顶空气相色谱法测定地奈德中有机溶剂残留量

徐 岩

(天津市儿童医院，天津 300050)

顶空气相色谱法测定地奈德中有机溶剂残留量

徐 岩

(天津市儿童医院，天津 300050)

目的：建立顶空气相色谱法测定地奈德中有机溶剂残留量。方法：采用Agilent DB-WAX毛细管柱(30 m×0.25 mm，0.50 μm)；氮气为载气，流速为1.5 ml/min；分流比为5∶1；进样口温度为200 ℃；FID检测器，检测器温度为250 ℃；程序升温：初始温度40 ℃，保持10 min，然后以20 ℃/min升温至200 ℃，保持5 min。顶空进样，平衡温度为80 ℃，平衡时间为25 min；以二甲基亚砜为溶剂，外标法测定地奈德中甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷的残留量。结果：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷均能得到良好的分离，空白溶剂无干扰，检测浓度在所考查的范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 2～0.999 9)；平均回收率为98.4%～100.6%，甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和氯仿检测限分别为0.30、0.50、0.15、0.15、0.05和0.60 μg/ml。结论：本试验建立的色谱方法简便、准确，适合地奈德原料中有机溶剂残留量的检测。

地奈德，残留溶剂，顶空气相色谱法

药品中的残留溶剂是指原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂[1〗，服用后对人体有毒性和致癌作用。地奈德(desonide)是一种糖皮质激素，通过SFDA网上查询，本品只有重庆H公司1家企业生产，在现行各国药典中均未收载。目前，现行国家药品标准为WS1-(X-145)-2012Z，仅对丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷4种溶剂的残留量进行了控制。该原料的制备工艺中还使用了甲醇和乙醇2种溶剂，尤其乙醇用于地奈德粗品提纯，有必要对其进行控制。本文根据国家药典委员会2014年国家药品标准提高工作的要求，并参考相关资料，对地奈德质量标准中残留溶剂项进行修订，建立了顶空气相色谱法同时测定地奈德中甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷6种有机溶剂残留量，方法快速、灵敏，结果准确、可靠。

1 仪器与试药

Agilent 7890A气相色谱仪，Agilent G1888全自动顶空进样系统，Chemistation工作站，地奈德原料(重庆H公司，批号DES-20131001，DES-20130701，DES-20130601R)，二甲基亚砜，甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷均为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 对照品溶液 分别精密称取甲醇0.75 g、乙醇1.25 g、丙酮0.75 g、乙醚0.25 g、乙酸乙酯0.75 g和二氯甲烷0.015 g置装有适量二甲基亚砜的50 ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液1 ml置装有适量二甲基亚砜的50 ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释到刻度，摇匀，即得。

2.1.2 供试品溶液 精密称取本品0.5 g，置20 ml顶空瓶中，加入二甲基亚砜5 ml，密封，即得。

2.2 色谱条件及系统适用性 色谱柱：Agilent J&W DB-WAX毛细管柱(30 m×0.25 mm，0.50 μm)；载气为氮气，流速为1.5 ml/min；程序升温：柱温40 ℃，保持10 min，以20 ℃/min速度升温至200 ℃，保持5 min；进样口温度：200 ℃；FID检测器温度：250 ℃；分流比5∶1。顶空进样，平衡温度为80 ℃，平衡时间为25 min；进样量1 ml。在上述色谱条件下，对照品溶液、供试品溶液及空白溶剂色谱图见图1。结果空白溶剂二甲基亚砜不干扰残留溶剂的测定，各溶剂峰的分离度均符合要求。

1.乙醚 2.丙酮 3.乙酸乙酯 4.甲醇 5.乙醇 6.三氯甲烷 7.二甲基亚砜

2.3 线性关系考查 分别精密量取对照品贮备液用二甲基亚砜逐步稀释，获得一系列浓度的对照溶液，精密量取5 ml置20 ml顶空瓶，按“2.2”项下色谱条件测定，以对照品溶液浓度C(μg/ml)为横坐标，峰面积A为纵坐标，进行线性回归。甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷回归方程及线性范围见表1。

表1 回归方程及线性范围

2.4 检测限及定量限的测定 将对照品溶液用二甲基亚砜逐步稀释，进行测定，以基线噪音的3倍计算，甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷的检测限分别为0.3、0.5、0.15、0.15、0.05和0.6 μg/ml；以基线噪音的10倍计算，甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷的定量限分别为0.6、1.0、0.3、0.3、0.1和2.4 μg/ml。

2.5 精密度试验 精密量取“2.1.1”项下对照品溶液5 ml共6份，分别置20 ml顶空瓶中，密封，依法测定，计算甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷峰面积的RSD分别为3.2%、2.8%、1.7%、1.7%、3.8%和4.9%，精密度良好。

2.6 重复性试验 取地奈德样品(批号DES-20131001)0.5 g共6份，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，依法测定；同法测定“2.1.1”项下对照品溶液，按外标法计算残留溶剂量。结果样品中含甲醇为0.002%，RSD为1.4%；乙醇为0.08%，RSD为0.86%；丙酮为0.000 3%，RSD为2.1%；乙醚为0.000 05%，RSD为1.7%；乙酸乙酯与二氯甲烷均未检出。

2.7 加样回收率试验 分别精密称定样品(批号DES-20130601R，已知残留溶剂含量)0.5 g，共9份，分别置顶空瓶中，分别精密加入对应浓度的对照溶液5 ml各3份，摇匀，制成相当于检查限度60%、80%和100%的低、中、高浓度的供试品溶液。分别测定，按外标法计算回收率(n=9)，结果见表2。

2.8 样品测定结果 按“2.1.2”项下方法制备3批样品的供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件测定，同法测定对照品溶液，按外标法以峰面积计算各样品中有机溶剂残留量，结果见表3。甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷的限度分别为0.3%、0.5%、0.3%、0.3%、0.1%和0.006%。3批样品均符合规定。

表2 地奈德残留溶剂回收率结果

表3 地奈德残留溶剂测定结果

3 讨论

3.1 试验考查了不同厂牌的色谱纯或分析纯的二甲基亚砜，对地奈德的有机溶剂残留量的测定均无干扰。见图2。

1.二甲基亚砜

3.2 地奈德质量标准有机溶剂残留检查增加甲醇和乙醇均有必要性，尤其乙醇用于地奈德原料粗品的提纯，最终很难被完全去除，样品的测定结果也较高。

3.3 试验考查了100%二甲基聚硅氧烷、6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷等不同填料的毛细管色谱柱进行分析，只有交联聚乙二醇柱分离效果最佳，6种溶剂均能达到基线分离。

1 中国药典[S].二部.2010:附录61

欢迎订阅《天津药学》杂志

本刊主要栏目：专论、实验研究、药品质量与检验、药物与临床、药物经济学、综述、医药工业、中药、药物制剂、安全用药、医药管理等。

《天津药学》杂志为双月刊，双月28日出版，全年6期，每册定价10元，全年60元。《天津药学》杂志国内外公开发行，国内统一刊号CN12-1230/R，国际标准刊号ISSN1006-568，国内邮发代号6-175，欢迎医药卫生单位及个人到当地邮局订阅。如漏订可通过邮局汇款至杂志社(定价不变)，由编辑部负责邮寄。

《天津药学》杂志社地址：天津市和平区沙市道同康里3-502

邮政编码：300051 电话：(022)23346705

电子邮箱：tjyaoxue@126.com

欢迎广大医药卫生科技人员踊跃投稿！

Determination of residual solvents in desonide by headspace GC

Xu Yan

(Tianjin Children＇s Hospital, Tianjin 300074)

Objective：To establish a method of headspace capillary gas chromatography for the determination of residual solvents in desonide. Methods：The residual solvents in desonide were separated by Agilent DB-WAX capillary (30 m×0.25 mm，0.50 μm) column with an FID detector. Nitrogen was used as carried gas and the flow rate of the gas was 1.5 ml/min. The injector temperature and the detector temperature were controlled at 200 ℃ and 250 ℃,respectively. The programmed column temperature was maintained at 40 ℃ for 10 min and then raised to 200 ℃ at the rate of 20 ℃/min followed by holding for 5 min. Dimethyl sulfoxide (DMSO) was used as solvent. The containers of headspace injector were balanced at 80 ℃ for 25 min. Results：The detected solvents were separated completely. The calibration curve of each solvent showed a good linear relationship (r=0.999 2～0.999 9) with good precision and accuracy. The average recovery was in the range of 98.4%～100.6%. The LOD of methanol, ethanol, acetone, ethyl acetate，diethyl ether and trichloromethane was 0.30、0.50、0.15、0.15、0.05和0.60 μg/ml, respectively.Conclusion：The established method is both simple and accurate，and can be used for the determination of residual solvents in desonide.

desonide，residual solvents，headspace gas chromatography

2015-11-02

R917

A

1006-5687(2016)01-0012-03