亲子鉴定中46，XX男性性反转1例

陈　芳，章红星，陈建红，黄　琼（.浙江汉博司法鉴定中心，浙江 杭州 30000；.浙江大学公共技术平台，浙江 杭州 30000）

亲子鉴定中46，XX男性性反转1例

陈芳1，章红星1，陈建红1，黄琼2
（1.浙江汉博司法鉴定中心，浙江 杭州 310000；2.浙江大学公共技术平台，浙江 杭州 310000）

关键词：法医遗传学；亲子关系；性反转

1　简要案情

1.1案情摘要

当事人李某因更改孩子出生医学证明的需要，带孩子及有效证件来本鉴定中心，要求对自己与孩子之间有无亲生血缘关系进行鉴定，出生医学证明显示孩子性别为男，根据知情同意原则，分别采集李某（父）与孩子血样备检。

1.2检验方法

1.2.1 DNA提取

采用常规Chelex-100法分别提取李某与孩子血样DNA，GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统20A试剂盒［基点认知技术（北京）有限公司］进行19个常染色体STR基因座和Amelogenin性别基因座分型，GoldeneyeTM20Y试剂盒［基点认知技术（北京）有限公司］进行20个Y-STR基因座的分型，Y-micro-del-Reader Y染色体微缺失试剂盒（北京阅微基因技术有限公司）进行17个基因座的检测，X-STR试剂盒（北京阅微基因技术有限公司）进行19个X-STR基因座的分型，扩增体系和扩增程序按相关操作手册进行。

1.2.2 STR分型

采用9700型PCR仪（美国AB公司）进行PCR扩增，3130XL型全自动遗传分析仪（美国AB公司）进行电泳分离，GeneMapper ID v3.2.1软件（美国AB公司）处理电泳数据，实验过程参照操作手册。

1.3检验结果

1.3.1常染色体STR基因座分型结果

对19个常染色体STR基因座（D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、vWA、D8S1179、TPOX、Penta E、TH01、D12S391、D2S1338、FGA）和Amelogenin性别基因座进行STR分型检验，发现除CSF1PO基因座外，其他基因座均符合孟德尔遗传定律，且孩子Amelogenin性别基因座只检测出等位基因X，等位基因Y未检出。

图1　STR基因座分型

1.3.2 Y染色体STR基因座分型结果

对Y染色体进行20个Y-STR基因座（DYS391、DYS389Ⅰ、DYS390、DYS389Ⅱ、DYS438、DYS456、H4、DYS447、DYS19、DYS392、DYS393、DYS460、DYS439、DYS635、DYS448、DYS388、DYS458、DYS437、DYS385a/b）的分型检测，父亲20个Y-STR分型正常，孩子未检测出Y-STR分型。

1.3.3 Y染色体微缺失检测结果

对Y染色体进行17个基因座的微缺失检测，孩子样本只在SMCX、ZFX、DAZL这3个位点有符合预期大小的产物峰，其他所有Y染色体基因座无扩增产物，孩子AZF a、b、c区域均缺失，且SRY阴性，结果见表1。

1.3.4 X染色体STR基因座分型结果

对X染色体进行19个基因座的X-STR检测，父亲分型结果正常，孩子部分基因座表现为两个等位基因，且每个基因座的等位基因均可从父亲那找到来源。

表1　孩子17个Y染色体微缺失检测结果

2　讨论

本案例通过对孩子常染色体和Y染色体STR分型检测，初步判断孩子Y染色体存在微缺失现象。17个Y微缺失位点遍布整条Y染色体，通过Y染色体微缺失试剂盒检测进一步证实Y染色体缺失，初步判断孩子染色体核型为45，X男性或者46，XX男性。X染色体属人类的性染色体，正常男性只有一条，正常女性有两条，男性的X染色体来自生母，且遗传给女儿。如果孩子只有一条X染色体，每个X-STR基因座应只显示一个等位基因，且等位基因来源于母亲，可以推断孩子为45，X男性；如果孩子有两条X染色体，每个X-STR基因座显示两个等位基因或者一个等位基因，表现为杂合子或纯合子，且一条来源于母亲，另一条来源于父亲，可以推断孩子为46，XX男性。本例中，孩子在X-STR基因座显示有两个等位基因或者一个等位基因，且每个基因座中其中一个等位基因都能从父亲那找到来源，进一步证实孩子存在两条X染色体，其中一条来自父亲。通过以上结果分析，最终推断孩子为46，XX男性，也即46，XX男性性反转综合征。

性反转综合征（sex reverse syndrome）指染色体性别和性腺不一致的一类疾病，包括46，XX男性和46，XY女性，这种性分化异常由决定性别的控制基因的异常所引起，表现为表型性别不能确定的中间性状态，或表型性别与性腺性别或遗传性别相矛盾的现象。其发病率约为1∶25000～1∶20000［1］，2006年欧洲儿科内分泌学会将46，XX性反转综合征更名为46，XX性发育睾丸疾病。男性的性别由SRY基因决定，因此，46，XX男性性反转患者根据SRY基因检测可分为SRY阳性和SRY阴性两类。患者的临床症状也常表现出一定程度的异质性，SRY基因阳性的患者外生殖器发育多为正常［2］，在青春期前，无其他明显阳性体征，但也有伴随生殖器畸形的病例报道［3］。目前46，XX男性的发病机制还不明确。本案例中，根据Y染色体微缺失检测结果及X-STR分型结果，可以推断孩子为46，XX（SRY阴性）男性。通常46，XX男性性反转综合征患者临床上有较大的异质性，青春期前多无异常，常因不育就诊而被发现，仅少数患者在青春期前得以确诊。而本例的发现较为特殊，系在亲子鉴定过程中因Amelogenin性别基因座等位基因Y缺失而被发现。

在实际检案中，遇到这种性别相矛盾的特殊案例时，首先要确认检材的正确性，需要时可重新采样确认，更换不同试剂盒以排除因引物结合位点突变导致的Y等位基因缺失，然后可进一步加做Y-STR进行检验，如果Y-STR未检测出任何PCR产物，可以初步判断为Y微缺失。最直接判断Y缺失的方法是进行染色体核型分析，结合Y-STR及Y微缺失的检测结果，可以判断是Y染色体微缺失还是整条Y染色体缺失（45，X男性），还是性反转患者（46，XX男性）。总之，由于性别决定和分化过程的复杂性以及性反转发生机制的多样性，在亲子鉴定过程中，遇到性反转患者应建议其去医院进行染色体核型分析和SRY基因的常规诊断，以明确性别异常的原因，指导患者合理治疗，促进第二性征的发育，防止性腺恶变。通过反复实验，确保鉴定结果无误后，方可定论，以保证鉴定结果的准确性和科学性，同时建议在鉴定意见书中不要体现性别基因座，以免造成不必要的麻烦或纠纷。

参考文献：

［1］Rajender S，Rajani V，Gupta NJ，et al.SRY-negative 46，XX male with normal genitals，complete masculinization and infertility［J］.Mol Hum Reprod，2006，12（5）：314-346.

［2］Ergun-Longmire B，Vinci G，Alonso L，et al.Clinical，hormonal and cytogenetic evaluation of 46，XX males and review of the literature［J］.J Pediatr Endocrinol Metab，2005，18（8）：739-748.

［3］衡雪源，李琳，宁玻.46，XX男性性反转综合征四例［J］.

中华医学遗传学杂志，2008，25（3）：361.

（本文编辑：李成涛）

中图分类号：DF795.2

文献标志码：B

doi：10.3969/j.issn.1004-5619.2015.05.030

文章编号：1004-5619（2015）05-0415-02

收稿日期：（2014-12-31）

作者简介：陈芳（1983—），女，湖北黄石人，主检法医师，主要从事法医物证学鉴定；E-mail：chen-fang@zju.edu.cn

通信作者：黄琼，女，主要从事法医物证学和法医病理学鉴定；E-mail：huangqiong@zju.edu.cn