我国不同地方品种鸡(Gallusgallusdomesticus)对柔嫩艾美耳球虫的易感性

李建梅，刘　梅，沈欣悦，程　旭，季正剑，刘丹丹，殷建玫，尤素兰，苏一军，陶建平，戴亚斌*

(1.中国农业科学院家禽研究所，扬州 225125；2.扬州大学兽医学院 禽类预防医学教育部重点实验室，扬州 225009)



我国不同地方品种鸡(Gallusgallusdomesticus)对柔嫩艾美耳球虫的易感性

李建梅1，刘梅1，沈欣悦1，程旭1，季正剑2，刘丹丹2，殷建玫1，尤素兰1，苏一军1，陶建平2，戴亚斌1*

(1.中国农业科学院家禽研究所，扬州 225125；2.扬州大学兽医学院 禽类预防医学教育部重点实验室，扬州 225009)

旨在比较不同品种鸡(Gallusgallusdomesticus)对柔嫩艾美耳球虫的易感性差异。选取26日龄无球虫感染的24个我国地方品种鸡和国外引进品种隐性白羽鸡各45只，分别分为2个感染组和1个非感染对照组，每组15只。感染组每只鸡嗉囊内接种1×105个孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊，基于感染鸡的死亡率、相对增重率、肠道病变记分、卵囊产量和抗球虫指数(ACI)等指标，评价不同鸡种对柔嫩艾美耳球虫的易感性。25个鸡种中，狼山鸡、藏鸡、大骨鸡、萧山鸡、文昌鸡、安义瓦灰鸡、白耳黄鸡、仙居鸡、大围山微型鸡和金湖乌凤鸡易感性最低，ACI介于56.80～85.76，表现为未发生死亡或死亡率低，相对增重率高，肠道病变记分低，但卵囊产量相对较高(藏鸡除外)。隐性白羽鸡、清远麻鸡、惠阳胡须鸡、固始鸡、北京油鸡、瓢鸡和汶上芦花鸡易感性最高，ACI介于-11.64～18.67之间，表现为死亡率较高(北京油鸡除外)，相对增重率较低，肠道病变记分和卵囊产量较高(固始鸡除外)。其余8个品种易感性中等，ACI介于29.81～53.36。不同品种鸡对柔嫩艾美耳球虫的易感性存在较大的差异，且肉用型品种较蛋肉兼用型品种易感性高。

地方鸡种；隐性白羽鸡；柔嫩艾美耳球虫；易感性

鸡球虫病(coccidiosis)是由寄生于肠消化道上皮细胞的艾美耳属(Eimeria)球虫引起的一种寄生性原虫病。在鸡的各类疾病中，球虫病发病率最高，是严重危害养禽业的禽病之一。该病病原有堆型艾美耳球虫(Eimeriaacervulina)、布氏艾美耳球虫(E.brunetti)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、早熟艾美耳球虫(E.praecox)和柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)等7个种[1]，其中柔嫩艾美耳球虫可引起3～6周龄雏鸡发生急性盲肠球虫病，是致病性最强、流行最为普遍的虫种[2]。目前鸡球虫病的防治主要依赖于药物防治和免疫预防，但是由于球虫耐药性虫株的不断出现，以及人们对药物残留问题的日益关注和政府对抗球虫药物的使用限制越来越严格，使得药物防治鸡球虫病面临困境；同时由于球虫生活史复杂，不同虫种间没有或仅有少部分的交叉保护力，即使同种不同虫株间交叉保护效果也不甚明显，因而通过免疫接种途径防治球虫病效果并不显著。因此，迫切需要寻找新的策略来防控该病。近年来，随着寄生虫与宿主间相互作用机制研究不断深入，分子生物学和基因工程技术的不断发展，基于品种(系)本身的抗病遗传特性而选育出抗球虫病鸡种可能会发展成为一种新的球虫病防控手段。鸡品种(系)本身的遗传特性决定了其对一些疾病具有遗传抗性或易感性，比如传染性法氏囊病、马立克病、沙门菌病等[3-6]。国内外的一些研究也证实不同品种(系)鸡在对球虫病的遗传抗性或易感性上存在较大的差异[7-11]。我国拥有丰富的鸡品种资源，其外貌特征、遗传特性、生产性能各异，已成为世界家禽育种优秀的物质资源。较之于引进品种，我国地方鸡种还具有较强的适应性和抗病性。目前，国内研究多限于地方鸡种的遗传多样性及生产性能评价，而在抗病性评价方面鲜有报道。在抗球虫病方面，仅见文昌鸡[10]以及鹿苑鸡、固始鸡、北京油鸡和大骨鸡[11]等我国少数几个地方鸡种的抗柔嫩艾美耳球虫性能评价的报道。为此，本研究对国家级地方鸡种基因库(江苏)保存的25个品种鸡的抗柔嫩艾美耳球虫性能进行评价，旨在筛选出在球虫遗传抗性上具有明显差异的鸡种，为球虫与宿主之间的相互作用机制深入研究以及抗球虫病育种素材选择奠定良好的工作基础，同时进一步丰富我国地方鸡种质资源的基础资料，为它们优良性状基因的挖掘和利用提供依据。

1　材料与方法

1.1试验动物

1日龄清远麻鸡、瓢鸡、固始鸡、惠阳胡须鸡、琅琊鸡、茶花鸡、汶上芦花鸡、狼山鸡、北京油鸡、河南斗鸡、泰和鸡、安义瓦灰鸡、大骨鸡、金湖乌凤鸡、文昌鸡、淮南麻鸡、仙居鸡、边鸡、鹿苑鸡、萧山鸡、寿光鸡、白耳黄鸡、大围山微型鸡、藏鸡和隐性白羽鸡等25个鸡种(Gallusgallusdomesticus)由国家级地方鸡种基因库(江苏)提供，其中隐性白羽鸡原产于法国，属快大型白羽肉鸡，其余24个鸡种均为我国地方鸡种。出壳后运回实验室，饲养在无球虫的环境中，饲喂不含任何抗球虫药的全价饲料。试验开始前，采用常规方法镜检有无球虫卵囊，确认无球虫卵囊污染后，方可用于试验。

1.2试验虫株

柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊由扬州大学兽医学院寄生虫教研室保存。

1.3试验设计与分组

25日龄时将所有试验鸡逐只称重并编号，挑选体况相近的各品种鸡各45只，分为2个感染组和1个非感染对照组，每组15只。感染组和非感染对照组分笼饲养，感染组每只鸡经嗉囊接种1 mL(含1×105个)柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊悬液，非感染对照组每只鸡接种PBS 1 mL。接种后每天观察鸡的精神状态、饮欲、食欲、粪便与发病情况。对死亡鸡立即进行称重和剖检，确定是否死于球虫病。感染后6～8 d，每天2次分别收集各组的全部粪便，用麦克马斯特法(McMaster’s method)进行卵囊计数。接种后第8天末，称重并剖杀所有存活鸡，取盲肠，观察肠道病变并记分，同时取盲肠及其内容物，匀浆并用胃蛋白酶消化，采用麦克马斯特法对匀浆中的卵囊数量进行计数。

1.4评价指标

1.4.1血便记分参照N.F.Morehouse等[12]的标准进行评分，即从感染后第4天开始，每天2次观察各组鸡血便数。按24 h内平均每只鸡血便数最多的一次进行记分，记分标准：粪便正常记0分；1、2、3堆血便分别记1、2、3分，4堆以上记4分。

1.4.2死亡率接种柔嫩艾美耳球虫卵囊后，观察记录各组死亡鸡数，并进行剖检以确定是否死于盲肠球虫病。死亡率=(试验结束时每组死亡鸡数÷试验开始时每组鸡数)×100%。

1.4.3相对增重率相对增重率=(感染组平均增重÷非感染对照组平均增重)×100%。

1.4.4病变记分肠道病变记分参照J. Johnson和W.M. Reid[13]的标准。两侧盲肠病变不一致时，以严重的一侧为准。盲肠正常并且无肉眼病变，记0分；盲肠壁有很少量散在淤血点，但肠壁不增厚，内容物正常，记1分；盲肠壁增厚，盲肠内容物明显带血，病变数量较多，记2分；盲肠内容物多量带血或有盲肠芯，盲肠壁肥厚明显，记3分；盲肠因充满大量血液或肠芯而明显肿大，外观呈酱色，记4分。死于球虫病鸡记4分。

1.4.5抗球虫指数(ACI)ACI=(相对增重率+成活率)-(病变值+卵囊值)。其中，成活率=(试验结束时每组存活的鸡数÷试验开始时每组鸡数)×100 %；病变值=平均病变记分×10；卵囊值参照文献的计算方法[11]，即把收集的各感染组感染后6～8 d粪中卵囊数与该组盲肠剖检消化后匀浆内卵囊数相加，分别求出每组每只鸡的平均卵囊数，按标准扣分[14]。判定标准：ACI≥180判为高抗，160～179判为中抗，<160判为易感。

1.5数据处理与分析

用SPSS软件对各品种鸡的感染组和非感染对照组数据进行t检验；对各品种间体重及肠道病变记分数据进行单因素方差分析；对各品种间死亡率进行Fisher’s检验；对死亡率、相对增重率、肠道病变记分、ACI值等数据进行相关分析(P<0.05)。

2　结　果

2.1临床观察

各感染组鸡自感染后第4天起先后表现典型的临床症状，表现为精神不振、饮食欲下降、喜扎堆。有的鸡翅下垂、缩头闭眼、羽毛逆立、排鲜红色血便，有的甚至出现死亡，剖检感染后第4～5天死亡的鸡盲肠肿大呈暗红色，肠腔内充满红色血液和脱落的黏膜碎片，黏膜溃疡出血。感染5 d以后死亡的鸡剖检发现盲肠内容物逐渐变黏稠，至感染后第7天开始形成盲肠芯，内有凝血及充满干酪样的物质，肠壁增厚，有的内有出血点。试验期间，各品种鸡非感染对照组中除一只寿光鸡死亡外，其余试验鸡在整个试验期间精神状态良好、饮欲食欲正常。死亡的寿光鸡经剖检确认并非死于球虫病。试验结束时对各非感染对照组进行粪检，均未见球虫卵囊。

2.2血便记分

所有品种鸡的感染组均于感染后第4天始有血便排出，其中仙居鸡、文昌鸡、固始鸡早在感染后3.5 d即排出血便。除狼山鸡血便高峰期为感染后第6天外，其余品种鸡均为感染后第5天。不同品种鸡排血便严重程度存在差异。从血便高峰期(24 h内)平均血便堆数来看，固始鸡最多(11.43堆·只-1)，藏鸡和鹿苑鸡最少(3.53和3.84堆·只-1)，其余各品种介于与4.07～9.38堆·只-1之间(图1)。按照血便记分标准，除藏鸡和鹿苑鸡分别记3.53和3.84分外，其余品种皆记4分。试验期间，所有品种鸡的非感染对照组均无血便排出。

图1　血便高峰期平均每只鸡血便数Fig.1　Mean number of bloody stool of per chicken on peak day

2.3死亡率

试验结果显示，不同品种鸡间的死亡率存在较大差异。隐性白羽鸡死亡率最高(40%)，其次为瓢鸡(33.33%)；藏鸡、白耳黄鸡和大围山微型鸡等3个品种未见死亡；其它品种鸡的死亡率为3.33%～30%(图2)。藏鸡、白耳黄鸡和大围山微型鸡的死亡率与瓢鸡、隐性白羽鸡、清远麻鸡、固始鸡和惠阳胡须鸡差异显著(P<0.05)，与其余品种无显著差异(P>0.05)；鹿苑鸡、萧山鸡、寿光鸡死亡率与除固始鸡、瓢鸡、清远麻鸡和隐性白羽鸡外的品种差异不显著(P>0.05)；大骨鸡、金湖乌凤鸡、文昌鸡、淮南麻鸡、仙居鸡、边鸡和安义瓦灰鸡等的死亡率与瓢鸡和隐性白羽鸡差异显著(P<0.05)，与其余品种差异不显著(P>0.05)；泰和鸡、斗鸡、北京油鸡、狼山鸡的死亡率与除隐性白羽鸡外的品种差异不显著(P>0.05)。此外，不同品种鸡在死亡时间上也有一定的差异。在出现死亡的25个品种中，隐性白羽鸡、瓢鸡、汶上芦花鸡、固始鸡等于感染后第4天即开始出现死亡，河南斗鸡和北京油鸡为第6天，狼山鸡和安义瓦灰鸡为第7天，而金湖乌凤鸡则在第8天才出现死亡，其余品种均为第5天。

图2　各品种鸡感染球虫后的死亡率Fig.2　Mortality of different chicken breed after inoculating E.tenella

2.4相对增重率

攻虫前，同一品种鸡感染组与非感染对照组间平均体重相近，差异不显著(P>0.05)，但不同品种鸡间平均体重差异显著(P<0.05)，其中大围山微型鸡、茶花鸡、白耳黄鸡、固始鸡、泰和鸡、清远麻鸡、藏鸡等体重显著低于隐性白羽鸡、寿光鸡、鹿苑鸡、惠阳胡须鸡、淮南麻鸡、萧山鸡、大骨鸡、瓢鸡、文昌鸡、琅琊鸡、边鸡、汶上芦花鸡、金湖乌凤鸡等(P<0.05)。试验结束时，琅琊鸡和狼山鸡感染组与非感染对照组间平均体重无显著差异(P>0.05)，其余各品种鸡感染组与非感染对照组间差异显著(P<0.05)(表1)。

25个品种鸡中狼山鸡和文昌鸡相对增重率最高，达60.0%以上，惠阳胡须鸡、北京油鸡、隐性白羽鸡、固始鸡、清远麻鸡、汶上芦花鸡和边鸡等相对增重率低于10.0%，其余品种鸡介于11.82%～47.39%之间(表1)。

表1相对增重率

Table 1Relative weight gain rate

品种Breed组别Group初始体重(x-±s)/gInitialbodyweight(g)终末体重(x-±s)/gFinalbodyweight(g)平均增重(x-±s)/gMeanweightgain(g)相对增重率/%Relativeweightgainrate(%)隐性白羽鸡RecessivewhiteI283.00±11.69a290.23±17.53a7.23±8.63a4.36C261.45±16.27a427.15±29.43b165.70±13.98b100清远麻鸡QingyuanpartridgeI149.00±4.07a146.40±10.31a3.88±2.81a5.00C146.33±13.44a223.89±21.93b77.56±9.23b100瓢鸡PiaoI231.15±8.19a246.67±8.87a15.52±4.85a11.82C247.67±14.34a379.00±26.64b131.33±14.71b100固始鸡GushiI146.57±10.34a143.71±11.31a4.00±1.32a4.74C144.44±7.19a228.78±9.26b84.33±3.27b100惠阳胡须鸡HuiyangbeardedI254.30±6.43a254.33±8.45a0.03±4.50a0.03C245.10±8.57a351.55±13.87b106.45±7.12b100琅琊鸡LangyaI214.70±3.50a247.90±12.72a33.20±12.40a38.69C215.90±17.39a301.70±28.77a85.80±11.66b100茶花鸡ChahuaI127.40±2.99a138.00±5.81a10.60±6.69a19.83C127.89±7.77a181.33±12.89b53.44±8.85b100汶上芦花鸡WenshangbarredI199.40±4.63a205.40±12.76a6.00±10.77a7.38C199.78±8.54a281.11±13.55b81.33±6.72b100狼山鸡LangshanI175.40±4.01a219.80±11.31a44.40±10.24a61.76C166.00±13.18a237.89±22.56a71.89±10.33b100北京油鸡BeijingoilI180.60±5.76a176.90±10.88a4.50±1.80a0.67C178.90±7.66a245.70±13.91b66.80±7.07b100河南斗鸡HenangameI180.78±7.27a190.33±6.70a9.56±4.50a15.24C181.40±5.26a244.10±7.57b62.70±4.84b100

(转下页 Carried forward)

I.感染组；C.非感染对照组。同列数据标有不同字母者差异显著(P<0.05)I.infected group；C.control group.Means followed by the different letters within the same column are different significantly (P<0.05)

2.5病变记分

各品种鸡感染组中，白耳黄鸡肠道病变记分最低，为1.60，其次为河南斗鸡(1.70)；隐性白羽鸡最高，为3.60；淮南麻鸡、边鸡、寿光鸡、北京油鸡、惠阳胡须鸡、清远麻鸡、瓢鸡、汶上芦花鸡等肠道病变也较严重，为3.1～3.4，其余品种鸡为2.1～2.9。

白耳黄鸡肠道病变记分与河南斗鸡和仙居鸡相比，差异不显著(P>0.05)，与其余品种鸡相比差异显著(P<0.05)；隐性白羽鸡肠道病变记分显著高于除琅琊鸡、固始鸡、淮南麻鸡、边鸡、寿光鸡、北京油鸡、惠阳胡须鸡、清远麻鸡、瓢鸡和汶上芦花鸡等以外的其余品种鸡(P<0.05)(图3)。所有品种鸡的非感染对照组肠道均未见明显病变。

柱上无相同字母者差异显著(P<0.05)Bars with no common letters differ significantly (P<0.05)图3　各品种鸡感染球虫后的平均肠道病变记分Fig.3　Mean lesion score of different chicken breed after inoculating E.tenella

2.6卵囊产量

所有品种鸡感染组均有卵囊排出，根据扣分标准，卵囊值皆为40，但不同品种鸡的卵囊产量差异较大(图4)。固始鸡、琅琊鸡、茶花鸡、藏鸡的卵囊产量较低，低于17.2×106个·只-1，而鹿苑鸡、瓢鸡、惠阳胡须鸡等卵囊产量较高，分别为106.2×106、190.3×106、264.8×106个·只-1。大围山微型鸡、仙居鸡、边鸡、寿光鸡为22.7×106～ 28.7×106个·只-1；安义瓦灰鸡、河南斗鸡、金湖乌凤鸡、大骨鸡、白耳黄鸡、汶上芦花鸡、清远麻鸡、萧山鸡、泰和鸡为31.5×106～ 39.8×106个·只-1；狼山鸡和北京油鸡分别为46.2×106和49.1×106个·只-1；文昌鸡为58.6×106个·只-1；隐性白羽鸡为68.1×106个·只-1；淮南麻鸡为79.4×106个·只-1。试验期间，各品种鸡非感染对照组均无球虫卵囊排出。

2.7ACI

所有品种鸡的ACI值均低于160(图5)，按照评判标准，均属对球虫易感，但不同品种鸡间ACI值差异较大，表明不同品种鸡对球虫的易感程度存在较大的差异。在所有试验品种中隐性白羽鸡ACI值最低，为负值，表明其易感性最高。其余24个品种的ACI值高低依次为狼山鸡、文昌鸡、大骨鸡、安义瓦灰鸡、萧山鸡、金湖乌凤鸡、白耳黄鸡、藏鸡、仙居鸡、大围山微型鸡、鹿苑鸡、琅琊鸡、河南斗鸡、泰和鸡、寿光鸡、茶花鸡、淮南麻鸡、边鸡、北京油鸡、汶上芦花鸡、固始鸡、瓢鸡、惠阳胡须鸡、清远麻鸡。

2.8相关性分析

血便堆数、死亡率、肠道病变记分、相对增重率、卵囊产量、ACI等各项评价参数的相关性分析结果显示：血便堆数与死亡率、肠道病变记分、卵囊产量、相对增重率、ACI等评价指标间并无相关关系；死亡率与肠道病变记分显著正相关，相关系数为0.54；与相对增重率低度负相关，相关系数为-0.44；卵囊产量与血便堆数、死亡率、肠道病变记分、相对增重率、ACI等评价参数间并无明显的相关性；ACI与死亡率和肠道病变记分呈显著负相关，相关系数分别为-0.79和-0.62，与相对增重率高度正相关，相关系数达0.88。

图4　各品种鸡感染球虫后的卵囊产量Fig.4　Oocyst production of different chicken breed after inoculating E.tenella

图5　各品种鸡抗球虫指数Fig.5　Anticoccidial index (ACI) of different chicken breed

3　讨　论

本研究选用由国家级地方鸡种基因库(江苏)保存的25个品种鸡进行了柔嫩艾美耳球虫感染试验，基于血便记分、死亡率、相对增重率、病变记分、卵囊产量、ACI值等指标，探讨了不同品种鸡对球虫的易感性差异。

所有品种鸡感染柔嫩艾美耳球虫后均表现出盲肠球虫病典型的血便症状，但不同品种鸡血便严重程度(包括排血便的开始时间、血便数量和持续时间)存在一定程度的差异，这可能是因柔嫩艾美耳球虫在不同品种鸡体内裂殖生殖阶段裂殖体形成时间、裂殖子逸出速度、裂殖生殖代次不同所致。总体来看，血便严重程度与死亡率、肠道病变记分、卵囊产量、相对增重率等各项评价指标间并无相关关系。固始鸡排血便时间最早，血便数量最多，但卵囊产量却较低。金湖乌凤鸡和汶上芦花鸡血便持续时间较短，但汶上芦花鸡死亡率、肠道病变记分却较高。因此，虽然血便严重程度在一定程度上可间接反映不同品种间易感性上的差异，但一般不以此作为评判指标，仅将其视为感染发病的依据。

目前，国内外研究工作者主要是采用死亡率、增重、平均肠道病变记分和卵囊产量等4个指标评价不同品种(系)鸡对球虫的易感性。理论上讲，这4个指标间应有很强相关性，即：死亡率、肠道病变记分和卵囊产量三者之间呈正相关关系，而它们均与增重呈负相关。但在实际试验中，结果并不尽然。其中，死亡率和增重的经济意义较高，是在抗病性评价中不可或缺的2个指标。M.H.Pinard-Van Der Laan等[7]根据鸡感染柔嫩艾美耳球虫后的死亡率、增重和肠道病变记分等指标比较了2个埃及品系(Mandarah和Fayoumi)、1个洛岛红品系和2个白莱航品系(WLB21和WLDW)等5个远交品系鸡对球虫的抗性或易感性，证实不同品系间对柔嫩艾美耳球虫的抗性存在较大的差异，其中Fayoumi系鸡抵抗力最强，感染后未发生死亡，肠道病变记分低，增重较对照组仅下降了30%；WLDW系鸡最易感，感染球虫后死亡率达27%，增重较对照组下降了85%；并认为感染鸡增重与死亡率和肠道病变记分呈负相关关系。本研究中相对增重率与死亡率间低度负相关，而与肠道病变记分并无相关关系。然而，N.Bumstead和B.Millard[8]根据死亡率、增重和卵囊产量评价了7个近交品系鸡对柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫的遗传抗性。虽然不同品系间死亡率、增重和卵囊产量差异很大，但死亡率并不与增重呈负相关，也就是说死亡率高的品系并不是增重最低的品系，表明增重不宜单独作为抗性选择指标。

肠道病变记分反映了球虫对鸡肠道的生理性损害程度，通常认为是评价不同品种(系)鸡对球虫易感性或抗性的一个良好指标。一些研究结果表明柔嫩艾美耳球虫感染鸡的肠道病变记分与增重呈负相关[7，15-16]，而D.P.Conway等[17]、L.A.Caron等[9]研究了不同鸡种感染柔嫩艾美耳球虫后其增重和肠道病变记分之间的关系，发现二者之间负相关性很弱。本研究中，肠道病变记分与相对增重率间无明显的负相关。隐性白羽鸡、汶上芦花鸡、清远麻鸡、北京油鸡及惠阳胡须鸡等平均肠道病变记分与相对增重率间呈负相关，但在大多数品种鸡中相关性较差。如白耳黄鸡和斗鸡平均肠道病变记分最低，相对增重率并不高。此外，本研究中肠道病变记分与死亡率显著正相关。如清远麻鸡、瓢鸡、惠阳胡须鸡、固始鸡、隐性白羽鸡死亡率较高，其肠道病变记分也较严重。

卵囊产量体现了球虫在动物体内的繁殖能力，间接反映鸡对球虫易感程度，也是评价不同品种(系)鸡对球虫的易感性的一个重要指标。S.Lee等[18]和D.K.Kim等[19]研究表明卵囊产量与增重负相关，而N.Bumstead和B.Millard[8]、D.F.Zhang等[20]则发现两者无相关性，本研究结果支持后者的观点。固始鸡、琅琊鸡、茶花鸡卵囊产量较低，但固始鸡死亡率较高，而相对增重率较低；狼山鸡和文昌鸡相对增重率较高，卵囊产量也较高；此外，卵囊产量与肠道病变记分之间也不完全正相关。如：隐性白羽鸡肠道病变记分最高，但卵囊产量却并不是最高；白耳黄鸡和斗鸡肠道病变记分最低，但卵囊产量却较高。由于卵囊计数在不同时间间隔内存在很大的变异性，因此以卵囊产量作为评价不同品种(系)鸡对鸡球虫感染的易感性或抗性的指标也存在一定的局限性[21]。

鉴于评价指标间相关性分析以及试验结果的复杂性，本研究中作者引入抗球虫指数(ACI)作为评价不同品种(系)鸡对柔嫩艾美耳球虫的易感性或抗性的指标，以期达到全面、准确评价不同品种(系)鸡对球虫易感性的目的。ACI综合了存活率、增重、肠道病变、卵囊产量、粪便记分等多项参数，通常认为是评价鸡球虫耐药性或药物效力的最可靠的指标[20，22]。但是，不同的研究者在计算ACI时所采用的参数指标、计算方法和评定标准不尽相同。本研究根据目前国内外通行的方法，采用存活率、增重、病变记分和卵囊产量等4个参数计算ACI，据此评价不同品种(系)鸡对鸡球虫的易感性或抗性。结果所有参试品种鸡的ACI均低于160，表明它们对球虫均易感，但不同品种间ACI差异较大，说明它们在对球虫的易感程度上存在较大的差异。

本研究基于ACI值，可将25个品种鸡对球虫的易感性分为三个层次。狼山鸡、藏鸡、大骨鸡、萧山鸡、文昌鸡、安义瓦灰鸡、白耳黄鸡、仙居鸡、大围山微型鸡和金湖乌凤鸡等10个品种的易感性低，表现为ACI值较高，未发生死亡或死亡率低，相对增重率较高，肠道病变记分较低，但除藏鸡外卵囊产量均较高。隐性白羽鸡、清远麻鸡、惠阳胡须鸡、固始鸡、北京油鸡、瓢鸡和汶上芦花鸡等7个品种的易感性高，表现为ACI值较低，除北京油鸡外死亡率较高，相对增重率较低，除固始鸡外肠道病变记分和卵囊产量均较高。其余8个品种的易感性中等。

4　结　论

不同品种鸡对柔嫩艾美耳球虫的易感性存在较大差异。在参试的25个品种中，狼山鸡、藏鸡、大骨鸡、萧山鸡、文昌鸡、安义瓦灰鸡、白耳黄鸡、仙居鸡、大围山微型鸡和金湖乌凤鸡等品种易感性低，而隐性白羽鸡、清远麻鸡、惠阳胡须鸡、固始鸡、北京油鸡、瓢鸡、汶上芦花鸡等品种易感性高。

研究结果还表明，隐性白羽鸡、清远麻鸡、惠阳胡须鸡等肉用型品种较蛋肉兼用型品种易感，且以引进品种隐性白羽鸡易感性最高，这从一定程度上反映出我国地方鸡种具有较强的抗病力。不同品种鸡对球虫感染易感性差异的原因可能与鸡种本身遗传背景密切相关，如先天性免疫应答能力、机体免疫因子、生化遗传标记及生长繁殖性能等。

[1]MCDOUGALD L R.Intestinal protozoa important to poultry[J].PoultSci，1998，77(8)：1156-1158.

[2]ZHANG L，LIU R，MA L，et al.Eimeriatenella：expression profiling of toll-like receptors and associated cytokines in the cecum of infected day-old and three-week old SPF chickens[J].ExpParasitol，2012，130(4)：442-448.

[3]HASSAN M K，AFIFY M，ALY M M.Susceptibility of vaccinated and unvaccinated Egyptian chickens to very virulent infectious bursal disease virus[J].AvianPathol，2002，31(2)：149-156.

[4]ZEKARIAS B，TER HUURNE A A，LANDMAN W J，et al.Immunological basis of differences in disease resistance in the chicken[J].VetRes，2002，33(2)：109-125.

[5]MALEK M，HASENSTEIN J R，LAMONT S J.Analysis of chicken TLR4，CD28，MIF，MD-2，and LITAF genes in aSalmonellaenteritidisresource population[J].PoultSci，2004，83(4)：544-549.

[6]WIGLEY P.Genetic resistance toSalmonellainfection in domestic animals[J].ResVetSci，2004，76(3)：165-169.

[7]PINARD-VAN DER LAAN M H，MONVOISIN J L，PERY P，et al.Comparison of outbred lines of chickens for resistance to experimental infection with coccidiosis (Eimeriatenella)[J].PoultSci，1998，77(2)：185-191.

[8]BUMSTEAD N，MILLARD B.Genetics of resistance to coccidiosis：Response of inbred chicken lines to infection byEimeriatenellaandEimeriamaxima[J].BrPoultSci，1987，28(4)：705-715.

[9]CARON L A，ABPLANALP H，TAYLOR R L Jr.Resistance，susceptibility，and immunity toEimeriatenellain major histocompatibility (B) complex congenic lines[J].PoultSci，1997，76(5)：677-682.

[10]韩新畴.文昌鸡、AA鸡、海兰鸡和三黄鸡对柔嫩艾美耳球虫易感性研究[J].中兽医医药杂志，2007，41(1)：39-40.

HAN X C.Study on susceptibility of Wenchang，AA，Hyline and three buff chickens toEimeriatenellainfection[J].JournalofTraditionalChineseVeterinaryMedicine，2007，41(1)：39-40.(in Chinese)

[11]窦新红，童海兵，许明，等.不同品种地方鸡对柔嫩艾美球虫的易感性分析[J].畜牧与兽医，2009，41(12)：7-9.

DOU X H，TONG H B，XU M，et al.Susceptibilities of four local breeds of chickens toEimeriatenellainfection[J].AnimalHusbandry&VeterinaryMedicine，2009，41(12)：7-9.(in Chinese)

[12]MOREHOUSE N F，BARON R R.Coccidiosis：evaluation of coccidiostats by mortality，weight gains，and fecal scores[J].ExpParasitol，1970，28(1)：25-29.

[13]JOHNSON J，REID W M.Anticoccidial drugs：lesion scoring techniques in battery and floor-pen experiments with chickens[J].ExpParasitol，1970，28(1)：30-36.

[14]索勋，李国清.鸡球虫病学[M].北京：中国农业大学出版社，1998.

SUO X，LI G Q.Coccidia and Coccidiosis of Domestic Fowl[M].Beijing：China Agricultural University Publishing House，1998.(in Chinese)

[15]MEDAROVA Z，BRILES W E，TAYLOR R L Jr.Resistance，susceptibility，and immunity to cecal coccidiosis：effects of B complex and alloantigen system L[J].PoultSci，2003，82(7)：1113-1117.

[16]SWAGGERTY C L，GENOVESE K J，HE H，et al.Broiler breeders with an efficient innate immune response are more resistant toEimeriatenella[J].PoultSci，2011，90(5)：1014-1019.

[17]CONWAY D P，MCKENZIE M E，DAYTON A D.Relationship of coccidial lesion scores and weight gain in infections ofEimeriaacervulina，E.maximaandE.tenellain broilers[J].AvianPathol，1990，19(3)：489-496.

[18]LEE S，LILLEHOJ H S，PARK D W，et al.Effects of Pediococcus-and Saccharomyces-based probiotic (MitoMax®) on coccidiosis in broiler chickens[J].CompImmunolMicrobiolInfectDis，2007，30(4)：261-268.

[19]KIM D K，LILLEHOJ H S，HONG Y H，et al.Immune-related gene expression in two B-complex disparate genetically inbred Fayoumi chicken lines followingEimeriamaximainfection[J].PoultSci，2008，87(3)：433-443.

[20]ZHANG D F，SUN B B，YUE Y Y，et al.Anticoccidial activity of traditional Chinese herbal Dichroa febrifuga Lour.extract againstEimeriatenellainfection in chickens[J].ParasitolRes，2012，111(6)：2229-2233.

[21]REID W M.Relative value of oocysts counts in evaluating anticoccidial activity[J].AvianDis，1975，19(4)：802-811.

[22]WANG Z，SHEN J，SUO X，et al.Experimentally induced monensin-resistantEimeriatenellaand membrane fluidity of sporozoites[J].VetParasitol，2006，138(3-4)：186-193.

(编辑白永平)

The Susceptibility of Chinese Indigenous Chicken Breeds (Gallusgallusdomesticus) toEimeriatenellaInfection

LI Jian-mei1，LIU Mei1，SHEN Xin-yue1，CHENG Xu1，JI Zheng-jian2，LIU Dan-dan2，YIN Jian-mei1，YOU Su-lan1，SU Yi-jun1,TAO Jian-ping2，DAI Ya-bin1*

(1.PoultryInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Yangzhou225125，China；2.MinistryofEducationKeyLaboratoryforAvianPreventiveMedicine，CollegeofVeterinaryMedicine，YangzhouUniversity，Yangzhou225009，China)

This study was conducted to investigate the difference in susceptibility toEimeriatenellainfection among different chicken breeds (Gallusgallusdomesticus).Twenty-six-day-old，coccidia-free chickens of 24 Chinese indigenous chicken breeds and one commercial breed，recessive white，were divided into two infected groups and one non-infected control group randomly，15 chickens each group.The infected groups were inoculated into crop with 1×105sporulatedE.tenellaoocysts per bird.The mortality，relative rate of weight gain，cecal lesion scores，oocyst production and anticoccidial index (ACI) were measured as parameters for evaluation of the susceptibility of different breeds.Among 25 breeds，Langshan，Tibetan，Big bone，Xiaoshan，Wenchang，Anyi tile-like，Buff baier，Xianju，Daweishan mini and Jinhu silky chickens appeared clearly as the least susceptible，with the ACIs ranging from 56.80 to 85.76，showing no death or lower mortality，lower lesion score and higher relative rate of weight gain than other breeds，though higher oocyst production was found in those breeds except Tibetan chicken.Recessive white，Qingyuan partridge，Huiyang bearded，Gushi，Beijing oil，Piao and Wenshang barred chickens were the most susceptible with the ACIs ranging from -11.64 to 18.67，showing higher mortality (except Beijing oil chicken)，lower relative rate of gain，higher lesion scores and higher oocysts production (except Gushi chicken) than other breeds.The rest of the 8 breeds showed moderate susceptibility with the ACIs ranging from 29.81 to 53.36.There are significant differences in the susceptibility toE.tenellainfection among different chicken breeds.And the meat type breeds showed higher susceptibility than eggs and meat breeds.

Chinese indigenous chicken breed；recessive white chicken；Eimeriatenella；susceptibility

10.11843/j.issn.0366-6964.2016.10.019

2016-04-25

国家重点研发计划重点专项(2016YFD0501600)；江苏省重点研发计划(现代农业)重点项目(BE2016347)；江苏省动物预防医学重点实验室开放课题(K13042)

李建梅(1985-)，女，白族，云南大理人，助理研究员，硕士，主要从事家禽寄生虫病的防治研究，E-mail: jianmeili157@sina.com

戴亚斌，E-mail：ybdai@163.com

S852.723;S855.9

A

0366-6964(2016)10-2098-10