精浆生化与精子参数相关性分析

陈捷 韦剑洪 方小武 霍骏业

精液由精子细胞和基质精浆共同组成。精浆中富含精子活动需求的蛋白质和各种营养物质，能够为精子活动提供稳定的环境，还可作为运输精子到达女性生殖道的载体[1-2]。大量研究结果表明[3-7]，精浆中可能含有男性不育及男性生殖系统疾病的生物标志物，在诊断和治疗男性不育及生殖系统疾病中具有重要的使用价值。已有研究对26 种精浆中生化指标进行检测，并且检测血清中26 种生化指标的含量进行对比分析，结果表明在血清中无法检出前白蛋白，而其余25 种均可检出[8]。但现阶段关于上述指标与男性生育能力相关性的研究报道较少，因此，本研究对24 种精浆生化指标与精子参数之间的相关性进行分析，为临床诊断和指标提供一定的参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 主要试剂与仪器

总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、谷丙转氨酶（ALT）乳酸脱氢酶（LDH）、肌酐（Cr）、尿酸（UA）及腺苷脱氨酶（ADA）等24 种精浆生化指标试剂盒均购自于伤害执诚生物科技股份有限公司。本研究中全自动生化分析仪为日本Olympus AU400，电解质分析仪伟南京攀事达电子仪器有限公司生产的PSD-16a。

1.2 样本来源

精浆样本来源于我院生殖遗传实验室。患者均为前来我院就诊的无其他疾病且不育超过1 年的男性不育患者60 例，年龄为25～32 岁，禁欲2～7 d 后留取精液样本。精液液化后采用CASA 系统对精液进行常规参数分析，并严格准守WHO 5 对精液量、精子活动率及前向运动精子百分率（PR）等参数进行分析。随后，在使用12 000 g 离心机离心5 min，留取上层精浆进行生化指标检测。

1.3 检测方法

精浆检测前对所使用的样本和仪器进行定标和质控检测，检测合格后将精浆样本置入全自动生化分析仪上进行检测，钾、钠及氯检测采用电解质测定。对超出检测限的样本稀释后重新测定，精浆中的LDH、CK、αHBDH、K+、Ca2+及Mg2+样本稀释5倍后上机检测，精浆中的GGT 和P 样本稀释25 倍后上机检测。LDH、CK、αHBDH、Ca2+、Mg2+、GGT 和P 采用生理盐水进行稀释，K+采用去离子水进行稀释。

1.4 统计学方法

本研究采用SPSS 20.0 统计学软件进行处理分析，精浆中生化指标以（）表示，以t检验分析；对精浆中生化指标进行K-S检验是否符合正态性分布，符合正态性分布采用Pearson 分析，不符合正态分布资料采用Spearman's rho 分析。当P＜0.05 时差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 精液常规参数和精浆生化指标结果分析

60 例患者精液常规参数和24 种精浆生化指标结果见表1。

2.2 精浆生化指标与精液常规参数相关性分析

相关性分析结果表明，精浆蛋白含量包含TP、Alb 及Glb 均与精子浓度呈显著正相关关系，并且精浆Alb 含量与精子总数也呈显著正相关关系；精浆AST、LDH 活性与精子浓度和精子总数呈显著正相关关系，但精浆AKP 活性与精液量呈显著负相关关系，与精子活动率呈显著正相关关系。精浆αHBDH 活性与精子浓度和精子总数呈显著正相关关系，UN 与精液量呈显著负相关关系，Cr 与精液量、精子浓度和精子总数呈显著负相关关系；精浆Glu含量与精子浓度和精子总数呈显著负相关关系；精浆TG 与精液量呈显著正相关关系，与精子活动率呈显著负相关关系；精浆氯与精液量呈显著负相关关系。结果见表2。

表1 60 例生育力低下男性精液常规参数和精浆生化指标结果（n ＝60，）

表1 60 例生育力低下男性精液常规参数和精浆生化指标结果（n ＝60，）

表2 精浆生化指标与精液常规参数相关性分析（n ＝60）

3 讨论

精浆中含有大量与精子活性有关的物质。精浆中富含以Glb为主的蛋白质，并且精浆中TP、Alb 及Glb 与精子浓度具有正相关关系。以往大量研究对Alb 的研究较多[9-11]，但对于精浆中占据多数的Glb 的相关研究较少，因此进一步研究Glb 在明确其对男性生殖系统作用具有重要意义。同时，因精浆中含有大量的酶，精浆中ALT、AST、AKP 以及LDH 等酶的活性与血清中相比明显升高。但上述酶中仅有αHBDH、AST 和LDH 与精子浓度及精子总数呈正相关关系，其中αHBDH 与精子浓度及精子总数相关性最好。有研究认为[12-14]，精浆中的酶存在方式与精子相类似，则表明精浆中酶与精子正常生理代谢活动具有重要作用。一般认为，精浆中高水平的AST 和ALT 不利于精子的正常生理活性[15-17]，但在本研究中发现，高水平AST 对精子发生具有促进作用，但ALT未发现此种作用。且在本研究中还发现LDH 与精子浓度和精子总数具有正相关关系，说明LDN 在精子供能中具有重要作用；在本研究中发现精浆αHBDH 活性与精子浓度和精子总数呈正相关关系，但尚未有研究报道，因此其在精子发生或代谢中的作用还需进一步的研究。本研究显示，精浆AKP 活性与精液量呈负相关关系，与精子活动率呈正相关关系；UN 与精液量呈负相关关系，Cr与精液量、精子浓度和精子总数呈负相关关系；精浆Glu 含量与精子浓度和精子总数呈负相关关系；精浆TG 与精液量呈正相关关系，与精子活动率呈负相关关系；精浆氯与精液量呈负相关关系。虽然在本研究中上述部分指标已有研究证实与精子活力或代谢相关，但是其具体作用机制及是否存在其他功能还需进一步的研究明确。

综上所述，24 种精浆生化指标中大多数与精液参数具有密切相关性，则说明这些成分在精子的发生、成熟及生理代谢过程具有一定作用。