肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的临床价值

郭春梅 李玉梅 刘佃香

肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的临床价值

郭春梅 李玉梅 刘佃香

【摘要】目的 本研究探讨肺结核患者痰中结核分歧杆菌检验的临床价值。方法 以我院的125例活动性肺结核和25例非活动性肺结核患者为研究对象。结果 活动性肺结核培养的阳性率（63.12%）高于非活动性肺结核（χ2=4.208 5，P＜0.001）。结论 结核分歧杆菌培养有利于提高结核分歧杆菌的阳性检出率，在结核病变早期检出、治疗有着重要的意义。

【关键词】肺结核患者；结核分歧杆菌；临床价值

Objective This study was to investigate the clinical value of mycobacterium tuberculosis in sputum of patients with pulmonary tuberculosis. Methods In our hospital，125 cases of active pulmonary tuberculosis and 25 cases of non active pulmonary tuberculosis patients as the research object. Results Active pulmonary tuberculosis culture positive rate（63.12%）was higher than non active pulmonary tuberculosis（χ2=4.208 5，P＜ 0.001）. Conclusion The culture of mycobacterium tuberculosis can improve the positive detection rate of Mycobacterium tuberculosis，and it is of great significance in the early detection and treatment of tuberculosis.

【Key words】 Pulmonary tuberculosis，Mycobacterium tuberculosis，Clinical value

结核分歧杆菌以空气为介质进行传播，如今国内外对肺结核的控制和治疗十分重视。结核分歧杆菌容易在不同的环境下发生变异，变异为不同的形式后有利于结核分歧杆菌在外界环境中的生存，痰涂片镜检是现如今最有效、简单的用于发现和诊断肺结核病的方法。为了进一步分析肺结核患者痰中分歧杆菌的检测及其临床意义，收集了本院的150例肺结核病例用于检测肺结核分歧杆菌，现将结果公布如下。

1 资料和方法

1.1 资料

收集我院2014年5月～2015年1月的150例肺结核住院患者，其中包括活动性肺结核125例和非活动性肺结核25例。125例活动性肺结核患者中有男患者81例，女患者44例，平均年龄（46±5.6）岁；非活动性肺结核25例，包括男18例，女7例，年龄22～71岁，平均年龄（45±6.7）岁。取患者清晨喉部痰液，处理后置于无菌室管内进行培养及检验。

1.2 方法

对病例患者采集清晨痰液，采用涂片法、离心沉淀法采集菌落，并进行分离培养，最后分别制成样本进行抗酸染色涂片和改良罗氏培养，同时与结核分歧杆菌的培养作对照。

1.2.1 抗酸染色涂片制作方法 将标本在消毒后的玻璃片上涂片，进行抗酸染色后，置于荧光显微镜下观察结果。

1.2.2 改良罗氏培养方法 将标本在罗氏培养基上面进行接种，于37℃下培养4～8周的时间后在显微镜下观察，若培养结果为阳性则作为分歧杆菌菌种进行鉴定。

1.2.3 肺结核患者痰中分歧杆菌培养 首先对采集的晨痰进行离心沉淀法处理，由于结核杆菌的密度高于痰液，因此可以使用高速离心沉淀法收集分歧杆菌样本，集菌后取一部分进行涂片。结核杆菌具有抗酸染色的特点，因此可以进行涂片染色镜检，涂片时要注意将痰膜涂成厚薄均匀的，有利于提高镜检阳性率。

涂片观察后剩余的结核杆菌用于分离培养，取2 ml的菌液置于无菌试管中，分别按照顺序加入酚红指示剂和氢氧化钠后摇匀，在37℃下水浴15 min，之后用硫酸调至中性，离心、取沉淀物、接种培养。

1.3 统计学方法

本研究进行数据统计时采用的是统计学软件SPSS 15.0，组间参数采用χ2检验分析结果。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

结果表明，活动性肺结核患者痰中结核分歧杆菌培养阳性率为63.12%（79/125例），非活动性肺结核患者培养阳性率10.1%（3/25例），由此可见活动性分歧杆菌培养阳性率高于非活动性。同时，抗酸染色涂片培养与改良罗氏培养的阳性率均低于结核分歧杆菌培养，但改良罗氏培养与分歧杆菌培养差异具有统计学意义（χ2=4.208 5，P＜0.05），而抗酸染色涂片培养的差异则无显著性统计学意义（χ2=0.059 3，P＞0.05）。

3 讨论

结核分歧杆菌是一种寄生菌，要在活细胞内寄生才能生存。该菌可以通过飞沫或尘埃进入人的呼吸道侵入肺泡，在人体内不断被吞噬、释放，并通过这种过程移动扩散至邻近的淋巴结中，在人体的免疫力低下时，结核杆菌就会发生病变，形成全身性结核或者结核性脑膜炎。晨痰标本检验法是目前最广泛的检测结核分歧杆菌的方法，主要是因为晨痰容易获得且不容易产生污染，根据研究可知，晨痰培养结核杆菌的阳性率最高，在睡眠中，人的咳痰反射减弱，痰在体内积累，更利于清晨将其取出［1-3］。痰结核分歧杆菌检查是诊断结核的主要依据，同时也用于考察治疗效果，监督病情发展。

结核病的检验方法中，利用结核分歧杆菌抗酸染色特性的涂片染色镜检是最普遍的方法，因为这种方法操作简便，容易掌握，而且不需要花费许多费用，但是涂片染色镜检具有较低的敏感性，在多种菌落同时出现的时候只能显示出数量最多的菌种，而痰中的结核杆菌类型主要与病变的类型相关。

集菌方法一般采用漂浮集菌和离心沉淀法集菌，本研究采用的是离心沉淀法，结核分歧杆菌是一种抗酸性杆菌，所需的营养条件较高且生长比较缓慢，使用培养法进行培养时比较麻烦且费时，但是结果准确可靠，能够直接形成肉眼可见的细菌菌落，培养法能够为肺结核患者的治疗以及复治患者的治疗提供参考依据，结核菌没有生长繁殖的能力，通过培养法培养的细菌菌株可以用于药敏测定以及菌型鉴定［4-6］。如今肺结核病开始出现了耐药性，有的病变可以抗多种药物，因此目前解决抗酸结核分歧杆菌的快速分离已成为急需解决的问题。

本研究显示药敏耐药结核病患者的结核分歧杆菌培养的阳性率高于其他类型的患者，数据结果表明结核分歧杆菌感染后的治疗效果差，经分析主要原因如下：结核分歧杆菌主要寄生在巨噬细胞内，在治疗过程中没有合理用药或者使细菌产生耐药性均不能杀死细菌；结核分歧杆菌的细胞壁有缺陷，细菌由于抗原物质的减少而缺乏抗原性，以至于免疫系统难以察觉，就能逃脱免疫系统的攻击。因此在治疗肺结核患者时，一定要先对结核分歧杆菌进行药物敏感性试验，选择出对细菌最敏感的药物。

参考文献

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［2］ 戴振华. 结核分枝杆菌抗原定量检测技术的建立及其初步评价［D］. 北京：中国人民解放军军事医学科学院，2014.

［3］ 陈翠翠. 结核分枝杆菌特异性抗原Rv0315和Rv2971的克隆、表达及初步应用研究［D］. 郑州：郑州大学，2014.

［4］ 杨成. 肺结核患者的发病情况和预防控制研究［J］. 中国卫生产业，2015（36）：91-93.

［5］ 边玛措. 肺结核合并糖尿病患者治疗的临床疗效观察［J］. 世界最新医学信息文摘，2016，14（23）：31-32.

［6］ 陈兴年. 继发性肺结核和非结核分枝杆菌肺病患者血清细胞因子的临床研究［D］. 苏州：苏州大学，2014.

【中图分类号】R446

【文献标识码】A

【文章编号】1674-9316（2016）10-0164-03

doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2016.10.115

作者单位：黑龙江省大庆市第二医院检验科，黑龙江 大庆 163461

Clinical Value of Mycobacterium Tuberculosis in Sputum of Patients With Pulmonary Tuberculosis

GUO Chunmei LI Yumei LIU Dianxiang Department of Laboratory，Second Hospital of Daqing，Daqing Heilongjiang 163461，China

【Abstract】