揉筋方对紧张型头痛模型大鼠血浆及脑组织NO及NOS影响的实验研究

杨宇 郭宁宁 王新洁 贺雪萤 马天洋

揉筋方对紧张型头痛模型大鼠血浆及脑组织NO及NOS影响的实验研究

杨宇 郭宁宁 王新洁 贺雪萤 马天洋

目的研究紧张型头痛模型大鼠经揉筋方灌胃一段时间后, 大鼠血浆及脑组织中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的变化情况。方法将40只大鼠正常喂养半个月后, 取10只大鼠定义为对照组, 在其颈部注射生理盐水；其余30只均在颈部注射ATP诱导大鼠出现紧张型头痛, 并将其随机分为模型组、揉筋方组、羊角颗粒组, 每组10只。分完组后, 对照组及模型组大鼠均经正常饮用水灌胃；而揉筋方组及羊角颗粒组大鼠分别经揉筋方药物及羊角颗粒药物灌胃。4组大鼠均灌胃一段时间后, 测定其血浆及脑组织中NO含量及NOS的活性。结果对照组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性均显著低于其他3组(P＜0.05)；模型组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性明显高于揉筋方组及羊角颗粒组；揉筋方组及羊角颗粒组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性比较时, 揉筋方组明显低于羊角颗粒组(P＜0.05)。结论揉筋方药物可能通过调节血浆及脑组织中NO含量及NOS活性, 进而起到缓解头痛的作用, 但其具体机制有待进一步研究。

揉筋方；紧张型头痛模型；一氧化氮；一氧化氮合酶

据临床疾病统计结果得知, 紧张型头痛的发病率呈现出逐年上升的趋势［1］。紧张型头痛的病因复杂, 可能与社会心理压力、焦虑、抑郁等精神因素、肌肉紧张、滥用止痛药物等有关。该病病程较长且常反复发作, 严重降低了此类患者的生活质量。临床中常用揉筋方药物治疗, 该药物可明显缓解患者头痛症状［2］, 因此疗效显著。据相关报道表明, 此类头痛与血浆及脑组织中一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)的活性有关。由于紧张型头痛的发病因素及机制尚不明确, 因此本文通大鼠实验进而探讨紧张型头痛模型大鼠经揉筋方灌胃一段时间后, 大鼠血浆及脑组织中NO、NOS的变化情况。具体报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 实验器材包括：药剂(ATP、生理盐水、揉筋方、羊角颗粒药物等)、试管、电子天平、灌胃针、固定器、手术台、秒表、玻璃匀浆器、分光光度计等。本文选用的大鼠来源于沈阳医学院实验动物中心, 属于Wistar系列, 40只大鼠中雌雄比例为1:1, 体重219～283 g。

1.2方法 将40只大鼠正常喂养半个月后, 随机取出10只大鼠将其定义为对照组, 在其颈部注射生理盐水；其余30只均在颈部注射ATP诱导大鼠出现紧张型头痛, 并将其随机分为模型组、揉筋方组、羊角颗粒组, 每组10只。分完组后,对照组及模型组大鼠均经正常饮用水灌胃；揉筋方组大鼠经揉筋方药物灌胃, 该药物中含有40 g白芍、10 g炙甘草、15 g木瓜、12 g天麻、10 g卷柏及10 g羌活等中药成分, 药物制备方法是经水煎30 min提取2次后再水煎, 直至药物浓度为1 g/ml为止, 处于冰箱中冷藏保存；羊角颗粒组大鼠经羊角颗粒药物灌胃, 配置方法是用蒸馏水制成浓度为0.165 g/ml的药物, 处于冰箱中冷藏保存。4组大鼠均灌胃一段时间后, 在末次灌胃后1 h, 经分光光度计测定出血浆和脑组织中的NO含量、经比色法测定血浆及脑组织中NOS活性, 进而比较4组测定结果。

1.3统计学方法 用SPSS18.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差)形式表示, 实施t检验；计数资料以率(%)形式表示, 实施χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

测定并比较对照组、模型组、揉筋方组、羊角颗粒组大鼠经不同物质灌胃一段时间后, 其血浆及脑组织中NO含量及NOS的活性。具体结果见表1。对照组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性均显著低于其他3组, 差异有统计学意义(P＜0.05)；模型组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性明显明显高于揉筋方组及羊角颗粒组, P＜0.05；揉筋方组及羊角颗粒组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性比较时, 揉筋方组明显低于羊角颗粒组, 差异有统计学意义(P＜0.05)。

表14组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性比较

表14组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性比较

注：对照组与其他三组比较,aP＜0.05；模型组与揉筋方组及羊角颗粒组比较,bP＜0.05；揉筋方组与羊角颗粒组比较,cP＜0.05

组别血NO(mmol/L)血NOS(U/gprpt)脑NO(mmol/L)脑NOS(U/gprpt)对照组 33.64±1.73a13.39±0.71a15.80±0.81a1.06±0.66a模型组51.68±2.5217.89±0.7525.83±0.841.60±1.18揉筋方组 33.17±1.08bc13.39±1.03bc6.71±0.71bc1.23±0.72bc羊角颗粒组 37.11±1.93b15.43±0.56b21.41±0.58b1.25±0.58b

3 讨论

临床研究表明, 揉筋方药物对于紧张型头痛的疗效显著,可明显缓解患者头痛症状。由于揉筋方药剂包含白芍、炙甘草、木瓜、天麻、卷柏及羌活等中药成分, 其中白芍、甘草、天麻成分具有明显的镇痛、镇静作用；芍药与甘草联合应用时可有较抑制致痛因子及炎性因子等, 进而起到较强的镇痛效果［3］。近年来, 相关研究表明, 紧张型头痛与血浆及脑组织中的NO含量及NOS活性有关。NO属于一种新型递质及信息传递分子, 与机体内的细胞信号传递、神经修复、疼痛调制等多种生理过程及生命活动有关。NOS是生成内源性NO的最主要限速物质。NO引发头痛的可能机制包括：NO传递细胞毒性作用, 导致脑血管舒张, 诱发头痛；促进降钙素的释放, 引发神经源性炎症反应；增强体内的环磷酸鸟苷浓度, 导致血管平滑肌松弛, 进而扩张血管, 引发头痛；刺激三叉神经, 导致血管性多肽增多, 引发无菌性炎症；降低血管旁感觉神经功能；刺激前列腺素, 激发伤害性感觉神经元；引起中枢神经对痛觉的敏感度［4］。

本文通过将40只大鼠随机平均分为对照组、模型组、揉筋方组、羊角颗粒组, 比较4组大鼠血浆及脑组织中的NO含量及NOS活性, 进而分析揉筋方对紧张型头痛模型大鼠血浆及脑组织NO及NOS影响的实验研究。结果得出, 对照组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性均显著低于其他3组；模型组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性明显明显高于揉筋方组及羊角颗粒组；揉筋方组及羊角颗粒组大鼠血浆及脑组织中NO含量及NOS活性比较时, 揉筋方组明显低于羊角颗粒组。

综上所述, 揉筋方药物可通过调节血浆及脑组织中NO含量及NOS活性, 进而起到缓解头痛的作用, 但其具体机制有待进一步研究。

［1］ 吴宏赟.揉筋方对紧张型头痛大鼠张颌反射的影响及机制研究.中国医药导报, 2012, 3(9):21.

［2］ 全伟.紧张型头痛血浆NO、NOS含量变化的临床和实验研究.山东中医药大学, 2011.

［3］ 胡志强.揉筋方对紧张型头痛模型大鼠血浆及脑组织NO、NOS 的影响.山东医药, 2011, 35(51):43.

［4］ 吴宏赟.揉筋方对紧张型头痛模型大鼠脑组织神经元型NOS活性表达的影响.江苏中医药, 2011, 10(43):87.

2014-07-17］

110034 沈阳医学院生理学教研室(杨宇)；沈阳医学院2012级临床医学系学生(郭宁宁 王新洁 贺雪萤 马天洋)