缺血性脑卒中患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2水平的测定及研究

陈伟明 文学 林涛 陈志健 罗德宏 庞文冲

[摘要] 目的 分析不同时期缺血性脑卒中患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）水平变化及其临床意义。 方法 将本院2012年1月～2015年2月神经内科收治的100例缺血性脑卒中患者根据疾病所处时期分为急性期组（22例）、恢复期组（60例）及后遗症期组（18例），同时将同期健康体检者100例设为健康对照组，比较不同组别年龄、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及Lp-PLA2浓度的差异，采用Logistic分析法分析动脉粥样硬化的危险因子。 结果 ①缺血性脑卒中患者TC、HDL-C及LDL-C水平与健康对照组比较，差异有统计学意义（P均<0.05）；急性期组、恢复期组及后遗症期组的TC、HDL-C及LDL-C比较，差异无统计学意义（P均>0.05）。②缺血性脑卒中患者外周血清Lp-PLA2浓度高于健康对照组（P<0.05），且病程越短差异越明显。③经Logistic分析法分析得知，TC、LDL-C及Lp-PLA2均是导致动脉粥样硬化的危险因素。④Lp-PLA2浓度变化与年龄不具相关性，与吸烟、TC、LDL-C成正相关。 结论 Lp-PLA2可成为预测动脉斑块形成的重要因子，其浓度变化与缺血性脑卒中病程长短具有良好相关性。

[关键词] 缺血性脑卒中；血浆脂蛋白相关磷脂酶A2；预测

[中图分类号] R743.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2016）03（a）-0061-04

[Abstract] Objective To analyze the change of plasma lipoprotein associated phospholipase A2（Lp-PLA2） level in ischemic stroke patients（ACI） at different stage and its clinical meaning. Methods 100 patients with ischemic stroke in our neurology department from January 2012 to February 2015 were divided into acute stage group（n=22），convalescence group（n=60） andsequelae stage（n=18） according to disease period that they located.100 healthy examined patients at the same time were selected as control group.The difference of age，total cholesterol （TC），high-density lipoprotein（HDL-C），low-density lipoprotein（LDL-C） and Lp-PLA2 concentration between two groups were compared.The risk factors of atherosclerosis were analyzed by using Logistic analysis method. Results ①TC，HDL-C and LDL-C in ischemic stroke patients had statistical significance difference compared with that in control group （P<0.05）；TC，HDL-C and LDL-C among acute stage，convalescence and sequelae stage had no statistical significance（P>0.05）.②Lp-PLA2 concentration in peripheral blood of ischemic stroke patients was higher than that of the control group（P<0.05），and with the shorter course of disease，the difference was more obvious.③Logistic analysis method showed that all of TC，LDL-C and Lp-PLA2 were risk factors that leaded to atherosclerosis.④There had no relationship between Lp-PLA2 concentration change，but had positive relationship with smoking，TC and LDL-C. Conclusion Lp-PLA2 can be an important factor to predict the formation of artery plaque and its concentration change has better relationship with illness course of ACI.

[Key words] Ischemic stroke patients；Plasma lipoprotein associated phospholipase A2；Prediction

動脉粥样硬化是缺血性脑卒中最重要的病因和危险因素，更有学者视其为缺血性脑卒中的前兆，动脉硬化程度可通过颈动脉硬化情况进行评估。有文献[1]显示，颈动脉斑块与心脑血管事件具有显著相关性，因此通过研究颈动脉硬化的危险因素可达到防治缺血性脑卒中的目的。脂蛋白相关磷脂酶A2（lipoprotein-phospholipase A2，Lp-PLA2）是磷脂酶的重要亚型，源自巨噬细胞及淋巴细胞，大量文献证实其对动脉粥样硬化具有明显触发效应[2]。然而目前尚未有相关文献分析不同病程与Lp-PLA2的关系，本课题为此进行一系列研究，具体情况如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院2012年1月～2015年2月神经内科收治的100例缺血性脑卒中患者，其中男性66例，女性34例，年龄（61.15±7.99）岁，病程3个月～4年，平均（12.78±3.2）个月。根据病程长短将其分为急性期组（22例）、恢复期组（60例）及后遗症期组（18例）。选择同期本院健康体检者100例设为健康对照组，其中男性59例，女性41例，年龄（58.82±9.23）岁，各组在年龄、性别方面比较，差异无统计学意义（P均>0.05），具有可比性。本研究方案经医院伦理学委员会审查批准，所有受试对象均知情同意。

1.2 纳入标准

①符合2010年《中国急性缺血性脑卒中诊治指南》关于脑卒中的诊断标准，并经CT或MRI证实的患者；②无感觉、失语及认知功能障碍者；③无其他精神、神经系统疾病者；④自愿参加本研究项目者。

1.3排除标准

①出血性脑卒中、梗死后脑出血者；②腔隙性脑梗死、无症状性脑梗死者；③动脉炎所致的脑梗死者；④有明确栓子来源的脑栓塞，包括房颤、感染性心内膜炎、空气、脂肪、癌细胞等者；⑤先天发育异常所致的脑梗死，如血管畸形或动脉瘤等者；⑥各种凝血机制异常及高黏血症所致的脑梗死者；⑦严重心、肝、肾及血液系统疾病，自身免疫性疾病等者；⑧临床及生化资料不完善者。

1.4 检测方法

1.4.1 Lp-PLA2濃度检测 收集各组空腹、无菌条件下用无肝素真空采血管采集的肘静脉血5 ml，在4℃ 14 000 r/min条件下离心5 min，用高压枪头吸取离心后的上清液，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测，操作步骤严格按照说明书进行，试剂盒由天津康尔克生物科技有限公司提供，显色后采用492 nm波长，TMB反应产物检测需要450 nm波长。检测时首先进行空白孔系统调零，用测定标本孔的吸收值与一组阴性标本测定孔平均值的比值（P/N）表示。以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

1.4.2 总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）检测 收集各组空腹、无菌条件下用无肝素真空采血管采集的肘静脉血5 ml，分置于常规非抗凝生化管中，以3000 r/min离心10 min，收集上层血清，置于-80℃冰箱冷冻保存备用。采用酶法测定血浆TC，化学遮蔽法测定HDL-C，LDL-C。

1.5 统计学处理

采用SPSS 16.0统计软件对数据进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示。先使用Shapiro-Wilk test对数据正态性进行检测，并用Levene test分析方差齐性。采用χ2检验或LSD-t检验，将P<0.05的因素进行Logistic分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 缺血性脑卒中组与健康对照组基本资料的比较

缺血性脑卒中患者TC、HDL-C及LDL-C与健康对照组比较，差异有统计学意义（P均<0.05）（表1）。

2.2缺血性脑卒中患者不同发病时期基本资料的比较

缺血性脑卒中患者不同发病时间的TC、HDL-C、LDL-C及性别比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表2）。

2.3 各组Lp-PLA2/内参（IOD比值）的比较

缺血性脑卒中患者外周血清Lp-PLA2浓度高于健康对照组（P<0.05），且随着发病时间延长差异越明显（表3，图1）。

2.4 Logistic回归分析

经过Logistic分析法分析后得知TC、LDL-C、Lp-PLA2是导致动脉粥样硬化的危险因素（表4）。

2.5 Pearson相关性分析

Lp-PLA2浓度变化与年龄不具相关性，与吸烟、TC、LDL-C成正相关，与HDL呈负相关（表5）。

3 讨论

动脉粥样硬化是导致缺血性脑卒中的危险因素，动脉粥样硬化促使机体无法及时清除生成的自由基，导致自由基在体内浓度堆积，激活一些可损害细胞的物质，导致细胞过早、过度凋亡[3-4]。在此过程中一氧化氮（NO）浓度应激性升高，进一步导致加速血流活性物质的下降，使得过多的胆固醇及脂质代谢产物在血管内堆积而形成斑块，随着血管壁的逐渐增厚，管腔空间逐渐缩小甚至完全堵塞，导致脑血管事件发生。Lp-PLA2作为一种炎性因子被认为与动脉粥样硬化具有密切关系，Lp-PLA2的主要合成场所在巨噬细胞、单核细胞、淋巴细胞，其浓度分泌受白介素等炎症介质的调控。Lp-PLA2主要与脂蛋白颗粒相结合而存在于血液循环中，其中3/4与低密度脂蛋白相结合，余下的1/4与高密度脂蛋白及极低密度脂蛋白相结合，在机体脂质代谢中占据重要位置[5-7]。有研究人员[8-14]通过动物实验证实，动脉粥样硬化模型大鼠外周血清及斑块Lp-PLA2的蛋白及mRNA浓度均明显上调，Ninio从单核苷酸多态性的角度阐述了Lp-PLA2的基因多态性确与动脉粥样硬化的发生具有正相关性；Dohi T等[15]也认为，通过Lp-PLA2的正反馈效应可以加速动脉粥样硬化进程，且发现其浓度的上调可进一步导致血栓形成及缺血性事件的发生。本研究结果显示，缺血性脑卒中患者外周血Lp-PLA2浓度高于健康对照组，提示Lp-PLA2通过促进动脉粥样硬化的形成而导致缺血性脑卒中的发生。随后的相关性分析显示，Lp-PLA2浓度变化与年龄不具相关性，与吸烟、TC、LDL-C成正相关，与HDL呈负相关，提示Lp-PLA2是动脉粥样硬化甚至是缺血性脑卒中的预报因子。

本研究结果显示，TC、HDL-C、LDL-C指标是动脉斑块硬化的危险因子，于此同时，通过Logistic分析法得知Lp-PLA2亦是导致动脉斑块硬化的危险因素。研究不同发病时期患者，结果显示，随着病程的延长Lp-PLA2活性逐渐下降，随着病程的延长患者病情逐渐稳定，提示Lp-PLA2可作为评估患者病情稳定性的指标。

本研究仅凭患者病情时期做为分组的标准，并未进行随机分组，结果可能在一定程度上存在偏倚，另一方面可能与此次入选样本量较小有关，故有待增加样本量，进一步扩大研究予以证实Lp-PLA2导致缺血性脑卒中的明确机制，为指导临床治疗提供参考价值。

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（收稿日期：2015-10-12 本文编辑：王红双）