220株金黄色葡萄球菌的临床分布特点及耐药性分析

仇广翠，孙明忠，金　浩

(盐城市第三人民医院 检验科，江苏 盐城224001)



220株金黄色葡萄球菌的临床分布特点及耐药性分析

仇广翠，孙明忠，金浩

(盐城市第三人民医院 检验科，江苏 盐城224001)

摘要：目的探讨金黄色葡萄球菌感染的临床分布特点及耐药性状况，为临床感染是治疗和预防提供有益的参考。方法将2011年1月至2014年10月期间我院临床检验分离出的220株金黄色葡萄球菌纳入本研究。采用常规方式分离菌株，菌株鉴定主要采用金葡菌单克隆抗体、血浆凝固酶和Vitek-32型仪等。抗菌药物对细菌敏感性测定选择纸片扩散法，耐甲氧西林金葡菌(MRSA)耐药性测定选择头孢西丁法。所得数据分析使用WHONET5.5软件。结果本研究分离培养的220株菌株包括痰液培养菌株91株(41.36%)，脓液培养菌株55株(25.00%)，血液培养菌株40株(18.18%)；主要分布在脑外科、ICU，分别占20.00%和29.09%；在药敏结果中，青霉素耐药率高达89.55%，红霉素耐药率高达64%，苯唑西林、四环素耐药率分别为34.56%和26.82%，万古霉素、利奈唑胺耐药率为0，利福平、呋喃妥因耐药率均低于3%。结论金黄色葡萄球菌主要检测部位是在患者皮肤组织和下呼吸道等部位，对临床常用抗菌药物的耐药率较严重。

关键词：金黄色葡萄球菌；抗菌药；耐药性；特点；分析

(ChinJLabDiagn,2016,20:0269)

金黄色葡萄菌球菌(SA)是临床感染中最常见的一种致病菌，也是院内感染的主要病菌，临床表现主要是导致患者软组织、皮肤等器官出现化脓性感染，患者生活质量下降，健康恢复和抗菌药物选择均存在一定困难[1]。菌株的耐药性恶化，药物存在不同的耐药性，给金黄色葡萄球菌感染的治疗和预防等工作带来严重考验。目前，在临床上尤其需要注意的是耐甲氧西林金葡菌(MRSA)[2]，其特点在于耐药性较强，且对多种药物均有耐药性，呈多重耐药的特点。MRSA对几乎所有类型的β-内酰胺类抗菌药物具有耐药性，对克林霉素、红霉素、四环素等常规抗菌药耐药率也相对较高。目前临床上金黄色葡萄球菌检出率相对较高，国际相关研究结果表明[3]，在3 251株金葡菌中检测出1 900株MRSA，检出率达58.4%。我国一项重症监护室(ICU)金黄色葡萄球菌感染状况调查研究结果表明[4]，MRSA检出率高达72.0%以上。因此，本研究主要探讨金黄色葡糖球菌感染临床分布以及耐药性状况，为对金葡菌感染进行有效治疗、控制和预防，对院内感染进行控制和预防指导提供参考。

1材料与方法

1.1菌株来源

将2011年1月至2014年10月期间我院临床检验分离出的220株金黄色葡萄球菌纳入本研究。但需要注意的是，本研究中并不包含相同患者以及同样病例的相同部位进行多次菌株分离而出现的重复菌株。菌株标准设定为金黄色葡萄球菌菌株ATCC25923。

1.2试剂与仪器

二氧化碳细菌培养箱、BacT∕ALERT 3D血培养仪、GPI细菌鉴定卡及VITEK-32全自动微生物分析仪等。上述所有仪器操作均严格按照相关标准进行，医保证细菌培养分离的效果。

1.3药敏纸片和培养基

对金黄色葡萄球菌耐药种类进行设定，药敏纸片主要包含青霉素、红霉素、万古霉素、克林霉素、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑、头孢西丁、利福平、呋喃妥因、利奈唑胺及四环素等，此外，还需要MH琼脂，Etest条。

1.4菌株分离鉴定和药敏试验

严格参照《全国临床检验操作规程》[5]采集标本、细菌接种及进行细菌培养，在获得细菌后进行纯培养，随后进行革兰染色和触酶试验，对细菌进行初筛。菌株检测需要采用金黄色葡萄球菌单克隆抗体、血浆凝固酶试验和VITEK-32型仪。相关仪器和试验操作参照相关操作程序和步骤进行。药敏试验采用K-B法，严格参照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)规则判断抗菌药物相关药敏结果。金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药性检测方式自2009年3月1日起采用Etest条法进行，并对其MIC值进行检测，结果判定标准参照M100-S19标准。

1.5头孢西丁纸片法检测MRSA

MRSA细菌培养结果需要严格参考2007年制定的CLSI标准进行判读。选取待检菌落后将菌液浓度调至1.5×108CFU/ml，并将MH平皿表面用菌液均匀涂布，把头孢西丁(30 μg)纸片贴在平皿上，将平皿置于33-35度中进行孵育，16-18 h后对菌落培养结果进行观察，甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)观察结果为头孢西丁抑菌圈直径超过22 mm；耐甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MRSA)观察结果为头孢西丁抑菌圈直径小于21 mm。

1.6统计学分析

采用Whonet 5.5软件进行相关数据统计学分析。

2结果

2.1临床菌株分离情况

本研究共收集分离培养金黄色葡萄球菌220株，其中2011年58株，2012年62株，2013年60株，2014年40株，各年份内的细菌培养分离数目基本保持稳定。

2.2标本来源

本研究培养的220株细菌，其中来自痰液培养的菌株91株，来自脓液培养的菌株55株，来自血液的菌株为40株，具体数据见表1。

表1　标本来源分布情况

2.3科室分布情况

本研究220株菌株主要来自于临床各个科室，其中金黄色葡萄球菌(SA)分布最多的科室分别为脑外科、ICU、儿科和门诊等，分别占20.00%、29.09%、10.00%以和8.64%，科室分布构成比见表2。

表2　金黄色葡萄球菌感染科室分布及构成比(%)

2.4药敏结果

金黄色葡萄球菌对青霉素类药物耐药性较强，耐药率在90%左右，对红霉素耐药率超过60%，对苯唑西林耐药性超过30%，而金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺两类药物无耐药性，利福平、呋喃妥因两类药物耐药性也维持在3%以下，耐药性较好，见表3。

表3　220株菌的药敏结果

3结论

革兰阳性菌中最为重要的一种致病菌是金黄色葡萄球菌，作为一种条件致病菌，金黄色葡萄球菌在自然界中广泛分布。目前，随着抗生素在临床治疗中应用越发广泛，金黄色葡萄球菌不仅可以导致社区感染，也是院内感染的重要原因[6]，其临床症状常常表现为患者皮肤、泌尿道、血液及呼吸道等组织器官感染，其耐药性越来越强，耐药种类越来越多，尤其是院内感染中MRSA问题已成为严峻问题，对患者感染的治疗产生严重影响，因此，对金黄色葡萄球菌感染，尤其是对MRSA耐药耐药检测有助于临床用药合理性[7]。

在本研究所有培养的220株菌株中，包括痰液培养菌株91株(41.36%)，来自脓液培养的菌株55株(25.00%)，来自血液的菌株为40株(18.18%)，此结果显示金黄色葡萄球菌感染部位主要在呼吸道、血流等，与国内[8]相似的研究结果一致；220株菌株中金黄色葡萄球菌感染主要分布在脑外科、ICU、儿科和门诊等科室，分别占20.00%、29.09%、10.00%和8.64%；在药敏结果中，分离出的金黄色葡萄球菌株对青霉素耐药性较强，耐药率高达89.55%，在对金黄色葡萄球菌感染治疗中，选择青霉素则其抗菌活性几乎没有，其治疗作用有限[9]。金黄色葡萄球菌对红霉素耐药率高达64%，对苯唑西林、四环素耐药率分别为34.56%、26.82%，表明在金黄色葡萄球菌抗感染治疗中需要进行药敏试验，从而能够对治疗进行有效指导。220株菌株对万古霉素、利奈唑胺全部耐药，利福平、呋喃妥因耐药率低于3%，因此，在金黄色葡萄球菌感染治疗中，应选用万古霉素、利奈唑胺、利福平及呋喃妥因等作为其首选药[10]。此外，左氧氟沙星、莫西沙星对金葡菌感染耐药率为12.73%、9.55%，可在其感染过程中作为辅助用药。

综上所述，在预防金黄色葡萄球菌院内感染和社区感染中，通过将金黄色葡萄球菌临床分布特征进行研究，确定其分布特点，明确组织器官感染状况，对其耐药菌分类进行确认，可在临床治疗中做到有针对性和有效性。在预防措施中，首先需要保证消毒隔离措施安全有效，对传染源应该做到尽量切断，其次还应该对院内感染进行有效监测，做到及时有效地进行处理，这些方法可对金黄色葡萄球菌尤其是MRSA感染有积极意义，在临床治疗、抗感染中应该受到临床重视。

参考文献：

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[3]肖永红,王进,朱燕,等.Mohnarin2008年度全国细菌耐药监测[J].中华医院感染学杂志,2010,20(16):2377.

[4]周信云,胡龙华.232株金黄色匍萄球菌的临床分布特征及耐药性分析[J].中国微生态学杂志,2010,22(10):930.

[5]董爱英,尚秀娟,吴景华,等.临床感染金黄色葡萄球菌多药耐药的动态分析[J].中华医院感染学杂志,2011,21(5):1027.

[6]徐红云,刘春林,袁文丽,等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性[J].中国感染控制杂志,2012,11(1):52.

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[8]金玲,江兴林.金黄色葡萄球菌277株的临床分布及耐药性分析[J].实用预防医学,2011,18(8):1549.

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[10]杨启文,王辉,徐英春,等.2009年中国13家教学医院院内感染病原菌的抗生素耐药性监测[J].中华检验医学杂志,2011,34(5):422.

Clinical distribution characteristic and drug resistance of 220 strains of staphylococcus aureusCHOUGuang-cui,SUNMing-zhong,JINHao.(DepartmentofClinicallaboratory,YanchengThirdPeople'sHospital,Yancheng,Jiangsu224001,China)

Abstract:Objectiveto study the clinical distribution characteristic and drug resistance of 220 strains of staphylococcus aureus,to give a reference of clinical treatment and prevention of infection.Methods220 strains of staphylococcus aureus in my hospital between January 2011 and October 2014 isolated from the clinical examination into the study,strains was separated by conventional way,strain was identified mainly by aureus bacteria monoclonal antibody,plasma coagulase and Vitek - 32 type instrument,Determination of antimicrobial susceptibility to bacterial choose disc diffusion method,determination of resistance of Bacteria methicillin-resistant s.aureus (MRSA) was choose cefoxitin method,Data was used WHONET5.5 software to analyze result.Resultsin this study,the separation of culture from 220 strains included sputum strains for 91 strains (41.36%),pus culture strains for 55 strains (25.00%),blood culture strains for 40 cases (18.18%).Mainly distributed in brain surgery department,ICU,accounted for 20.00% and 29.09%,respectively;in drug susceptibility results,penicillin resistant rate was as high as 89.55%,erythromycin resistance was as high as 64%,Westwood,tetracycline,benzene azole resistance were 34.56%,26.82%,vancomycin,rina of often resistant rate was 0,rifampicin,nitrofurantoin for resistance was less than 3%.ConclusionStaphylococcus aureus detection area is mainly in patients with skin tissue and lower respiratory tract,its resistance to clinical common antimicrobial drug is serious.

Key words:Staphylococcus aureus;Antimicrobials;Drug resistance;Characteristic;Analysis

(收稿日期：2015-01-23)

作者简介：仇广翠(1976-)，女，本科，副主任医师，从事微生物、基因诊断、免疫方面的研究。

文献标识码：A

中图分类号：R446.5

文章编号：1007-4287(2016)02-0269-03