高氏舒筋丸的质量标准研究

曲艳丽 王洪莹

（长春市食品药品检验所，吉林 长春 130012）

高氏舒筋丸的质量标准研究

曲艳丽 王洪莹

（长春市食品药品检验所，吉林 长春 130012）

目的建立高氏舒筋丸的质量控制方法。方法采用TLC方法对处方中的三七、赤芍进行了定性鉴别；采用了HPLC方法测定士的宁的含量。结果薄层色谱中斑点清晰，易于识别；士的宁线性范围为0.293～2.929 µg，r=0.9997（n=5），平均回收率为98.8%，RSD=1.1%。结论该方法可准确地进行定性、定量检测，能有效的控制该制剂的质量。

高氏舒筋丸；薄层色谱法；高效液相色谱法；士的宁

高氏舒筋丸系长春德惠骨外伤医院的多年验方，是由三七、赤芍、马钱子粉、杜仲、香加皮等多味药组成的中药丸剂，具有舒筋活络之功效，用于各种肌腱、韧带及软组织损伤，临床治疗效果显著。为保证疗效，更好地控制药品质量，长春德惠骨外伤医院委托笔者研究制定了此制剂的质量标准。本文采用薄层色谱法对制剂中三七、赤芍进行了鉴别；采用HPLC法对马钱子粉中的士的宁含量进行了测定。结果表明该法对高氏舒筋丸的质量控制有实际意义。

1 仪器与材料

DIONEX高效液相色谱仪（美国戴安公司，配有UVD107U紫外检测器）； KQ-300VDE双频数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

士的宁对照品（批号：110705-200306，纯度以97%计，供含量测定用）、三七对照药材（批号：120941-200506）、芍药苷对照品（批号：110736-201337）、以上对照品、对照药材均由中国食品药品检定研究院提供。

高氏舒筋丸样品（规格：9 g，批号：130901、130902、130903）、阴性样品均由长春德惠骨外伤医院提供，乙腈为色谱纯、水为超纯水，庚烷磺酸钠与磷酸二氢钾等其他试剂均为分析纯。

2 定性鉴别

2.1 三七的薄层色谱鉴别：取本品2丸，剪碎，加硅藻土适量，研匀，加水饱和正丁醇100 mL，超声处理40 min，滤过，滤液加正丁醇饱和的水洗涤3次，每次40 mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。另取三七对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。再取除去三七药材的阴性样品，制成阴性样品溶液。吸取上述两种溶液各10 µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）10 ℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰。阴性对照无干扰。结果见图1。

2.2 赤芍的薄层色谱鉴别：取本品1丸，剪碎，加硅藻土适量，研匀，加甲醇60 mL，加热回流提取60 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次25 mL，提取液再用正丁醇饱和的水洗涤2次，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各5 µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40∶10∶5∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰。阴性对照无干扰。结果见图2。

图1 三七TLC图

图2 赤芍TLC图

3 含量测定[1]

3.1 色谱条件。色谱柱：Agilent公司色谱柱(ZORBAX SB-C18，4.6 mm ×250 mm，5 µm)；流动相：乙腈-0.01 mol/L庚烷磺酸钠与0.02 mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值为2.8）（19∶81）；检测波长260 nm，流速为1.0 mL/min。进样量：10 μL。

3.2 对照品溶液的制备：取士的宁对照品约10 mg，精密称定，置10 mL量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取1 mL，置10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

图3 高氏舒筋丸HPLC色谱图

表1 加样回收率试验结果

表2 样品含量测定结果（n=3）

3.3 供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品适量，剪碎，混匀，取约8 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液3 mL，混匀，放置30 min，精密加入三氯甲烷50 mL，密塞，称定重量，置水浴上回流提取2 h，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，用三氯甲烷30 mL分次洗涤滤渣及滤器，合并三氯甲烷液，置分液漏斗中，用1%硫酸溶液振摇提取5次（30、30、20、20、20 mL），合并酸液，用30%氢氧化钠溶液调节pH值至10～11，用三氯甲烷振摇提取5次（30、30、20、20、20 mL），合并三氯甲烷液，回收至干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至5 mL量瓶中并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.4 阴性对照溶液的制备：取不含马钱子粉的阴性样品，依3.3项下方法制备，即得。

3.5 空白干扰实验：精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，同法测定，结果在士的宁峰相应的位置上，阴性对照无干扰，结果见图3。

同时必须重新审视耕地功能，把握耕地生产—生态的功能性演变规律，保护耕地多元化功能。需要贯彻区域经济社会的可持续发展的理念，科学、动态的认识耕地的多功能性，树立耕地综合价值观。耕地多功能性保护不仅强调了耕地利用的合理方向，也增强了严格保护耕地的说服力和行动能力。

3.6 线性关系考察：精密称取士的宁对照品7.55 mg，置10 mL量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液2、5、10、15、20 µL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积为纵坐标，进样量（µg）为横坐标，测得回归方程为Y=2769.7 X-2.2479，r=0.9997（n=5）。

3.7 精密度试验：取同一对照品溶液，按正文色谱条件连续进样6次，测得峰面积，计算，其RSD=0.1%，表明精密度良好。

3.8 重复性试验：取批号130903的样品6份，按3.3项下方法制成供试品溶液，测定，结果RSD=1.6%。表明本品测定方法重复性良好。

3.9 稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液10 μL，分别在0、4、8、12、24 h测定峰面积，结果RSD=1.1%，表明供试品在24 h内稳定。

3.10 加样回收率试验：精密称取批号为130901的样品约4 g（已知含量为0.60毫克/丸）6份，每份分别精密加入对照品贮备液（0.574 mg/mL）0.5 mL，按正文方法制备及测定。结果见表1。

结果样品的平均回收率为98.8%（n=6），表明本法准确度较好。

3.11 样品含量测定：取样品，按3.3项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，按上述色谱条件测定，以外标法（峰面积）计算样品中士的宁含量。结果见表2。

4 讨 论

4.1 马钱子粉为方中主要药味，其主要化学成分为士的宁、马钱子碱等生物碱[2]，其中士的宁约占总碱的35%～55%[3]，有通络止痛、散结消肿之功效，用于跌打损伤，骨折肿痛，风湿顽痹，麻木瘫痪，痈疽疮毒，咽喉肿痛[4]，但有毒，为保证疗效及用药安全，故制定了处方中马钱子粉的含量测定方法，以士的宁为测定指标。曾参考中国药典2010年版一部[4]，取样品加入氢氧化钠试液3 mL，混匀，放置30 min后精密加入三氯甲烷50 mL，置水浴上回流提取2 h，蒸干后定容至5 mL量瓶，过滤后，取10 μL进入高效液相色谱仪进行测定。结果，士的宁层析附近有干扰峰，更换多个品牌的色谱柱也分离不开。改用3.3项下的供试品制备方法，去除了杂质干扰，高效液相色谱分离度达到了要求。

4.2 曾经对药方中的杜仲、香加皮等多味药味进行薄层鉴别，因投料比例较小，薄层效果不好，或阴性有干扰，或斑点不清晰，故未收入此研究标准中。

4.3 中药材多在泥土中种植，重金属及砷盐易超出限度范围，曾试验增加“重金属”检查项目及“砷盐”检查项目。取三批样品，参照中国药典2010年版一部附录Ⅸ E及Ⅸ 项下检验。在“重金属”的检查结果中，样品管中显出的颜色明显浅于对照管；在“砷盐”的检查结果中，样品的砷斑颜色明显浅于标准砷斑，故未列入标准正文。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S].2005年版.北京:中国医药科技出版社,2005:637.

[2]肖培根,李大鹏,杨世林,等.新编中药志[M].第二卷.北京:化学工业出版社,2002:80.

[3]赵陆华.中药高效液相色谱法应用[M].北京:中国医药科技出版社,2005:183.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S].2010年版.北京:中国医药科技出版社,2010:48.

Quality Standard of Gaoshishujin Pills

QU Yan-li, WANG Hong-ying
(Changchun Institute for Food and Drug Control, Changchun 130012, China)

ObjecticeTo establish a method for quality contrnl of Guoshi shujin Pills.MethodThe Notoginseng radix et rhizome, Paeoniae radix rubra in this medicine was identified by TLC; the content of Strychnine were mersured by HPLC.ResultThe stots in TLC were clear and well distinguished; The method was linear within a range of 0.293-2.929 µg of the Strychnine; r=0.9997(n=5), The average recovery was 98.8%, and RSD was 1.0%.ConclusionThe method is simple, sensitive, and accurate. It can be used to control the quality of Gaoshishujin Pills.

Gaoshishujin Pills; TLC; HPLC; Strychnine

R927.11

B

1671-8194（2015）05-0037-02