XRCC1基因多态性与肝细胞癌易患性的关联性研究

龚文锋，张秋明，钟鉴宏，白　涛，黄　山，向邦德，马　良， 黎乐群※

(1.广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科，南宁 530021； 2.广西医科大学第十附属医院综合病区，广西 钦州 535000)

XRCC1基因多态性与肝细胞癌易患性的关联性研究

龚文锋1，张秋明2，钟鉴宏1，白涛1，黄山1，向邦德1，马良1， 黎乐群1※

(1.广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科，南宁 530021； 2.广西医科大学第十附属医院综合病区，广西 钦州 535000)

摘要：目的评价X线交叉互补修复基因1(XRCC1) Arg280His位点基因多态性与肝细胞癌(HCC)发病风险的关联性。方法检索PubMed、EMABSE及中国知网等数据库，收集关于XRCC1 Arg280His基因多态性与HCC易患性的病例对照研究，提取数据进行Meta分析。以病例组及对照组XRCC1 Arg280His基因型分布的比值比(OR)为效应指标，计算合并OR值及其95%置信区间(CI)。 结果共7篇文献符合纳入标准，累计病例1448例，对照1529例。Arg/Arg基因型与His/His基因型比较的OR=0.69 (95%CI0.47~1.01,P=0.05)。而Arg/Arg基因型与Arg/His+His/His基因型比较的OR=0.78(95%CI0.52~1.17,P=0.24)。Arg-allele 与 His-allele比较的OR=0.74 (95%CI0.52~1.04,P=0.09)。 结论XRCC1 Arg280His位点基因多态性可能不参与HCC的发生。

关键词：肝细胞癌；X线交叉互补修复基因1；多态性； Meta分析

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是在全世界男性癌性死亡原因中排第二、女性癌性死亡原因中排第六的恶性肿瘤[1]，发病率在全球范围分布不均，以东南亚及撒哈拉以南非洲地区的发病率最高[2]。HCC的发病机制尚未完全阐明，流行病学及临床研究表明，HCC与肝炎病毒[3-4]、黄曲霉素B1感染[5]、酒精性肝硬化[6]等相关。然而，暴露在这些环境的个体并不都罹患HCC，提示HCC的发生不仅取决于环境因素，还可能受个体遗传易患性[7-8]的影响。致病因素和(或)其代谢产物通过损伤机体的DNA导致机体细胞不稳定从而诱发癌变，而机体通过DNA损伤修复系统参与修复以维持基因组稳定性。X线交叉互补修复基因1(X-ray repair cross-complementing group 1，XRCC1)是机体非常重要的DNA损伤修复基因，其第280密码子编码的氨基酸发生G→A变异从而导致Arg→His改变，该变异可能改变XRCC1基因的功能而导致肿瘤的发生。关于XRCC1 Arg280His基因多态性与肿瘤发病易患性的研究较多，包括HCC，但由于各研究样本量相对不大且结果缺乏一致性。因此，本研究拟采用Meta分析方法来评估XRCC1 Arg280His基因多态性与HCC发病的关联性。

1材料与方法

1.1文献检索中文以肝癌、XRCC1、X线交叉互补修复基因1、多态性，英文以HCC/Hepatocellular Carcinoma；XRCC1/X-ray Repair Cross-Complementing group 1/DNA repair genes为主题词、关键词，分别在中国知网、维普中文科技期刊数据库、万方全文数据库及PubMed、EMBASE数据库上进行检索，检索日期截至2014年4月，收集关于XRCC1 Arg280His基因多态性与HCC易患性的病例对照研究。

1.2文献纳入标准①国内外关于XRCC1 Arg280His基因多态性与HCC易患性的病例-对照研究；②研究方法相同或相似，暴露定义相同，能提供病例组(HCC患者)和对照组(健康人群)的观察人数、基因型频率分布及相关原始数据；③HCC病例组均经组织病理学确诊。

1.3质量评估通过以下几方面对文献进行质量评估来评定其偏倚及影响程度:①研究对象是否有明确的纳入标准;②病例组及对照组来源情况; ③统计方法是否恰当;④对研究存在的偏倚是否进行了讨论;⑤实验设计是否合理;⑥对照组哈迪-温伯格遗传平衡(Hardy-Weinberg Equilibrium,HWE)情况。

1.4统计分析按Meta分析的要求分别收集、整理、核实及校对数据。采用RevMan 5.14统计软件进行Meta分析，对文献结果进行异质性检验(P>0.10 表示结果一致性较好，采用固定效应模型进行数据分析；P≤0.10则采用随机效应模型进行效应量的合并)。以比值比(odds ratio,OR) 及其95% 置信区间 (confidence interval,CI) 作为每个研究结果的研究效应测定指标。HWE采用http://krunch.med.yale.edu/hwsim/网站提供的HWSIM程序进行计算(P>0.05时表示群体基因遗传平衡，数据来自同一蒙德尔群体，且具有代表性；P<0.05表示群体缺乏代表性)。采用敏感性分析评价结果的稳定性，对纳入的文献使用倒漏斗图进行发表偏倚评价。

2结果

2.1文献概述检索符合纳入标准的文献7篇[9-15]，6篇为中国人群[10-15]，1篇为印度人群[9]；3篇英文及4篇中文文献，累计病例1448例，对照1529例。纳入研究的基本特点如表1。

2.2Meta分析结果

2.2.1Arg-allele vs His-allele异质性检验P<0.001，I2=78%，存在异质性，采用随机效应模型计算，OR=0.74，95%CI0.52~1.04,P=0.09 (图2)。

表1　纳入文献中观察组与对照组的一般资料

PCR-RFLP：限制性片段长度多态性聚合酶链反应；PCR-CTPP：四引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应；TaqMan:实时荧光定量聚合酶链反应；病例组：肝细胞癌患者，对照组：健康人群; 同一研究中的病例组及对照组中的基因检测方法均为同一检测方法(如均为PCR-RFLP、PCR-CTPP、TaqMan);基因分型中包含纯合子及杂合子，其中纯合子包含Arg/Arg(野生型)及His/His(突变型)，而杂合子指Arg/His

图1　XRCC1 Arg280His基因多态性与HCC易患性关系的Meta分析森林图(Arg-allele vs His-allele)

2.2.2Arg/Arg vs His/His异质性检验P=0.82，I2=0%，异质性较好，采用固定效应模型计算，OR=0.69，95%CI0.47~1.01,P=0.05。

2.2.3Arg/Arg vs.Arg/His+His/His异质性检验P=0.0003，I2=76%，存在异质性，采用随机效应模型计算，OR=0.78，95%CI0.52~1.17,P=0.24。

2.3亚组分析

2.3.1中国人群Arg-allele vs His-allele;Arg/Arg vs His/His;Arg/Arg vs Arg/His+His/His；Arg/Arg+Arg/His vs His/His比较，合并OR值分别为0.78 (95%CI0.53~1.15,P=0.20)；0.74(95%CI0.48~1.15,P=0.18)；0.91 (95%CI0.64~1.30,P=0.59)；0.70 (95%CI0.46~1.05,P=0.09) 。

2.3.2印度人群对印度人群进行分层分析，只有1个研究[2]共63例病例及155对照纳入分析，结果显示XRCC1 Arg280His基因多态性与HCC易患性的关联性不强，尚不能认为XRCC1 Arg280His Arg/Arg分型是HCC的易患基因或保护基因型。

2.3.3样本量>300例亚组分析将样本量>300例的研究重新进行Meta分析，共纳入4个研究[2]共1195例病例及1224例对照，结果显示对于总人群，Arg-allele vs His-allele;Arg/Arg vs His/His;Arg/Arg vs Arg/His+His/His；Arg/Arg+Arg/His vs His/His比较，合并OR值分别为1.00 (95%CI0.74~1.37,P=0.98)；0.75 (95%CI0.48~1.16,P=0.19)；1.03 (95%CI0.71~1.51,P=0.87)；0.87 (95%CI0.56~1.37,P=0.55) 。

2.4敏感性分析去除HWE检验P<0.05的研究[2]重新进行Meta分析，结果未发现明显改变；去除权重大的文献重新进行Meta分析结果亦未发现显著改变；分别采用固定效应模型及随机效应模型对研究进行统计分析结果亦无显著改变。以上提示结果稳定性较好，见表2。

表2　Meta分析结果敏感性分析

2.5发表偏倚Arg/Arg基因型与His/His基因型比较，Arg/Arg基因型与Arg/His+His/His基因型比较，Arg-allele与His-allele比较，发表偏倚均采用RevMan 5.14软件进行分析。漏斗图显示各研究之间分布均匀，提示存在发表偏倚的风险比较低，见图2。

图2　Arg-allele vs His-allele比较漏斗图

3讨论

XRCC1位于人第19号染色体的长臂(q13.2～13.3)，编码633个氨基酸，其编码的蛋白质与DNA聚合酶β、多聚ADP核糖聚合酶以及DNA连接酶Ⅲ结合形成复合体参与对机体DNA损伤的修复，是机体重要的DNA 修复基因。该基因第280密码子编码的氨基酸发生G→A变异引起Arg→His改变，该变异可能改变XRCC1基因的功能而导致肿瘤的发生。国内外很多关于XRCC1 Arg280His基因多态性与肿瘤易患性的关联研究，包括食管癌[16]、甲状腺癌[17]、乳腺癌[18]、前列腺癌[19]等。然而，关于XRCC1 Arg280His多态性与HCC易患性的研究样本量不大，且结果不尽相同，本研究拟采用Meta分析的方法评估该基因与HCC的关联性。

本研究纳入7个病例对照研究共1448 HCC病例及1529例健康对照，有4个[9-12]研究结果显示XRCC1 Arg280His与HCC的发生、发展密切相关，3个[13-15]研究显示否定两者相关性。本研究合并结果表明，XRCC1 Arg280His与HCC无关联性，得出无关联性结果最可能的原因是本研究纳入的很多属于小样本的研究，这可能导致在计算XRCC1 Arg280His与HCC关联性出现高风险选择性偏倚的可能。因此，该结果仍需要有更大样本量更严谨的研究纳入后重新证实其关联性，将>300例样本量的研究重新进行Meta分析，结果未显示实质性的改变，因此可以认为本研究Meta分析存在选择性偏倚的风险较低。在去除对照组的HWE<0.05的研究后重新进行分析，结果亦显示XRCC1 Arg280His与HCC无关联性(P>0.05)；同时，分别采用随机模型及固定模型进行分析，结果未发现实质性改变。以上敏感性分析结果一致性表明本研究结果可信度比较高。

然而，本研究仍存在以下局限性：首先，尽管所有纳入的病例及对照组均采用了一致的纳入标准，然而，仍有可能存在潜在其他的因素影响计算结果；其次，HCC是多因素共同导致的疾病，由于缺乏原始的数据而无法在有无病毒感染、有无黄曲霉素B1暴露、有无酒精背景等方面进行亚组分析；最后，由于数据缺乏而不能对纳入的研究进行基因-环境、基因-基因的相互作用进行分析。

尽管如此，本研究表明XRCC1 Arg280His与HCC无关联性。但结果仍需从基因-基因及基因-环境方面进行更大样本、更严谨的研究来证实，从而得到更可靠的循证医学证据，为HCC提供更进一步的防治措施。

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The Association Study of XRCC1 Gene Polymorphism and Hepatocellular Carcinoma Suspetibility

GONGWen-feng1,ZHANGQiu-ming2,ZHONGJian-hong1,BAITao1,HUANGShan1,XIANGBang-de1,MALiang1,LILe-qun1.

(1.DepartmentofHepatobiliarySurgery,AffiliatedTumorHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Nanning530021，China; 2.DepartmentofComprehensiveMedicalTreatment,theTenthAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Qinzhou535000，China)

Abstract:ObjectiveTo explore the association between X-ray repair cross-complementing group 1(XRCC1) Arg280His polymorphism and risk of hepatocellular carcinoma(HCC).MethodsPubMed,EMBASE and the Chinese National Knowledge Infrastructure databases were systematically searched to identify relevant studies.Odds ratios (ORs) with 95% confidence intervals (CIs) were used to assess the strength of the association.ResultsAltogether 7 studies were included in the meta-analysis,involving 1448 cases and 1529 controls.The XRCC1 Arg280His polymorphism were not significantly associated with increasing or decreasing risk of HCC (Arg-allele vs His-allele:OR=0.74,95%CI0.52-1.04,P=0.09;Arg/Arg vs His/His:OR=0.69,95%CI0.47-1.01,P=0.05;Arg/Arg vs Arg/His+His/His:OR=0.78,95%CI0.52-1.17,P=0.24).ConclusionXRCC1 Arg280His polymorphism may not be involved in HCC.

Key words:Hepatocellular carcinoma; X-ray repair cross-complementing group 1; Polymorphism; Meta-analysis

收稿日期：2014-08-04修回日期：2015-09-23编辑：楼立理

基金项目：国家自然科学基金(81160262)；广西科学技术厅(桂科攻2011GXNSFD018032)

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.23.041

中图分类号：R735.7； R181.23

文献标识码：A

文章编号：1006-2084(2015)23-4337-04