1229例甲真菌病致病菌分离培养结果分析

刘春玲，刘方，张迪，姜志辉，姜宝强，何焱玲

（首都医科大学附属北京朝阳医院，北京100020）

甲真菌病是指由皮肤癣菌、非皮肤癣菌及酵母菌等真菌引起的甲感染[1]，是皮肤科常见病、多发病，具有传染性，既影响患者日常人际交往，也不同程度影响了患者的生活质量，因此甲真菌病越来越受到人们的重视。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源 所有标本均来源于我科门诊2006年5月—2010年12月临床初诊为甲真菌病患者1229例，其中男426例，女803例，年龄3～75岁，平均41.4岁，所有病甲同时进行直接镜检和真菌培养。

1.1.2 镜检 用10%KOH为载液将病甲屑制片,直接镜检观察真菌形态,并判断致病菌。

1.1.3 培养基 沙氏培养基、念珠菌显色平皿均为天津金章有限公司产品，均在有效期内使用。10%氢氧化钾溶液（KOH）为实验室自配。

1.2 方法

1.2.1 标本采集涂片 75%乙醇严格消毒后用无菌取材刀刮取碎屑,根据病甲的类型采取不同的取材方法。远端侧位甲下型：伸入远端甲板内侧，刀口朝上刮取甲床甲屑；白色浅表型：取甲板表面甲屑；近端甲下型：先削去正常甲板，再从近端甲床取材；全甲营养不良型：取整甲表面甲屑。一部分标本以10%KOH溶液消化后直接镜检，镜检阳性者的资料登记备案；另一部分立即接种于沙氏琼脂斜面置于25℃的恒温箱中培养2周，每2～3 d观察1次。

1.2.2 菌种鉴定 根据菌落生长速度的快慢、形态特征及菌落颜色、镜下孢子及菌丝的特征等将其鉴定到种。念珠菌用念珠菌显色平皿显色鉴定到种。

2 结果

1229例甲真菌镜检阳性患者中，591例培养阳性，阳性率48.09%。其中皮肤癣菌311株（52.62%），酵母菌 188株（31.81%），霉菌 92株（15.57%）。具体见表1及图1。

表1 591株真菌菌种分析例（%）

3 讨论

甲真菌病是一类常见的真菌感染性疾病，发病率高，具有传染性，容易复发和再感染，影响患者的生活质量[2]。甲外伤、不良卫生习惯、潮湿环境、伴自身免疫性疾病、使用免疫抑制剂等更容易导致甲真菌病发病。在就诊人群中以女性居多，可能与以下因素有关：美甲、穿尖头鞋、高跟鞋及从事家务劳动，均容易导致甲的损伤，增加真菌感染机会；女性更注重甲真菌病对自身及家人生活质量的影响，到医院就诊更积极。

1229例甲真菌镜检阳性患者中，591例培养阳性，阳性率48.09%。其中皮肤癣菌311株（52.62%），酵母菌188株（31.81%），霉菌92株（15.57%）。甲真菌病致病菌的分离培养结果显示：皮肤癣菌感染甲以红色毛癣菌为主，占50.08%，须癣毛癣菌与紫色毛癣菌合计占2.54%。酵母菌感染188株，占31.81%，以克柔念珠菌为主，占16.92%，其次为光滑念珠菌5.58%，热带念珠菌和白念珠菌分别为3.89%和2.37%。霉菌感染霉菌92株（15.57%），以曲霉为主，占10.15%，其次为青霉，占5.08%。

甲真菌病病原菌的构成比例受地理环境、季节气候等多种因素的影响[3]。张晓辉等[4]研究显示，广州市甲真菌病病原菌中主要致病菌为酵母菌,其次为皮肤癣菌。这与南方气候较北方气候潮湿，更适合酵母菌生长有关。国内外一些地区的调查表明，甲真菌病的病原菌菌种构成及分布存在地区差异，而且随着人口流动、环境因素变化及治疗干预等，同一地区的菌种也会发生变迁[3-5]。本研究结果与该地区1980—1994年期间甲真菌病病原菌的构成[5]存在差异。后者研究结果显示致病真菌以皮肤癣菌为主（77.6%，其中红色毛癣菌具有绝对优势，占72.0%），酵母菌次之（14.1%），霉菌最少（8.3%）。相比较而言，本研究结果显示皮肤癣菌的比例有所下降，酵母菌和霉菌所占比例上升。近年来的流行病学调查表明，除皮肤癣菌外，酵母菌及霉菌所占比例有上升的趋势，本研究也支持这一观点。

念珠菌是常见的条件致病菌，近年来其耐药的报道逐渐增多。念珠菌性甲真菌病的增多应引起医务人员的高度重视。本研究酵母菌中以克柔念珠菌为主，其后依次为光滑念珠菌、热带念珠菌、白念珠菌，与赖维[6]、刘玉梅[7]的研究结果有所不同，表明在不同地区引起甲真菌病的念珠菌亚种构成比例也有所不同。陈丽娜和陈永年等[8]研究结果表明，在酵母菌中以红酵母为主，其后依次为克柔念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、白念珠菌。陈丽娜，温海[9]研究结果表明，在酵母菌中，克柔念珠菌为10.14%，白念珠菌5.86%，说明在甲念珠菌病中，白念珠菌感染已不占首位，本研究也支持这一观点。许多研究发现克柔念珠菌比白念珠菌毒力弱,但它对非生物表面的粘附力却非常强大,它能凭借细胞表面疏水性附着于无生命物质的表面并繁殖[10]。在人体免疫力低下或有甲外伤时容易导致甲真菌病，对于酵母菌及霉菌的致病性，还有待近进一步的研究。

甲真菌病致病菌的分离培养，一方面可以明确致病菌的种类和构成情况，另一方面对临床用药具有指导意义。

[1]赵辨.临床皮肤病学 [M].第3版.南京:江苏科学技术出版社,2001:421.

[2]甲真菌病调查协作组.甲真菌病患者生活质量调查研究 [J].中华皮肤科杂志,2001,34（5）:364-366.

[3]俞进,李若瑜.国内甲真菌病病原学的流行病学调查[J].中国真菌学杂志,2006,1（1）:63-64.

[4]张晓辉,黄怀球，冯佩英，等.广州市185株甲真菌病病原菌构成分析[J].皮肤性病诊疗学杂志,2010，17（1），18-20.

[5]王爱平，王端礼，李若瑜，等.723例甲真菌病的真菌分离培养[J].中华皮肤科杂志，1995，28（6）:390-391.

[6]赖维，曾凡钦，卢念祖，等.广州地区甲真菌病病原菌流行病学的多中心研究[J].中国皮肤性病学杂志,2001,15（2）:86-87.

[7]刘玉梅，黎小东，林仕英，等.广州地区甲真菌病致病真菌的变迁趋势研究[J].中国微生态学杂志,2004,16（5）:312-313.

[8]陈丽娜，陈永年，肖红燕，等.甲真菌病316例观察报道[J].中国麻风皮肤病杂志，2004，20（6）：584.

[9]陈丽娜，温海，廖万清，等.临床疑诊甲真菌病1036例真菌学分析[J].中国皮肤性病学杂志，2004，18（4）：217-218.

[10]Klotz SA,Drutz DJ,Zajic JE.Factors governing adherence of Candida species to plastic surfaces[J].Infect Immun,1985,50:97-101.