解脲支原体感染对不育男性精液质量的影响

周欢群， 周 文， 陆 杉

(广东省中医院大学城医院生殖医学科，广东广州510000)

生活习惯、环境等因素的变化导致不育症患者数量剧增，而男性不育比例持续升高，精子质量的下降是导致男性不育的直接因素［1］.支原体是一种介于细菌与病毒之间细小的原核微生物，常引起生殖道炎症的发生，而解尿支原体是一种能够通过性传播的微小病原体，通过感染男性生殖道及附属性腺并诱发炎症，导致男性不育的发生［2－3］.据报道UU感染后男性精液质量变化，包括精液体积、精子密度、活力、正常形态等水平的降低［4－8］.本研究主要研究在UU感染的男性不育患者中，精液常规参数、顶体酶、精子表面结合抗体水平及精浆弹性蛋白酶水平的变化，分析比较UU感染与精子运动、精子膜完整性、顶体反应潜能、关键性酶分泌内环境及局部免疫微环境的关系，综合探讨UU感染与男性不育相关性.

1 资料与方法

1.1 资料

(1)研究对象 广东省中医院大学城医院门诊就诊男性不育患者中选取UU阳性46例，阴性97例，年龄(19～48)岁，平均年龄(31.67±4.99)岁.患者性生活正常，未采取任何避孕措施1年以上未孕，且未发现明显睾丸、附睾、输精管等异常，未见器质性改变.

(2)样本采集 取精前禁欲2～7 d，生理盐水清洗手部及阴茎，通过手淫法取精，全部射入无菌无毒精杯，迅速放入37℃培养箱中，待精液完全液化后观察.

1.2 方法

(1)计算机精液辅助分析 采用西班牙CASA系统进行常规精液参数分析，精子活力分为前向运动、非前向运动和不动3级，记录每个患者的前向运动率及总活率.

(2)精子形态观察 拉薄技术制作适当厚度精子涂片，采用珠海贝索巴氏染色试剂盒进行染色.按文献［9］，计数200条精子，统计正常形态、头部畸形、中段畸形及尾部畸形精子比例，并计算精子畸形指数与畸形精子指数，精子畸形指数(SDI)=缺陷总数/所数精子总数，畸形精子指数(TZI)=缺陷总数/缺陷精子数.

(3)精子表面抗精子结合抗体(AsAb)检测采用南京欣迪抗精子结合抗体(MAR)检测试剂盒进行检测，参照WHO5版标准，结合率R=(粘附于胶乳颗粒的活动精子数/计数的总活动精子数)×100%，R＞50%为AsAb阳性.

(4)精子顶体酶水平检测 采用深圳博瑞德精子顶体酶活性检测试剂盒进行检测，顶体酶活性小于58.5 μIU/106精子为异常.

(5)精浆弹性蛋白酶 采用深圳康华精浆弹性蛋白酶定量测定试剂盒检测，精浆弹性蛋白酶质量浓度测定大于1 000 ng/mL示泌尿生殖道确诊感染.

1.3 统计学分析

SPSS 17.0统计分析数据，分别采用χ2检验和t检验对比例(%)数据和(均数±标准差)数据进行检测，P＜0.05为有统计学差异.

2 结果

2.1 UU感染对精子活力及存活率的影响

对两组患者精子活力进行分析，结果显示，观察组精子前向运动率、总活力及存活率均低于对照组，但无统计学差异(P＞0.05，表1)

表1 UU感染对精子活力及存活率的影响Table 1 Effects of UU infection on sperm motility and viability

2.2 UU感染对精子形态的影响

标准巴氏染色法观察精子形态，参照WHO第5版分类统计精子畸形情况.结果显示，与对照组比较，观察组精子正常形态率降低，有统计学差异(P＜0.05);观察组精子头、中、尾部畸形率，精子畸形指数及畸形精子指数均与对照组相似，且无统计学差异(P ＞0.05，表2)

2.3 UU感染对精子顶体酶活性的影响

与对照组相比，观察组精子顶体酶活性降低，但无统计学差异(P＞0.05);观察组顶体酶异常率显著升高(P＜0.05，表3)

表2 UU感染对精子形态的影响Table 2 Effects of UU infection on sperm morphology

表3 UU感染对精子顶体酶活性的影响Table 3 Effects of UU infection on acrosin activity

2.4 UU感染对精液抗精子结合抗体水平的影响

与对照组相比，观察组精子MAR试验结合率(R)较高，但无统计学差异;在观察组22例、对照组99例患者中AsAb阳性患者(R＞50%)均为0例，AsAb阳性率无统计学差异(P＞0.05，表4)

2.5 UU感染对精浆弹性蛋白酶水平的影响

与对照比较，观察组患者精浆弹性蛋白酶水平无统计学差异(P＞0.05，表5).泌尿生殖道确诊性感染(精浆弹性蛋白酶质量浓度＞1 000 ng/mL)率分别为观察组7/22、对照组6/27，观察组高于对照组，经卡方检验P=0.054，两组无显著差异.

表4 UU感染对对精液抗精子结合抗体水平的影响Table 4 Effects of UU infection on AsAb level

表5 UU感染对精浆弹性蛋白酶水平的影响Table 5 Effects of UU infection on seminal plasma elastase

3 讨论

生殖道感染是引发男性不育的重要原因，而UU是目前诱发生殖道感染的主要因素.研究指出，UU是一种介于细菌与病毒之间的微生物，同时也是非淋性尿道炎的病原体之一［10］.UU能够附着在精子的表面，其颈部形态发生改变，尾部出现卷曲，形态学上的改变使精子的活力、运动能力降低以及精子畸形率上升，影响精卵结合，从而引发不育［11］.

精子活力及存活率间接反映精子受精能力、膜通透性及转运功能.本研究结果显示，UU阳性患者精子前向运动率、总活力及存活率较对照组低，但无统计学差异.可能与UU感染频率及时间、患者治疗史、当次取精状态及病例数相关，结合既往的研究结论［12－16］及本次结果统计的趋势，精子活力应该与UU感染联系密切.

精子形态学观察是精液分析中重要指标，精子正常形态低于4%可能会影响精子体外受精率［9］;有报道UU感染会导致精子正常形态率降低，从而出现不同程度畸形精子症［17－19］，引起男性不育.本研究结果显示，观察组正常精子形态率低于对照组，有显著性差异，表明UU感染能够影响精子形态.另外，精子畸形指数和畸形精子指数两组之间并无明显差异，提示UU感染与精子总畸形出现频率及各类畸形出现频率之间的关系尚需进一步的研究.

精卵结合是受精发生的前提条件，需要精子的顶体反应，精子顶体会释放精子顶体酶和透明质酸酶，溶解透明带，促使精子穿过透明带并完成受精过程.精子顶体酶在此过程中发挥重要的作用.有研究指出，UU感染可引起精子顶体膜破损，影响顶体酶失活［20－21］.本研究中观察组精子顶体酶活性低于对照组，但两组之间无统计学差异，与部分研究者的结论相似，推测UU感染可能只引起精子质膜的破损，而对顶体本身结构并没有损伤.

监测血液及局部的抗精子抗体水平相是诊断免疫性不育的重要指标，其中精子表面结合抗体水平较血液更有临床参考价值，常采用混合球蛋白抗精子抗体凝集实验来检测精子表面AsAb水平.报道指出，UU感染可引发AsAb的发生率上升，其诱发机制是通过进入前列腺管或刺激机体产生UU抗体，引发和精子膜蛋白的交叉反应［22－23］.本结果显示，观察组AsAb阳性率稍高于对照组，但没有显著性差异，表明UU具有引起患者AsAb发生概率升高的可能性，但其不是诱发不育的主要原因.精浆弹性蛋白酶水平间接反应泌尿生殖道感染情况，研究发现UU感染常引起附属性腺炎症发生，从而导致精浆弹性蛋白酶水平升高，精浆弹性蛋白酶水平测定常作为临床诊断男性泌尿生殖道感染的重要参考指标［24－25］.本研究结果显示两组弹性蛋白酶水平无显著性差异，而观察组确诊感染比率较对照组高;UU感染可导致精子正常形态率降低及顶体酶异常率升高，从而影响不育;UU对精子活力、存活率、抗精子结合抗体水平、顶体酶及精浆弹性蛋白酶水平的影响尚需进一步研究，同时应当针对UU重复感染及合并感染患者精液质量进行筛查.

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