新型猪口蹄疫O型疫苗应用效果试验

王华明 沈明华 黄玉萍 任 凯 叶仁贵 何春花

（1.江苏省扬中市动物疫病预防控制中心，扬中 212200；

2.江苏省扬中市农委，扬中 212200）

新型猪口蹄疫O型疫苗应用效果试验

王华明1沈明华1黄玉萍1任 凯1叶仁贵1何春花2

（1.江苏省扬中市动物疫病预防控制中心，扬中 212200；

2.江苏省扬中市农委，扬中 212200）

为有效防控生猪口蹄疫，我国采取了以免疫为核心的防治措施，取得了较好的效果。20世纪90年代，以口蹄疫全病毒灭活苗为主，进入21世纪后，以浓缩苗为主。为结合扬中市实际，制定切实有效的生猪口蹄疫免疫程序，进一步提升生猪口蹄疫科学防治水平，2011年9月～2012年10月，我们使用O型灭活苗（O/MAY98/BY/2010株）和O型合成肽疫苗在扬中市油坊、西来桥二个镇的3个规模猪场进行了分组试验，现将试验结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 试验猪

扬中市良友畜禽养殖有限公司、扬中市众康养殖场、扬中市西来桥镇海鑫养殖场3个生猪养殖场里各选取的250头45日龄健康仔猪。3个猪场试验猪品种均为杜×长×大。

1.1.2 试验疫苗

猪口蹄疫O型灭活苗（O/MAY98/BY/2010株）。生产厂家：中农威特生物科技股份有限公司。批号：H111268J。

猪口蹄疫O型合成肽疫苗。生产厂家：新疆天康畜牧生物技术股份有限公司。批号：2011028。

猪口蹄疫O型合成肽疫苗。生产厂家：中牧实业股份有限公司兰州生物药厂。批号：1111002。

1.1.3 主要仪器与试剂

酶标仪 680型 北京元业伯乐；单道微量加样器10～100 μl，20～200 μl；多道微量加样器50～300 μl ，上海大龙；电热培养箱 HPX-9082MBE 上海博迅；湿盆；量筒；烧杯；

猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒。生产厂家：上海优耐特生物医药有限公司。批号：201012004。

猪O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA诊断试剂盒。生产厂家：中国农业科学院兰州兽医研究所。批号：2012091901。

1.2 试验方法

1.2.1 试验猪选择

分别在3个养殖场随机选择250头45日龄健康仔猪作为对比试验对象。

1.2.2 试验步骤

将试验猪随机平均分成2组，第1组、第2组于45日龄分别注射口蹄疫合成肽疫苗、口蹄疫试验灭活苗各1 ml。65日龄前腔静脉采血5 ml，同时第1组注射口蹄疫合成肽疫苗1 ml，第2组注射试验灭活苗1 ml。试验猪85日龄时，前腔静脉采血5 ml。血样以3 000r/min离心20 min，吸出血清，4℃保存。选择2012年2月27日试验猪作为疫苗抗体跟踪组群，于二免后6周、9周、12周，即105日龄、130日龄、150日龄分别在前腔静脉采血5 ml。血样以3 000 r/min离心20 min，吸出血清，4℃保存。

1.2.3 免疫抗体检测

口蹄疫合成肽疫苗免疫猪的抗体采用猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA方法进行检测。

口蹄疫浓缩疫苗免疫猪的抗体采用O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA方法进行检测。

表1 扬中市良友畜禽养殖有限公司免疫抗体

表2 扬中市众康养殖场免疫抗体

表3 扬中市西来桥镇海鑫养殖场免疫抗体

表4 65、85日龄免疫抗体汇总表

表5 抗体跟踪检测汇总表

2 结果

2.1 免疫抗体

对试验动物免疫抗体进行了检测，结果详见表1。

2.2 数据分析

首免后20 d的抗体合格率：合成肽免疫组3个点均为100%，灭活苗免疫组3个点分别为：85.6%、84.25%、86.5%，平均85.22%；加强免疫后20 d抗体合格率：合成肽组3个点均为100%，灭活苗组3个点分别为94.35%、94.3%、91.93%，平均95.53%。第1次、第2次免疫抗体合格率合成肽组比灭活苗组分别高14.78个百分点、4.47个百分点。水平看，合成肽苗免疫后抗体产生速度快，抗体合格率高，免疫效果要优于灭活苗。因本次试验免疫抗体分多批检测，试验中不可避免的会产生一定的误差，但是对评价2种疫苗的免疫效果仍有一定的参考意义。

105、130、150日龄合成肽组抗体合格率分别为：100%、83.33%46.67%；灭活苗组分别为：90%、80%、40%；2种疫苗2次免疫后9周内抗体合格率均保持在80%以上，2免后12周时抗体合格率低于50%。

3 讨论

使用2种不同的猪口蹄疫疫苗免疫的750头仔猪，在首免后3周内抗体阳性率均达到江苏省农委动物防疫部门的要求（阳性率80%以上）。其中合成肽疫苗免疫组，在免疫后3周内抗体阳性率为100%，灭活苗（O/MAY98/BY/2010株）免疫组，在免疫后3周内抗体阳性率为89.33%。2种疫苗经过2次注射均能达到较好的效果，从免疫抗体水平看，合成肽苗免疫后抗体产生速度快，抗体合格率高，免疫效果要优于灭活苗。因本次试验免疫抗体分多批检测，试验中不可避免的会产生一定的误差，但是对评价2种疫苗的免疫效果仍有一定的参考意义。2种苗免疫后12周合格率都低于50%，我们认为第2次免疫后第10周需进行加强免疫。

2种苗副反应都很轻，养猪场（户）容易接受，但合成肽疫苗成本较高，试验苗和对照的合成肽疫苗价格相差较大，合成肽疫苗没有价格优势，在部分地区推广有一定难度，如果考虑政府财政状况我们使用的灭活苗也是很好的选择。

限于条件我们没有进行攻毒试验。我们计划跟有关部门合作开展动物攻毒试验，这样将更能科学地评价2种疫苗的免疫效果。

江苏省2011年农业三新工程项目[SX（2011）183]。