雅培i4000快速测定血浆丙戊酸浓度及在儿科中的应用效果

夏 宁，刘海菊，范久波，沈 伟，李智山，程 瑾

(湖北省襄阳市中心医院，湖北 襄阳 441021)

雅培i4000快速测定血浆丙戊酸浓度及在儿科中的应用效果

夏 宁，刘海菊，范久波，沈 伟，李智山，程 瑾

(湖北省襄阳市中心医院，湖北 襄阳 441021)

目的 通过评估丙戊酸钠(VPA)血浆浓度与疗效的关系，探讨用雅培i4000为儿科患儿提供VPA快速检测服务的可能性。方法 收集122例患儿血浆，在i4000和AXSYM上分别检测VPA浓度，比较VPA浓度与疗效的关系，然后按年龄和VPA浓度分组比较药物浓度分布规律，最后对两台仪器检测结果进行回归分析。结果 VPA浓度50～100 mg/L组和<50 mg/L组，总有效率分别为89%，66%，2组比较有显著性差异；不同年龄段患儿血浆VPA浓度分布不一致，5～10岁、>10～15岁患儿在有效VPA浓度组内的例数显著高于0～5岁组；i4000和AXSYM结果回归方程为：y=2.370 1+0.949x，相关系数r=0.961。结论 在雅培i4000上检测VPA血浆浓度操作简便、快捷，结果准确可靠，非常适合儿科患儿血药浓度的快速检测。

丙戊酸钠；化学发光微粒子免疫检测法；癫痫；药物浓度监测；雅培i4000

丙戊酸钠(VPA)是一种临床常用的相对广谱的一线抗癫痫药物，其口服吸收迅速而完全，临床用以预防和控制癫痫发作，对各种类型的癫痫均有良好疗效，其治疗有效浓度范围为50～100 mg/L，其药动学和药效学的个体差异大，且儿童服用时依从性不强，致血药浓度往往波动较大，因血药浓度与临床疗效呈相关性，故儿科医生必须定期监测VPA的浓度以确保安全、有效地用药。本院于2012年对在美国雅培公司i4000全自动免疫分析仪上开展VPA检测并进行了疗效评价，检验结果也获得了临床医生认可，同时与AXSYM结果进行了对比分析，现报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选择2012年1月10日—6月30日在本院门诊和住院服用VPA患儿122例，年龄0.5～15岁，平均7.6岁。患儿分布在儿科、神经内科及神经外科，经脑CT、MRI、脑电图及其他实验室检查确诊为癫痫并长期服用丙戊酸钠。

1.2 仪器与试剂 美国雅培公司i4000全自动免疫分析仪及其配套试剂(以下简称i4000)，采用化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)检测VPA浓度。检测之前仪器按手册进行定标，并做质控。美国雅培公司AXSYM全自动免疫分析仪及其配套试剂，采用均相法——荧光偏振发光法(FPIA)，按手册要求进行操作。

1.3 检测方法 服用VPA患儿达稳态(5～10个半衰期，且服药时间大于5 d，其半衰期为6～15 h)后，于末次服药前，用BD公司紫头管采集静脉血2 mL，3 000 r/min离心10 min分离出血浆，原管直接在i4000上进行检测，仪器线性范围为2.0～150 mg/L。检测完成后收集血浆于-20 ℃冰箱保存，每月在AxSYM上集中测定1次，AxSYM线性范围为0.7～150 mg/L。

1.4 参考范围 i4000全自动免疫分析系统，VPA 50～100 mg/L为最佳浓度范围。

1.5 疗效判断标准 疗效由医生、患儿及家属一起进行评价，与其本人用药前进行比较，按发作次数减少的百分率进行判定：显效为发作次数减少75%以上；有效为发作次数减少50%～75%；效差为发作次数减少25%～50%；无效为发作次数减少25%以下。总有效率=显效率+有效率。

1.6 统计学处理 采用SPSS 12.0软件进行统计分析。回归分析以AXSYM测定结果为x，i4000测定结果为y，进行直线回归。

2 结 果

2.1 VPA血浆浓度与疗效的关系 按VPA实测浓度将患儿分为<50 mg/L组41例、50～100 mg/L组71例和>100 mg/L组10例，50～100 mg/L组和<50 mg/L组总有效率比较有显著性差异(P<0.05)，见表1。<50 mg/L组疗效差的14例患儿调整用药剂量后，10例患儿浓度上升至有效浓度内，8例治疗有效。>100 mg/L组的6例患儿降低药物用量5 d后，血药浓度降至有效浓度内，观察疗效未见明显下降。

表1 VPA血药浓度与疗效关系 例(%)

2.2 不同年龄段患儿血浆VPA浓度比较 按年龄段将患儿分为3组，结果5～10岁组、>10～15岁组VPA浓度在有效浓度内的例数显著高于0～5岁组。见表2。

表2 不同年龄段患儿血浆VPA浓度分布 例

注：①与0～5组比较，P<0.05。

2.3 i4000与AXSYM结果相关性分析 122例患儿结果直线回归方程为y=2.370 1+0.949x，相关系数r=0.961。

3 讨 论

VPA抗痫谱广、疗效高，是较理想的抗癫痫药物，可以单独使用或者与其他抗癫痫药物联合应用，在治疗儿童中常见的强直阵挛性发作和肌肉阵挛性发作疗效稳定，尤其是对许多使用其他抗癫痫治疗无效的患儿有很好的治疗效果，且不会产生药物耐受，因而是儿科医生首选药物之一。临床研究证实，由于该药在临床上的安全范围窄，服药周期长且儿科患儿用药依从性不强，因而理论药物剂量与实际血药浓度之间可能存在差异，使患儿的血药浓度波动很大，往往会给临床治疗带来极大的困扰，为确保患儿血药浓度能最大限度地发挥疗效并处于安全范围内，定期监测血浆VPA 浓度是非常必要的。本院采用荧光偏振免疫分析法[1]开展血浆VPA 浓度监测，但成本高，且检测周期较长，自2012年起采用i4000快速检测血浆VPA浓度，仪器灵敏度为2 mg/L，特异性高，因此临床反映很好。

美国雅培公司i4000全自动免疫分析仪检测VPA，其原理是采用化学发光微粒子免疫检测法，先将血浆、丙戊酸抗体包被的带磁性的微粒子和吖啶酯标记的丙戊酸结合物制成反应混合物，血浆中的丙戊酸和已标记的丙戊酸竞争结合丙戊酸抗体，在加入预激发液和激发液后，检测产生的化学发光反应，即可换算成血浆中的VPA浓度，由于是采用一步法免疫检测，在仪器中设定为急诊模式，因而检测速度快，30 min后就可发报告。

临床上监测VPA血药浓度时,常规给药剂量通常有50%左右低于或超出有效治疗范围，而绝大多数为低于有效治疗范围[1-3]。本研究122例患儿VPA检测结果表明，71例VPA浓度在有效浓度范围内，51例在范围外，其中41例是低于有效浓度，有效浓度范围内的71例其疗效优于<50 mg/L组，与梁国安等[4]观察的结果一致，表明药物浓度监测是临床用药治疗的有效保证。通过对血浆浓度<50 mg/L疗效差的患儿调整用药剂量后，大部分患儿血药上升至有效浓度内，血浆浓度>100 mg/L的患儿降低药物用量5 d后，血药浓度降至有效浓度内，观察疗效未见下降，以上表明i4000检测结果可信，可用于指导癫痫患儿的临床治疗。根据不同年龄段统计药物浓度结果表明，患儿中的药动学和药效学个体差异较大，年龄越小患儿血浆VPA浓度不容易控制在理想范围内，原因一是这个年龄段儿童处于生长发育期，各项生理功能尚未完善，血药浓度控制波动较大；其二是年龄越小，药物代谢越快，因而对于5岁以下儿童可考虑适当增大药物剂量或用药频率，并连续监测血药浓度，实际工作中还需要考虑到联合用药时其他药物对VPA浓度的负向作用[2，5]，制剂因素和患儿的生理和病理指标等多方面原因。

研究结果也显示，有10例患儿药物浓度超标，最高的超过20%，虽然疗效很好，但可出现消化不良等不良反应[6]，应引起关注。

AXSYM也是雅培公司一款经典免疫分析仪，采用抗原抗体反应并结合荧光标记技术原理，具有准确性好、特异性高，操作简便、快速，样本用量少并且不需预处理等优点[7]，检测过程自动化程度高，可用于药物浓度的急诊分析，因而受到临床的欢迎，但随着雅培公司新产品的推出，近年来已逐步退出市场，公司也不再提供配套试剂。为满足临床需要，本院将VPA检测项目调整到i4000上进行检测，为证实i4000与AXSYM上的检验结果是否存在相关性，122份标本在两台仪器上分别进行检测，结果显示两台仪器相关系数为0.961，表明两台仪器相关性良好，故i4000上检测VPA可代替AXSYM用于VPA的检测。HPLC法也是临床常用的药物检测方法，其测定人血浆中的VPA浓度，具有灵敏度高、专属性强特点，但VPA的紫外吸收弱，测定前需要衍生化处理，操作步骤多，而i4000所有加样品、样本稀释、加试剂、检测读数都是自动完成，无需对样品进行提取等预处理，既节约了时间，又减少了有机溶剂对实验室技术人员及环境的危害，因而检测操作较气相色谱法[8]简单，检测过程更易控制，适用于血药浓度的常规监测。

总之，癫痫患儿应用VPA个体差异较大，监测其血药浓度，对实施个体化给药、提高疗效和保证用药安全具有重要意义[4]。i4000上检测VPA样本采用原管上机，采用急诊检测模式，操作简便、快捷，标本检测周期在30 min内，因此非常适合用于临床VPA血药浓度的快速检测。

[1] 黄丽娜,蔡旭镇. PFIA法测定450例癫痫患者丙戊酸钠的血药浓度[J]. 齐鲁药事,2008,27(10):608-609

[2] 唐莲,周黎,虞燕霞,等. 126例丙戊酸钠血药浓度未达标病例的临床分析[J]. 中国药学杂志,2012,47(24):2040-2042

[3] 阳利龙,银雪花,祝文兵,等. 柱前衍生RP-HPLC法测定丙戊酸钠的血药浓度及监测结果分析[J]. 儿科药学杂志,2012,18(1):27-30

[4] 梁国安,姚桂飞. 小儿癫痫丙戊酸钠血药浓度监测的临床研究[J]. 海峡药学,2013,25(2):248-250

[5] 龚志成,马虹英,莫蒙丽,等. 癫痫患者丙戊酸血药浓度监测及其影响因素[J]. 中国医院药学杂志,2010,30(15):1300-1302

[6] 李学庆,索丽霞,邵亚军. 丙戊酸钠的合理应用简述[J]. 中国药业,2010,19(14):67-68

[7] 王晓秋,温怀凯,邵素倩,等. 荧光偏振免疫分析法监测丙戊酸血药浓度的结果分析[J]. 放射免疫学杂志,2012,25(2):230-231

[8] 李静. 高效毛细管气相色谱法测定片剂中丙戊酸钠含量[J]. 科技与企业,2013,19(6):335

Rapid determination of plasma concentration of valproic acid with Abbott i4000 and the application effect in pediatrics

Xia Ning, Liu Haiju, Fan Jiubo, Shen Wei, Li Zhishan, Cheng Jin

(Xiangyang Central Hospital, Xiangyang 441021, Hubei, China)

Objective It is to explore the relationship between plasma concentration of sodium valproate (VPA) and clinical curative effect, in order to explore the possibility of fast detection of VPA provided by i4000 for pediatric patients. Methods VPA concentration in 122 patients were detected by i4000 and AXSYM respectively, and the relationship between plasma concentration of VPA and clinical curative effect was compared, then the regularities of distribution of VPA concentration also were analyzed according to age and VPA group. Finally, the regression analysis of results from the two instruments was carried out. Results Effective rate in 50～100 mg/L group and <50 mg/L group was 89%, 66% respectively, and the difference was statistically significant. The VPA plasma concentration distribution in patients with different ages was inconsistent, The number in 5 to 10 years old,10 to 15 years group with the effective plasma VPA concentration was significantly higher than?the number in the 0-5 age group. The regression equation of results from i4000 and AXSYM wasy=2.370 1+0.949xand correlation coefficientr=0.961. Conclusion The VPA detection on i4000 is rapid and easy to operate, and the results are accurate and reliable, so i4000 is very suitable for rapid detection of blood drug concentration for pediatric patients.

sodium valproate; chemiluminescence particles immunoassays; epilepsy; drug concentration monitoring; Abbott i4000

夏宁(1970—)，男，主管药师，主要研究方向是药物分析。

范久波，E-mail：fanjiubo@126.com

国家自然科学基金资助项目(81202539)

10.3969/j.issn.1008-8849.2014.02.002

R969.4

A

1008-8849(2014)02-0117-03

2013-06-15