脐疗对腹泻型肠易激综合征模型大鼠影响的实验研究*

王陆军，于岩瀑，高树中，马玉侠△

(1.山东中医药大学，济南 250014;2.解放军94370部队医院，济南 250021)

脐疗对腹泻型肠易激综合征模型大鼠影响的实验研究*

王陆军1，2，于岩瀑1，高树中1，马玉侠1△

(1.山东中医药大学，济南 250014;2.解放军94370部队医院，济南 250021)

目的:探讨隔药灸脐法对腹泻型肠易激综合征模型大鼠的影响效应。方法:将大鼠按随机数字表法分为5组，除空白对照组外，其余4组均建立IBS-D模型。空白对照组与模型组不做任何治疗，其余组分别采用隔药灸脐法、药物敷贴法、艾条灸脐法进行治疗。对各组大鼠症状、结肠运动及肠道敏感性进行评估并比较各组差异。结果:在改善IBS-D模型大鼠症状、结肠运动及肠道敏感性方面，隔药灸脐组、药物敷贴组、艾条灸脐组均优于模型组，隔药灸脐组优于药物敷贴组和艾条灸脐组。结论:隔药灸脐法、药物敷贴法、艾条灸脐法能够改善IBS-D模型大鼠症状、结肠运动及肠道敏感性，且隔药灸脐法疗效最佳。

腹泻型肠易激综合征;脐疗;结肠运动;肠道敏感性

肠易激综合征(irritable bowel syndrome，IBS)是一种常见的肠道功能紊乱性疾病。IBS在全球的发病率为10% ～20%［1］，其中腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome，IBSD)最为常见［2］，其发病率约占IBS的1/3［3-5］。西医治疗IBS-D的公认药物包括解痉药、止泻药及5-羟色胺受体拮抗剂等，往往对症治疗，不能缓解IBS-D患者的整体症状。脐疗为中医外治方法之一，治疗IBS-D具有简便廉验捷等优点。前期大量临床研究发现，脐疗治疗IBS-D的疗效明显优于治疗IBS-D的一线药物得舒特(匹维溴铵)。为系统评估脐疗治疗IBS-D疗效，验证隔药灸脐法的优效性，通过动物实验对脐疗前后IBS-D模型大鼠的症状、结肠运动及肠道敏感性等直观指标进行系统评价，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物

选用清洁级健康SD雄性大鼠50只，体质量(400±20)g，由山东中医药大学实验动物中心提供。所有大鼠自由取食和饮水，明暗周期为12 h/12 h，环境温度18～24℃，湿度(60±10)%，保持笼内垫料清洁，适应性喂养1周。

1.2 主要实验试剂

冰乙酸500 ml，国药集团化学试剂有限公司。

1.3 主要药物

白术、茯苓、丁香、白芍、五倍子等，将药物按比例超微粉碎混合，密封备用。

1.4 分组与造模

将大鼠适应性喂养1周后按随机数字表法分为空白对照组、模型组、隔药灸脐组、药物敷贴组、艾条灸脐组5组各10只。除正常组外，其余各组建立IBS-D模型。造模前24 h大鼠禁食不禁水，乙醚麻醉后经肛门插入连接注射器的硅胶管(距肛门8 cm)，结肠内灌入40 ml/L的乙酸1 ml，缓慢拔出硅胶管，用手压迫肛门并将大鼠尾巴抬高30 s，后用0.01 mmol/L磷酸盐缓冲液(PBS)1 ml冲洗结肠［6］，放回笼中自由活动进食水，于第7天行束缚应激，每天用宽透明胶带束缚前肩、前上肢及胸部，限制其搔抓头面部［7］，束缚时间2 h，连续束缚7 d。以最能反映大鼠结肠运动的粪便含水量［8］及大鼠肠道敏感性的腹壁撤退反射(abdominal withdrawal reflex，AWR)评分［9］均高于正常组(P＜0.05)为造模成功的标准。

1.5 处理方法

各组分别治疗10 d后进行评估与检测:空白对照组与模型组不做任何治疗，仅做与各脐疗组同步的抓取和固定;隔药灸脐组将大鼠仰卧固定，用75%的乙醇常规消毒神阙穴(根据类比原理，大鼠的神阙穴定位在胸腹正中线，胸骨柄上缘至外生殖器连线的上3/4与下1/4交界处［10-11］)，以温开水调面粉成圆圈状(内径约0.5 cm)置于大鼠神阙穴上，将备好的药末(约3 g)均匀地填至神阙穴，将艾炷(直径约0.5 cm，高约0.5 cm)置于药末上施灸。连续施灸3壮约20 min。灸后保留药末，用医用无纺布敷贴固封神阙穴处，解除束缚24 h后揭下，隔日治疗1次;药物敷贴组无需艾灸，将备好的药末(约3 g)均匀地敷于神阙穴，用医用无纺布敷贴固封于神阙穴处，大鼠固定20 min后解除束缚。术前准备与术后操作同隔药灸脐组;艾条灸脐组无需放置药物，用纯艾条施灸，将大鼠固定施灸20 min后解除束缚。术前准备与术后操作同隔药灸脐组。

1.6 评估指标

观察大鼠实验前后精神状态和皮毛色泽的变化;体质量增长率［12］;排便情况:单只大鼠关入笼内，笼内垫滤纸，观察4 h内大鼠排便的粪点数;粪便含水量［13］:先称量粪便湿质量，然后将粪便放入烘干箱烘干至质量不再变化，此时即为干质量，湿质量与干质量之差除以湿质量即为粪便含水量;AWR测定(每只大鼠用温水给予球囊扩张3次，容量分别为1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml，每次扩张持续20 s，间隔30 s)［14］。评分标准［15］:0分:大鼠对结肠扩张时无行为反应;1分:结肠扩张时身体静止不动，头部运动减少;2分:结肠扩张时腹肌收缩但未抬离桌面;3分:结肠扩张时腹肌收缩并抬离桌面;4分:结肠扩张时骨盆抬起，身体呈弓状。

1.7 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件进行统计分析，检测结果以均数±标准差(±s)表示，2组间采用t检验，多组间差异显著性采用单因素方差分析，用Student-Newman-Keuls或 Duncan’s new multiple range method进行组间两两比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。

2 结果

2.1 各组大鼠一般情况

实验后空白对照组大鼠体型健硕，精神状态良好，皮毛光泽柔顺，无脱落;模型组大鼠体型相对消瘦，在非束缚状态下精神萎靡、束缚状态下狂躁、皮毛晦暗无光泽、鼠毛竖立易脱落、稀便甚至沾染尾根部，仍呈现IBS-D症状特点;各治疗组大鼠情绪较平和、皮毛较光泽柔顺、脱落减少。其中隔药灸脐组症状改善最显著，且在治疗过程中该组大鼠始终表现安静，无烦躁与抬头现象。

2.2 各组大鼠体质量增长率、排便情况、粪便含水量

表1 实验后各组大鼠体质量增长率、排便情况、粪便含水量比较(±s)

表1 实验后各组大鼠体质量增长率、排便情况、粪便含水量比较(±s)

注:与空白对照组比较:*P＜0.05;与模型组比较:△P＜0.05;与隔药灸脐组比较:#P＜0.05

组 别鼠数体质量增长率(%) 4 h内排便点数(点)粪便含水量(%)空白对照组10 43.85±0.62 0.60±0.52 28.46±2.72模 型 组 10 18.43±0.64* 5.70±0.48* 71.78±3.65*隔药灸脐组 10 42.05±1.12△ 0.80±0.42△ 29.80±2.03△药物敷贴组 10 21.54±0.88＊△# 4.30±0.48＊△# 40.27±1.69＊△#艾条灸脐组 10 22.34±0.58＊△# 4.20±0.42＊△# 39.03±1.67＊△#

表1显示，在改善IBS-D模型大鼠体质量增长率、4 h内排便点数、粪便含水量方面，隔药灸脐法、药物敷贴法、艾条灸脐法均有疗效(P＜0.05);隔药灸脐组疗效最明显，治疗后与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);药物敷贴组与艾条灸脐组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.3 各组大鼠腹壁撤退反射(AWR)

表2 实验后各组大鼠AWR评分(分，±s)

表2 实验后各组大鼠AWR评分(分，±s)

注:与空白对照组比较:*P＜0.05;与模型组比较:△P＜0.05;与隔药灸脐组比较:#P＜0.05

组容量(ml) 1.0 1.5 2.0空白对照组(分)别1.00±0.67 1.70±0.48 2.70±0.48模型 组 (分 ) 2.40±0.70* 3.20±0.42* 3.90±0.32*隔药灸脐组(分) 1.10±0.57△ 1.80±0.42△ 2.80±0.42△药物敷贴组(分) 1.70±0.48＊△# 2.90±0.32＊△# 3.30±0.48＊△#艾条灸脐组(分) 1.70±0.48＊△# 2.80±0.42＊△# 3.20±0.42＊△#

表2显示，在改善IBS-D模型大鼠肠道敏感性方面，隔药灸脐法、药物敷贴法、艾条灸脐法均有疗效(P＜0.05);隔药灸脐组疗效最明显，治疗后与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);药物敷贴组与艾条灸脐组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

3 讨论

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)属于中医学“泄泻”范畴，其发病机制尚不十分明确。中医学认为，泄泻的发生与感受外邪、脾胃虚弱、饮食不节、情志失调、年老体弱有关，其病位在肠，与脾、胃、肝、肾等脏腑关系密切。脐疗是中医外治法的一种，是以脐(神阙穴)为用药或刺激部位，以激发经气、疏通经络、促进气血运行、调节人体阴阳与脏腑功能，从而防治疾病的一种方法。前期研究发现，脐疗能够明显降低IBS患者的5-HT、组胺、血管活性肠肽及P物质的水平而治疗疾病［16］。在本研究中，IBS-D模型大鼠呈现出精神异常、胃肠动力异常及肠道高敏感性等状态。脐疗治疗后大鼠各效应指标均有改善，且隔药灸脐法效果最明显。本实验中，隔药灸脐法具有穴位艾灸和药物作用以及三者的综合作用，药物敷贴法具备药物作用和穴位作用，艾条灸脐法包括穴位作用和艾灸作用。

从解剖结构看，神阙穴表皮角质层最薄，渗透力强，药物分子较易通过皮肤的角质层迅速弥散入血而通达全身。脐部靠近腹腔和盆腔，此处有植物神经的主要神经丛及神经节存在，支配腹腔和盆腔内所有的脏腑器官。因此各种刺激作用于神阙穴时，能够激活神经免疫机制，从而发挥抗炎、增强免疫力的功能［17］。此外，神阙穴与整体联系广泛。神阙穴通过经络系统与小肠、大肠、脾、胃、肝、肾相通，刺激神阙穴，使脾主运化、肝主疏泄、肾阳温煦、小肠泌别清浊、大肠传导功能恢复，使泄泻自止。

艾叶主治心腹冷痛、泄泻久痢。脐疗所用的艾绒虽为灸材，但“外治之药即内治之药”，它在治疗过程中发挥重要的药理作用。艾灸是以燃烧艾绒而治病，燃烧时产生的热效应是一种良性治疗因素，作用于穴位，不仅刺激穴位表层，而且能深入温煦脏腑，调节小肠、大肠、脾、胃、肝、肾而达治疗泄泻之效。

清·吴师机《理瀹骈文》曰:“外治之理即内治之理，外治之药即内治之药，所异者法耳。”白术味苦、辛、性温，能健脾益气、燥湿利水;茯苓味甘、淡、性平，有利水渗湿、健脾和胃之效;丁香味辛、性温，有温中、暖肾之功;白芍味苦、酸、性微寒，具有缓急止痛之效;五倍子味酸、涩、性寒，有涩肠之功。所选之药皆有健脾利湿、柔肝暖肾、涩肠止泻之品，诸药合用，标本兼顾，力专效宏，达止泻之效。

本研究中隔药灸脐法疗效最明显，体现了穴位、艾灸、药物三者综合应用的优势。艾灸、药物对穴位的刺激可激发穴位的治疗作用，加之艾灸、药物本身对疾病的调节，穴位、艾灸、药物三者相辅相成，在触发、调动和增强机体自组织能力的前提下共奏健脾利湿、柔肝暖肾、涩肠止泻之功，其实质是一种综合调节作用。

综上，隔药灸脐法、药物敷贴法、艾条灸脐法均能改善IBS-D模型大鼠的症状、结肠运动及肠道敏感性，而隔药灸脐法疗效最佳。

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Experimental Study on the Effect of Umbilical Therapy on Diarrhea Type in the Irritable Bowel Syndrome Model Rats

WANG Lu-jun1，2，YU Yan-pu1，GAO Shu-zhong1，Ma Yu-xia1△
(1.Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Shandong Jinan 250014，China; 2.PLA 94370 Hospital Shandong Jian 250021，China)

Objective:To investigate the effect of herb-partition moxibustion on the navel of treating diarrheapredominant irritable bowel syndrome(IBS-D).Methods:The rats were randomly divided into 5 groups.In addition to the normal group，the other 4 groups were set up the model of IBS-D.The normal group and the model group were haven’t any treatment;the other groups were respectively treated by herb-partition moxibustion on the navel，drug covering navel therapy and navel therapy with moxa stick moxibustion.We observed the symptoms，colon movement，intestinal sensitivity and then compared the differences among these groups.Results:In terms of the above effect indicators，the group of herbpartition moxibustion on the navel，the group of drug covering navel therapy and the group of navel therapy with moxa stick moxibustion are all superior to the model group，and the group of herb-partition moxibustion on the navel is superior to the group of drug covering navel therapy and the group of navel therapy with moxa stick moxibustion.Conclusion:Herbpartition moxibustion on the navel，drug covering navel therapy and navel therapy with moxa stick moxibustion can improve the symptoms，colon movement and intestinal sensitivity of the rats with IBS-D.The advantages of herb-partition moxibustion on the navel are more obvious.

Diarrhea-predominant irritable bowel syndrome;Navel therapy;Colon movement;Intestinal sensitivity

R285.5

B

1006-3250(2016)06-0774-03

2015-11-03

国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2007CB512703)-基于中医特色疗法的理论基础研究-脐疗防治疾病的临床疗效评价和机理研究;国家中医药管理局针灸重点学科(山东中医药大学附属医院)重点项目-基于肥大细胞介导脐疗治疗IBSD的效应机制研究

王陆军(1987-)，男，山东青岛人，医师，医学博士，从事经穴药物外治法的临床与研究。

△通讯作者:马玉侠(1975-)，女，山东临朐人，副教授，医学博士，硕士研究生导师，Tel:0531-89628088，E-mail: myxia1976@163.com。