 9 mRNA低表达者(P均<0.05)。结论子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达升高，其表达变化可能有助于子宫内膜癌诊断、病情评估及预后预测。

子宫内膜癌；Septin- 9；实时荧光定量PCR；临床病理特征；预后

子宫内膜癌是女性常见的三大恶性肿瘤之一，占女性生殖道恶性肿瘤的20%～30%，近年来其发病率有升高趋势[1]。Septin- 9蛋白是细胞骨架GTP结合蛋白家族的重要成员之一，广泛存在于真核生物中，与细胞骨架重构、囊泡运输以及细胞质分裂等多种生理过程密切相关[2]。近年研究表明，Septin- 9可参与多种恶性肿瘤的发生、发展，如乳腺癌[3]、直肠癌[4]、胃癌[5]等。但Septin- 9与子宫内膜癌发生、发展的关系鲜有报道[6]。本研究分析子宫内膜癌组织Septin- 9表达变化及其与患者临床病理参数和预后的关系。现分析结果并报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 研究对象为2008年1月～2012年1月在青海红十字医院行手术收治的子宫疾病患者253例，其病例资料完整。其中，子宫内膜癌患者120例(子宫内膜癌组)，年龄38～75(54.98±10.75)岁，术前未行任何抗肿瘤治疗；子宫内膜不典型增生患者63例(不典型增生组)，年龄36～72(57.47±13.62)岁；子宫肌瘤患者70例(子宫肌瘤组)，年龄36～80(53.54±12.17)岁。所有患者经术后组织病理检查明确诊断。三组年龄具有可比性。本研究经青海红十字医院医学伦理委员会批准，患者均知情同意。

1.2 子宫内膜组织Septin- 9 mRNA表达检测 采用qRT- PCR法。取三组手术切除的子宫内膜组织，采用TRIzol抽提试剂盒提取组织总RNA，紫外分光光度计检测总RNA浓度和纯度，采用逆转录试剂盒将总RNA逆转录为cDNA，然后进行PCR扩增。引物序列由上海英骏生物技术有限公司设计合成。引物序列：Septin- 9上游引物：5′- CAGAGCGGCTTGGGTAAATCC- 3′，下游引物： 5′- CTCCTCAATATCGTGC-GTGATGG- 3′；GAPDH上游引物：5′- ACAACTTTGGTATCGTGGAAGG- 3′，下游引物：5′- GCCATCACGCCACAGTTTC- 3′。PCR反应体系共20 μL，反应条件：50 ℃孵育2 min，95 ℃ Taq酶活化10 min，95 ℃ 15 s、60 ℃ 1 min共40个循环。所有操作在荧光定量PCR扩增仪(ABI PRISM® 7300，美国ABI公司)上进行。以GAPDH为内参，采用2-ΔΔCt法计算Septin- 9 mRNA相对表达量。

1.3 子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达与患者临床病理参数关系分析 收集子宫内膜癌患者临床病理参数，包括年龄、绝经状态、组织学类型、病理分级、FIGO分期、肌层浸润、淋巴结转移等，分析子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达与患者临床病理参数的关系。

1.4 子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达与患者预后关系分析 收集子宫内膜癌患者随访资料。以子宫内膜癌患者Septin- 9 mRNA相对表达量的下四分位数为界值，将子宫内膜癌组分为Septin- 9 mRNA低表达者(Septin- 9 mRNA相对表达量低于下四分位数)和Septin- 9 mRNA高表达者(Septin- 9 mRNA相对表达量等于或高于下四分位数)，绘制其Kaplan- Meier生存曲线，比较其术后5年生存率和总生存时间。

2 结果

2.1 各组Septin- 9 mRNA相对表达量比较 子宫内膜癌组、不典型增生组、子宫肌瘤组Septin- 9 mRNA相对表达量分别为1.98±0.51、1.64±0.23、1.00±0.00，组间两两比较P均<0.05。

2.2 子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达与患者临床病理参数的关系 子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达与淋巴结转移、肌层浸润和FIGO分期有关(P均<0.05)，与患者年龄、绝经状态、组织学类型及病理分级无关(P均>0.05)。见表1。

表1 子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达 与患者临床病理参数的关系

2.3 子宫内膜癌组织Septin- 9表达与患者预后的关系 随访3～60个月，子宫内膜癌组死亡78例。Septin- 9 mRNA高表达者与Septin- 9 mRNA低表达者术后5年生存率分别为18.75%(12/64)、53.57%(30/56)，总生存时间分别为(33.67±2.59)、(50.55±2.35)个月，Septin- 9 mRNA高表达者术后5年生存率及总生存时间均低于Septin- 9 mRNA低表达者(P均<0.05)。

3 讨论

子宫内膜癌属于上皮性恶性肿瘤，以来源于子宫内膜腺体的腺癌最常见，是女性生殖系统的三大恶性肿瘤之一，其病因迄今尚不明确[7]。手术联合放化疗为目前子宫内膜癌的首选治疗方法[8]，但患者预后并不乐观。故寻求新的治疗和预测预后的靶标是临床研究的热点[9]。

Septin- 9基因是Septin- 9蛋白的编码基因，位于染色体17q25.3，其转录产物可产生18种变异剪切体，编码15种多肽[10]。Septin- 9变异剪切体之间具有一定的核苷酸相似性和氨基酸一致性[11]，且他们的分布具有组织特异性，如Septin- 9 v1分布于除脑和胸腺外的组织[12]，Septin- 9 v2、Septin- 9 v3、Septin- 9 v4多在胎儿组织中表达[13]。Scholz等[14]研究证实，siRNA技术干扰Septin- 9表达可使细胞分裂不完整；Fukushige等[15]研究表明，Septin- 9异常表达可导致细胞极性丢失，从而使细胞癌变的发生风险增加。

本研究结果显示，子宫内膜癌组Septin- 9 mRNA表达显著高于不典型增生组和子宫肌瘤组，且不典型增生组Septin- 9 mRNA相对表达量显著高于子宫肌瘤组。提示随着正常子宫内膜组织向子宫内膜癌组织进展，Septin- 9 mRNA表达逐渐升高，Septin- 9在子宫内膜癌发生、发展过程中可能具有癌基因作用。本研究还发现，子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达与患者年龄、绝经状态、组织学类型和病理分级无关，而与淋巴结转移、肌层浸润和FIGO分期有关，且存在淋巴结转移、肌层浸润深、FIGO分期高的子宫内膜癌患者Septin- 9 mRNA表达相对较高，提示Septin- 9可能与子宫内膜癌的侵袭和转移有关，检测癌组织Septin- 9 mRNA表达有助于判断病情。林春燕等[16]研究发现，Septin- 9能够抑制HIF- 1α蛋白降解，增加血管内皮生长因子的表达，从而促进肿瘤血管形成。这可能是Septin- 9参与子宫内膜癌发生、发展的具体机制。

本研究结果显示，Septin- 9 mRNA高表达者总生存时间较Septin- 9 mRNA低表达者明显缩短，术后5年生存率亦明显降低。提示子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达变化可影响患者预后，Septin- 9 mRNA高表达提示患者预后不良；检测子宫内膜癌组织Septin- 9 mRNA表达将有助于评估子宫内膜癌患者预后。

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